熊朝丽
- 作品数：8 被引量：30H指数：2
- 供职机构：贵州大学动物科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科学技术基金贵州省优秀青年科技人才计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门菌诱导山羊免疫应答研究被引量：1
- 2013年
- 为探讨携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门菌诱导山羊免疫应答效果,将60只健康黑山羊随机分为3组,即重组细菌组、弱毒疫苗组和空白对照组,重组细菌组灌服重组减毒沙门菌,弱毒疫苗组股内侧皮内注射山羊痘弱毒疫苗,空白对照组不作任何处理;于不同时间段采集山羊血液、呼吸道/消化道分泌液及组织样本进行检测。结果:(1)在免疫后7、15、30和45d的山羊消化道特异性SIgA含量中,重组细菌组明显高于弱毒疫苗组(P<0.05),45d时到达最高值(18.172±0.122)μg·L-1;(2)在诱导产生特异性P32抗体上,重组细菌组略低于弱毒疫苗组,但差异不明显(P>0.05);(3)在特异性淋巴细胞转化效率上,免疫15d前重组细菌组略低于弱毒疫苗组,但免疫30d后重组细菌组高于弱毒疫苗组,但差异均不显著(P>0.05);(4)在诱导产生特异性细胞因子方面,重组细菌组山羊血清IL-2含量低于弱毒疫苗组,差异极显著(P<0.01),血清IL-5含量高于弱毒疫苗组,差异极显著(P<0.01),血清TNF-β高于弱毒疫苗组,差异显著(P<0.05),而血清IFN-γ和TNF-α含量与弱毒疫苗组差异不显著(P>0.05)。上述结果表明,构建的携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门菌能诱导山羊产生较好的免疫应答反应。
- 熊朝丽张华程振涛周碧君王开功文明
- 关键词：免疫应答山羊
- 贵州省羊口疮的调查研究被引量：21
- 2012年
- 对贵州省的5个养羊大县羊只发生的羊口疮进行了确诊。流行病学调查显示,任何年龄的黑马羊、沿河黑山羊、麻江黄羊和波尔山羊均可感染羊口疮,发病率为2.2%～17.7%。病死率为0～51.4%;发病部位可分为唇形、乳房型、外阴型和混合型,其中以唇形较为常见;患病皮肤在光学显微镜下可见细胞发生"气球样变";电子显微镜观察到卵圆形的线团样病毒粒子;PCR扩增出507bp的特异性条带。通过流行病学调查、临床症状、病理剖检变化可对该病作出初步诊断,经病理组织切片镜检、电镜负染和PCR方法确诊为羊口疮。
- 鲜思美胡廷帅熊朝丽向智龙陈秀华
- 关键词：羊口疮
- 免疫压力下猪繁殖与呼吸综合征病毒的变异被引量：1
- 2014年
- 为了解连续免疫压力下猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的变异规律,以及为猪繁殖与呼吸综合征病的防控提供科学依据,以贵州分离株PRRSV AS为研究对象,监测分析了PRRSV接种免疫猪群后其主要基因变异情况。结果表明：1）接种PRRSV后,免疫猪只未发生死亡现象,但出现轻微的临床表现和病理变化,且能在病变组织中分离到PRRSV,并扩增出与预期大小相一致的Nsp2和GP5基因条带;2）对Nsp2基因,两次分离物PRRSV AS-a、PRRSV AS-b与原始病毒PRRSV AS的遗传距离相应为0.018和0.064,呈加速渐远趋势;PRRSV AS-a发生16处点突变,其中9处为非同义突变,7处为同义突变;PRRSV AS-b发生25处点突变,其中非同义突变12处,同义突变13处;从PRRSV AS向PRRSV AS-a到PRRSV AS-b演变过程中,Nsp2基因编码蛋白第285-293位抗原指数发生不同程度改变,且演变趋势呈正向选择作用;3）对GP5基因,两次分离物PRRSV AS-a、PRRSV AS-b与原始病毒PRRSV AS的遗传距离相应为0.004和0.015,变异趋势不明显;PRRSV AS-a发生2处点突变,非同义突变和同义突变各1处;PRRSV AS-b发生3处点突变,其中非同义突变2处,同义突变1处;从PRRSV AS向PRRSV AS-a到PRRSV AS-b演变过程中,GP5基因编码蛋白重要抗原表位未发生改变,但其演变呈正向选择作用。说明,在连续免疫压力下PRRSV容易发生变异。
- 巴英史开志熊朝丽温贵兰程振涛文明
