章颉
- 作品数:4 被引量:5H指数:1
- 供职机构:浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金杭州市重大科技创新项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 中国番茄黄化曲叶病毒编码的RNA沉默抑制子AC4蛋白的核酸结合特性
- 2011年
- 农杆菌共浸润试验结果表明:中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)Y10分离物编码AC4蛋白是RNA沉默抑制子。为了研究RNA沉默抑制子AC4蛋白的作用机制,将TYLCCNV-Y10的AC4基因插入到原核表达载体pET-32a的多克隆位点上,构建重组原核表达载体pET32a-Y10AC4。将重组载体导入BL21(DE3)pLysS进行AC4蛋白表达,并在自然条件下纯化蛋白。利用原核表达的AC4蛋白进行电泳迁移率变动试验(electrophoretic mobilityshift assay,EMSA),分析AC4蛋白分别与单、双链siRNA和单、双链长RNA的结合情况。试验结果表明:TYLCCNV-Y10编码的AC4蛋白具有结合单链siRNA和单链长RNA特性,而不与双链siRNA和双链长RNA结合。
- 张馨月章颉邓凤林吴建祥
- 关键词:中国番茄黄化曲叶病毒原核表达
- 中国番茄黄化曲叶病毒编码的AV2为RNA沉默抑制子
- 本文指出中国番茄黄化曲叶病毒编码的AV2为RNA沉默抑制子,进而介绍了AV2的亚细胞定位方法,研究了AV2基因对致病性及抑制基因沉默的能力。
- 章颉吴建祥周雪平
- 关键词:番茄黄化曲叶病毒编码蛋白基因沉默
- 齿兰环斑病毒外壳蛋白的原核表达、抗体制备及检测应用被引量:5
- 2010年
- 齿兰环斑病毒(Odontoglossumringspot virus,ORSV)是感染兰花的主要病毒之一.用RT-PCR方法从感染ORSV兰花中克隆到该病毒的477 bp外壳蛋白基因(CP),外壳蛋白基因再亚克隆到原核表达载体pET-32a中构建重组原核表达载体pET-32a-CP;将重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,Ni2+-NTA亲和柱纯化获得分子量约为37 ku含硫氧还蛋白的融合蛋白.以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备ORSV外壳蛋白的多克隆抗体,并用制备的多抗建立了可靠、灵敏、特异的检测ORSV的免疫捕获RT-PCR及dot-blot ELISA方法,为该兰花病毒病的诊断、兰花抗病育种和脱毒苗的建立打下了基础.
- 章颉孟春梅荣松张超洪健吴建祥
- 关键词:齿兰环斑病毒原核表达多克隆抗体DOT-BLOT
- 中国番茄黄化曲叶病毒AV2基因功能研究
- 中国番茄黄化曲叶病毒Y10分离物(Tomatoyellow leaf curl China virus,TYLCCNVY10)为双生病毒科菜豆金色花叶病毒属成员,已发现其在番茄和烟草等作物上造成严重危害。TYLCCNV ...
- 章颉
- 关键词:番茄黄化曲叶病毒RNA沉默抑制子