梁萧
- 作品数：46 被引量：185H指数：8
- 供职机构：中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生经济管理更多>>
- 食管鳞癌细胞系核苷酸还原酶亚单位M1的表达水平与细胞对吉西他滨敏感性的关系被引量：3
- 2009年
- 目的探讨食管鳞癌细胞系核苷酸还原酶亚单位M1（RRM1）表达水平与细胞对吉西他滨（GEM）敏感性的关系。方法选用4个人食管鳞癌细胞系Eca-109、Kyse-150、Kyse-450和9706，采用Western blot和逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测各细胞系的RRM1表达水平，采用细胞毒性试验检测各细胞系对GEM的敏感性。以50nmoL／L GEM持续培养Kyse-450细胞，检测不同时点存活细胞RRM1表达水平的变化。应用RNA干扰技术下调RRMl表达水平后，检测细胞对GEM敏感性的变化。结果GEM作用48h，Eca-109、Kyse-150、Kyse-450和9706细胞的IC50分别为（0．92±0．17）、（0．48±0．11）、（0．29±0．06）和（0．02±0．01）mmol／L。RT—PCR和Western blot结果均显示，Eca-109细胞系的RRM1表达水平最高，其次是Kyse-150和Kyse-450，9706细胞系的RRM1表达水平最低。50nmol／L GEM持续培养Kyse-450细胞后，存活细胞的RRM1水平随着培养时间的延长而逐渐增高。转染RRM1 siRNA的Kyse-450细胞RRM1蛋白的表达水平显著降低，而对GEM的敏感性提高了4．26倍。结论食管鳞癌细胞系RRM1的表达水平与细胞对GEM的敏感性相关，RRM1表达水平低的细胞对GEM相对敏感。
- 罗扬林晨张雪艳梁萧付明冯奉仪
- 关键词：食管肿瘤吉西他滨
- 腺病毒介导的p16和顺铂的联合应用对胆管癌细胞系QBC939的生长抑制作用被引量：12
- 2000年
- 目的研究 p16基因和顺铂联合应用对胆管癌细胞的作用.方法将重组体腺病毒 p16(Ad-p16)和顺铂联合作用于人胆管癌细胞 QBC939,对 p16基因的表达、细胞的生长抑制及机制进行分析.结果用 Ad-LacZ 进行重组体腺病毒转导效率的检测,发现当MOI 为100以上时,重组体腺病毒可使90%以上的培养的人胆管癌 QBC939细胞被转导.用 RT-PCR 方法检测,在胆管癌QBC939细胞系中 p16呈低表达.重组体腺病毒能介导外源基因 p16在胆管癌 QBC939细胞系中高效表达,重组体腺病毒介导的 p16在 QBC939细胞中表达,能抑制 QBC939细胞的生长和集落形成.其与顺铂联合应用对 QBC939细胞的生长抑制具有明显作用.并显著地抑制该肿瘤细胞的克隆形成能力.流式细胞计数证实 p16能诱导 PBC939细胞发生凋亡并导致其发生 G_1期阻滞,顺铂能诱导 QBC939细胞发生凋亡并导致细胞发生明显的 G_2期阻滞.结论 p16基因能够增加 QBC939细胞对顺铂的敏感性.
- 鲁建国林晨黄志强吴金生付明张雪艳梁萧要秀吴旻
- 关键词：胆管癌P16基因腺病毒
- 重组腺病毒介导反义c-myc基因对人肝癌细胞系的治疗作用被引量：1
- 2000年
- 目的：探讨重组腺病毒介导反义 c-myc基因(Ad-ASmyc)治疗人肝癌细胞的作用。方法：观察 Ad-ASmyc对人肝癌细胞系的转导效率，通过细胞生长曲线、克隆形成实验、 DNA片段化分析、RT-PCR、裸鼠皮下移植瘤治疗实验，分析 Ad-ASmyc对人肝癌细胞系 Bel-7402、 QSG-7701、 SMMC-7721和 HCC-9204细胞生长和 c-myc基因表达及裸鼠肿瘤生长的抑制作用。结果： Ad-ASmyc可高效转导人肝癌细胞系，抑制细胞生长；转染细胞克隆形成能力降低，克隆成活率为对照组的53.9％～69.1％，c-myc基因表达下降；Ad-ASmyc处理肝癌细胞， DNA凝胶电泳出现明显的梯形条带，瘤内注射 Ad-ASmyc可抑制裸鼠皮下移植瘤生长。 结论：重组腺病毒介导的反义 c-myc基因转移，有可能成为肝癌基因治疗的一种有效方法。
- 林晨张海增梁萧张雪艳付明吴旻余昌中
- 关键词：腺病毒载体反义C-MYC
- 基因重组趋化抗原疫苗