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 靶向PKCI基因RNAi对DEV增殖的影响被引量：2
- 2016年
- 为研究蛋白激酶C抑制蛋白(PKCI)在鸭肠炎病毒增殖的作用机制,根据Gen Bank PKCI基因序列,设计并构建p Silencer-PKCI-l^4,比较后选取抑制效率最高的p Silencer转染DEF细胞,采用荧光显微镜法和FQ-PCR法分析靶向PKCI基因RNA干扰下PKCI基因转录变化。结果显示:p Silencer-PKCI-1~4分别转染DEF细胞,其沉默效率分别为70.01%、66.45%、74.6%和76.02%;p Silencer-PKCI-4转染DEF细胞48 h,对DEV-NP基因转录的沉默效率最高,为64.97%;p Silencer-PKCI-4转染24 h后再感染DEV,在36 h时p Silencer-PKCI-4对DEV-NP基因转录的沉默效率最高,为54.25%;感染DEV 24 h后再转染p Silencer-PKCI-4,再处理72 h时p Silencer-PKCI-4对DEV-NP基因转录的沉默效率最高,为47.83%。本试验结果以期为鸭肠炎病毒核衣壳蛋白的致病机理研究奠定基础,为DEV的防控提供新思路。
- 罗乐熊朝丽郑敏吴良涛文明
- 关键词：鸭肠炎病毒RNA干扰
- 免疫压力下猪繁殖与呼吸综合症病毒变异分析
- 目的为了解连续免疫压力下PRRSV变异规律。方法以PRRSV AS株接种免疫猪后捕杀,取组织分离病毒,再接种免疫猪后捕杀分离病毒;采用PRRSV Nsp2和GP5基因特异性引物进行扩增,回收目的基因片段并克隆测序,应用生...
- 熊朝丽史开志程振涛周碧君王开功文明
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 鸭肠炎病毒核衣壳蛋白质互作蛋白质基因荧光定量PCR检测方法的建立被引量：7
- 2015年
- 为进一步阐明鸭肠炎病毒(DEV)的致病机理,本试验建立检测鸭肠炎病毒核衣壳蛋白质(NP)的互作蛋白质(PKCI)基因荧光定量PCR方法。针对PKCI基因设计特异性引物,经PCR扩增目的基因构建重组质粒p MD18-T-PKCI,将其作为阳性标准品构建荧光定量PCR标准曲线,并对建立的荧光定量PCR方法进行重复性、特异性和敏感性试验。结果显示:标准曲线的线性关系为Y=-3.31x+42.00,相关系数为-1.00,扩增效率为100%,熔解曲线仅出现单特异峰,对H5亚型、H7亚型和H9亚型禽流感病毒及新城疫病毒、鸭肝炎病毒均未检测到荧光信号。表明本试验建立的方法具有良好的稳定性、特异性和灵敏性。
- 赵碧熊朝丽徐茂文周碧君程振涛文明
- 关键词：鸭肠炎病毒荧光定量PCR
- 鸭源PKCI miRNA表达载体的构建及鉴定被引量：1
- 2014年
- 为给蛋白激酶C抑制蛋白（PKCI）在鸭肠炎病毒增殖的作用机制奠定基础,根据PKCI基因mRNA序列及miRNA设计原则,合成4对miRNA寡聚单链DNA,退火成双链dsDNA,用载体构建试剂盒进行重组质粒构建,插入miRNA表达载体（pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR）构建表达质粒,转化至感受态细胞DH5α,筛选并提取重组质粒进行测序分析。结果表明：在含壮观霉素的LB平板可生长出含目的基因的重组细菌菌落;测序表明成功构建了鸭源PKCI基因miRNA表达载体,重组质粒pSilencer-PKCI-1～pSilencer-PKCI-4的插入部分大小为71～134bp、68～131bp、68～130bp和68～131bp;重组质粒miRNA有鼠类miR-155骨架结构,即左侧为天然miR-155结构,右边为发卡结构的末端环区（internal loop）和配对区域内部的末端环区miRNA结构。
- 熊朝丽赵碧周碧君王开功程振涛文明
- 携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门氏菌诱导山羊免疫应答研究
- 目的：为探讨携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门氏菌诱导山羊免疫应答效果。方法：本研究将60只黑山羊随机分为3组即重组细菌组、弱毒疫苗组和空白对照组,重组细菌组灌服重组减毒沙门氏菌,弱毒疫苗组股内侧皮内注射山羊痘弱...
- 熊朝丽张华程振涛周碧君王开功文明
- 关键词：山羊痘病毒弱毒疫苗免疫应答
- 文献传递
