缪成贵
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 新癌基因NGAL新型TPA反应激活蛋白的分离与初步鉴定
- 缪成贵
- 关键词：食管癌
- 新癌基因NGAL的新型TPA反应激活蛋白的分离与初步鉴定
- 分别应用寡核苷酸亲和层析法,改进后的寡核苷酸亲和层析法和离心管层析法从TPA诱导后的食管癌细胞EC109中分离调控NGAL诱导表达的TPA反应激活蛋白,通过EMSA、SDS-PAGE结合银染判定这三种方法的优缺点,并应用...
- 缪成贵
- 关键词：NGAL食管癌
- 文献传递
- NGAL基因新型TPA反应元件结合蛋白的研究被引量：2
- 2008年
- 以往研究发现, 食管癌细胞的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL)基因的过表达具有明显的 12-O- 十四烷酰佛波醇 -13- 醋酸酯(12-O-tetradecanoyl phorbol-13-acetate, TPA)诱导性, 在启动子- 152～- 60 区段存在着一种新型的 TPA 反应元件(TPA response element, TRE), 但是该元件的结合蛋白尚未被鉴定出来. 采用寡核苷酸 DNA 亲和层析法(oligonucleotide trapping)从食管癌细胞中分离纯化了 NGAL 基因 TRE 结合蛋白; 经 SDS-PAGE进一步分离, 银染显示目标蛋白带. 人工切取各目标蛋白带进行 MALDI-TOF-MS 分析, 通过 Mascot 软件搜索 NCBI 数据库, 根据蛋白质的功能、细胞定位和分子质量大小等指标确定 8 个核蛋白因子: C19、KIAA1949、TDRD1、RXR β、FAM54A、KLF15、KLF10 和 YY-1. 最后, 利用 RT-PCR 验证了这些核蛋白因子表达的 TPA 反应性, 结果表明 C19、KIAA1949、TDRD1、RXR β和 KLF15 等编码基因的转录表现出了明显的 TPA 反应性, 提示可能是食管癌细胞中应答 TPA刺激, 参与 NGAL 基因过表达的转录激活因子.
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- 关键词：NGAL基因MALDI-TOF-MS