- 本发明涉及一种重组基因序列，该序列包括人SLC基因，抗原基因和IgG1的Fc片段基因，其中在抗原基因上游连接SLC基因；在抗原基因下游连接IgG1的Fc片段基因。本发明还涉及该重组基因序列在制备基因疫苗中的应用。
- 张叔人林晨孙文欣覃汉军周春霞梁萧王冬梅马文波张雪燕付明
- 文献传递
- 食管鳞癌组织芯片中MTA1蛋白表达的免疫组织化学研究被引量：3
- 2007年
- 目的研究食管鳞癌组织中转移相关基因MTA1蛋白定位及表达水平的改变及与食管鳞癌进展、转移的关系。方法应用食管鳞癌组织芯片通过免疫组织化学染色研究MTA1蛋白在食管癌中的表达情况。结果MTA1蛋白在食管鳞癌组织中主要定位于胞核,在淋巴结转移灶中出现胞浆与胞核同时着色。正常组织与重度不典型增生、原位癌及癌组织之间差异有统计学意义,在食管鳞癌不同进展阶段的组织中MTA1表达逐渐升高,并且出现异位表达。结论MTA1与食管鳞癌的侵袭和转移高度相关,在食管鳞癌的发展过程中可能发挥着重要作用,可作为判断食管癌侵袭及转移能力的辅助因子。
- 钱海利李云峰于静宋崇文吕宁张雪燕梁萧付明林晨
- 关键词：食管鳞癌MTA1组织芯片
- 三氧化二砷对HPV感染阳性的宫颈癌的治疗研究
- 目的:用三氧化二砷治疗急性早幼粒白血病（APL） 疗效显著。研究表明三氧化二砷还可以诱导多种实体瘤细胞生长阻滞和凋亡。本实验室前期研究发现,三氧化二砷可以降低宫颈癌细胞中主要致病原因人乳头瘤病毒（HPV）E6／ E7的表...
- 于静钱海利张雪燕付明梁萧林晨
- 关键词：三氧化二砷宫颈癌肿瘤治疗
- 文献传递
- 人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系的建立及其特性被引量：8
- 2004年
- 背景与目的:临床前和临床研究显示吉西他滨对实体瘤有较好的疗效,尽管已有卵巢癌和红白血病吉西他滨耐药细胞系的报道,但肺癌吉西他滨耐药细胞系尚未见报道。我们建立了人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系,并对其细胞生物学特性进行研究。方法:逐步增加培养基中吉西他滨的浓度,建立了对吉西他滨耐药的人肺腺癌细胞系A549-Gem。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和集落形成实验,计算出A549和A549-Gem的半数抑制浓度(IC50)和耐药系数(RI)。比较A549和A549-Gem的生长曲线,并计算出两细胞系的倍增时间。采用MTT法检测A549-Gem对几种常用抗肿瘤药物的交叉耐药谱。结果:吉西他滨对A549和A549-Gem的IC50分别为(6.56±1.19)μmol/L和(921.09±225.27)μmol/L,RI为140.52(P=0.0195)。集落形成实验的RI为132.95。根据生长曲线计算出A549和A549-Gem的倍增时间为29.7h和36.4h。交叉耐药实验表明,A549-Gem对长春新碱(VCR)和足叶乙甙(VP-16)的RI分别为54.38和6.18(P<0.01),对阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)、阿糖胞苷(Ara-C)和紫杉醇(Taxol)无交叉耐药。结论:成功建立了人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系A549-Gem,耐药性能明显、稳定,非常适合用于肺癌中吉西他滨耐药的研究。A549-Gem对VCR、VP-16产生交叉耐药,对ADM、DDP。
- 董梅林晨冯奉仪张雪燕付明梁萧逯海燕查园园吴旻
- 关键词：吉西他滨肺腺癌耐药
- 人胰腺癌吉西他滨耐药细胞系的建立及耐药特性的检测被引量：4
- 2005年
