田琳 作品数:5 被引量:20 H指数:4 供职机构: 天津科技大学生物工程学院 更多>> 发文基金: 天津市自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
离子交换法解除丁酸梭状芽孢杆菌发酵液中丁酸抑制的研究 被引量:5 2007年 采用离子交换法吸附发酵液中的丁酸,从18种树脂中筛选出了1种对丁酸吸交性能较好的树脂A。树脂A对10g/L的丁酸溶液中丁酸的静态吸附量为243.3g/kg,对5g/L丁酸梭状芽孢杆菌发酵液中丁酸的静态吸附量则为142.2g/kg。动态吸附实验表明,树脂A吸附性能良好,洗脱峰高而窄,再生性能优良。5L发酵罐实验表明,发酵残液经陶瓷膜过滤,再经过离子交换树脂脱酸后,补充新鲜培养基打入发酵罐中进行循环使用,大大降低了原发酵液中丁酸对丁酸梭状芽孢杆菌生长的抑制,大幅度提高了菌体浓度,使之由补料分批高浓度培养时的6.1×10^8个/mL提高到1.2×10^9个/mL。 史文玉 路福平 李涛 田琳 李斌 杜连祥关键词:丁酸 树脂 植物甾醇侧链降解菌1,2脱氢酶基因敲除与应用 路福平 李玉 黎明 王海宽 王敏 包乐媛 田琳 黄巍 戚薇 杜连祥 张朝正 张莹 采用DNAMAN比较结核分枝杆菌Mycobacterium tuberculosis,牛分枝杆菌Mycobacterium bovis,鸟结核分枝杆菌Mycobacterium avium,耻垢分枝杆菌Mycobacte...关键词:关键词:分枝杆菌 基因敲除 微生物3-甾酮-△^1-脱氢酶的研究进展 被引量:4 2007年 3-甾酮-△1-脱氢酶(KSDH)属于黄素蛋白酶类,位于细胞膜上,能在3-甾酮化合物的C1和C2之间引入双键,提高原有底物的抗炎活性,在甾体药物的生产上发挥着重要作用。文章对已报道的不同微生物来源的KSDH进行比较分析,着重介绍了关于KSDH基因表达和敲除方面的研究,并对该酶在甾体转化方面的应用做一简要总结。 李玉 田琳 刘逸寒 路福平分枝杆菌甾酮C_(1,2)位脱氢酶基因敲除的研究 被引量:5 2007年 利用分枝杆菌对植物甾醇进行边链降解可产生4-AD(4-烯-雄甾-3,17-二酮)和ADD(1,4-二烯-雄甾-3,17-二酮),ADD由4-AD在C1,2位脱氢酶(ksdD)作用下脱氢产生,这两种物质在化学结构上高度相似,难以分离。首先扩增出部分ksdD基因,大小为631bp,并以此为基础构建打靶载体pUC19-MK。将pUC19-MK电转分枝杆菌感受态,通过同源重组敲除分枝杆菌染色体上正常的ksdD基因,使C1,2位脱氢酶失活,以达到4-AD大量积累的目的。结果通过初筛筛选出5株转化子,进行甾体转化实验,发酵144h时,1号转化子的4-AD生成率达到17.52%,比出发菌株提高了192%,而此时ADD的生成率仅为6.12%,比出发菌株降低了89.9%。 田琳 李玉 史文玉 戴永鑫 路福平 王建玲 杜连祥关键词:同源重组 打靶载体 耐酸性高温α-淀粉酶突变基因的异源表达及纯化 被引量:6 2007年 将去信号肽的耐酸性高温α-淀粉酶突变基因amyd克隆到大肠杆菌表达载体pET-30a上,实现重组质粒pET-amyd在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效表达。经硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-75凝胶层析,重组酶AMYD的比活达到354.6U·mg^-1、纯化倍数为83.83,获得凝胶电泳条带单一的蛋白样品,经SDS-PAGE检测,AMYD酶分子量为63.5kDa。重组酶AMYD的最适温度80℃、最适反应pH值为4.5,在温度低于90℃、反应pH值4.0~6.5的条件下,酶活较稳定。 刘逸寒 李玉 田琳 路福平 杜连祥关键词:纯化 酶学性质