- 目的为揭示吉西他滨在胰腺癌中引起耐药的机制,建立了人胰腺癌吉西他滨耐药细胞系并对其细胞生物学特性进行了研究。方法逐步增加培养基中吉西他滨的浓度,在人胰腺癌细胞系SW1990中建立了对吉西他滨耐药的细胞系SW1990-GEM。采用四氮唑蓝(MTT)法和集落形成实验,计算SW1990和SW1990-GEM的半数抑制浓度(IC50)和耐药系数(RI)。比较SW1990和SW1990-GEM的生长曲线并计算出两细胞系的倍增时间。采用MTT法检测SW1990-GEM对几种常用抗肿瘤药物的交叉耐药谱。结果SW1990和SW1990-GEM的IC50分别为(0.428±0.069)μmol/L和(230.53±13.12)μmol/L,RI为537.45(P<0.001)。根据生长曲线计算出SW1990和SW1990-GEM的倍增时间为22.8小时和35.8小时。交叉耐药实验表明,SW1990-GEM对5-FU、表柔比星、丝裂霉素、甲氨蝶呤、紫杉醇、泰素帝、长春新碱和依托泊苷产生交叉耐药,对顺铂、阿糖胞苷无交叉耐药。结论成功建立了人胰腺癌吉西他滨耐药细胞系SW1990-GEM,耐药性能明显、稳定。SW1990-GEM对5-FU、表柔比星、丝裂霉素、甲氨蝶呤、紫杉醇、泰素帝、长春新碱和依托泊苷产生交叉耐药,对顺铂、阿糖胞苷无交叉耐药。
- 要洁林晨冯奉仪张雪燕付明梁萧吴世凯董梅宋海峰钱海利杨莹
- 关键词：胰腺肿瘤药物耐受性
- 肿瘤细胞CAR表达水平与5型腺病毒转导效率的关系被引量：2
- 2006年
- 目的：通过体外、体内实验探讨肿瘤细胞柯萨奇腺病毒受体（coxsackie adenovirus receptor，CAR）表达水平与腺病毒转导效率的关系，为腺病毒相关的生物制剂在临床个体化应用提供实验依据。方法：将载有绿色荧光蛋白的Ad5型腺病毒（Ad．GFP）以100MOI、200MOI分别感染人食管癌细胞系KYSE510、KYSE150、EC9706、人宫颈癌细胞系HeLa、人卵巢癌细胞系SKOV3、人肝癌细胞系HepG2和人肺癌细胞系A549，感染后48h通过流式细胞术检测Ad—GFP对不同细胞系的转导效率。采用Western blotting方法检测这些细胞中CAR的表达水平。将HeLa、A549、SKOV3、EC9706细胞分别接种于裸鼠腋下，接种细胞数分别为3×10^6、3×10^6、3×10^6、2×10^6，建立裸鼠移植瘤模型。待肿瘤长径达5～7mm时，在裸鼠移植瘤内注射Ad—GFP，每次1×10^9PFU，间隔48h注射第2次。第2次注射后48h处死裸鼠，剖取瘤组织，荧光显微镜观察冰冻切片中GFP的表达情况以判定腺病毒在瘤体内的转导效率，同时用免疫组化法检测瘤组织内的CAR表达水平。结果：200MOIAd—GFP感染A549、HeLa、HepG2、KYSE150细胞48h后分别有92．67％、89．31％、84．98％、74．59％的细胞表达GFP；而SKOV3、KYSE510、EC9706细胞中腺病毒的转导效率明显降低，GFP阳性率分别为30．06％、27．40％、18．93％；各种细胞的CAR蛋白表达水平与腺病毒的转导效率呈正相关。注射Ad—GFP的裸鼠移植瘤组织中可见HeLa、A549瘤组织内有明显的点状绿色荧光，而SKOV3、EC9706瘤组织内表达GFP的细胞数明显少于前两种瘤组织；HeLa、A549裸鼠移植瘤组织内大多数瘤细胞高表达CAR（卅），SKOV3、EC9706移植瘤组织内CAR表达水平较低（＋或-），表明瘤体内CAR表达水平与Ad．GFP的转导效率也呈正相关。结论：体内外实验均显示肿瘤细胞的CAR表达水平与5型腺病毒转导效率密切相关。肿瘤患者治疗前检测�
- 王海娟李云峰钱海利张雪燕付明梁萧詹启敏林晨
- 关键词：肿瘤腺病毒基因治疗
- p53重组腺病毒联合顺铂或三氧化二砷对人膀胱癌EJ细胞的作用被引量：4
- 2002年
- 目的 探讨p53重组腺病毒 (Ad p53)与顺铂 (CDDP)或三氧化二砷 (As2 O3)联合应用提高膀胱癌疗效的可能性及其机制。方法 将Ad p53[1 0 0感染强度 (MOI) ]与CDDP(0 .5mg/L)或As2 O3(2 .0 μmol/L)联合应用 ,通过细胞生长抑制实验、克隆形成实验、细胞周期分析、免疫组织化学分析以及裸鼠皮下移植瘤模型 ,观察其对膀胱癌EJ细胞的作用及机制。结果 与单独应用相比 ,Ad p53与低剂量的CDDP或As2 O3联合可明显抑制EJ细胞体外生长 ,诱导EJ细胞凋亡 ,EJ细胞G2 /M期阻滞更明显 ;裸鼠体内肿瘤发生时间延迟 ,4周后肿瘤体积与单独应用时相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5)。结论 基因治疗与化疗联合应用 。
- 朱朝辉曾甫清林晨付明张雪艳梁萧吴旻
- 关键词：重组腺病毒顺铂三氧化二砷EJ细胞膀胱肿瘤
