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一种干涉GDF9基因表达的 siRNA及其应用: 本发明公开了一种抑制水牛生长分化因子9（growthdifferentiationfactor9，GDF9）基因表达的siRNA，属于基因工程技术领域。本发明所述的siRNA正义链具有SEQ ID NO:1～3所示的任一...; 习欠云张永亮施振旦肖敏蕉莉石德顺刘庆友; 文献传递

精子与慢病毒共孵育条件的优化以及转基因猪的制备被引量：5: 2013年; 【目的】探索慢病毒与精子共孵育的方法,并制备转基因猪。【方法】采用正交试验分析精子密度、病毒量、精子与慢病毒共孵育时间、精子与慢病毒共孵育温度对精子活力的影响,采用PCR和Southern blotting检测转基因。【结果】①优化慢病毒与精子共孵育条件为:100μL慢病毒原液(5×105cfu)与1.0×107个/mL精子在17℃下孵育30 min;②与病毒孵育后的精子(109个/mL)给母猪人工授精时,经PCR检测49头仔猪中有14头呈阳性;③Southern blotting结果表明,8头PCR阳性仔猪中,4头融合了外源基因。【结论】优化了精子与慢病毒共孵育的条件(100μL慢病毒原液(5×105cfu)与1.0×107个/mL精子在17℃下孵育30 min),成功制备了转基因猪,并检测有外源基因的融合。; 蔡伟光习欠云肖敏关立增孟繁明束刚朱晓彤江青艳吴珍芳张永亮; 关键词：慢病毒转基因猪

一种抑制BMP15基因表达的siRNA 及其应用: 本发明公开了一种抑制水牛骨形态发生蛋白15（bonemorphogeneticprotein15，BMP15）基因表达的siRNA，属于基因工程技术领域。本发明所述的siRNA正义链具有SEQIDNO:1~3所示的任一序...; 习欠云张永亮施振旦肖敏焦莉石德顺刘庆友; 文献传递

利用造纸污泥厌氧消化后的二次纤维配抄瓦楞原纸的方法: 本发明公开了一种利用造纸污泥厌氧消化后的二次纤维配抄瓦楞原纸的方法，属于可再生材料与环境保护领域。该方法以将造纸污泥厌氧消化后得到的二次纤维与废纸浆、针叶木浆为原料，通过疏解、打浆处理，使其分丝帚化，然后脱水，将其混合，...; 林云琴尹德星陈志欢肖敏区嘉明梁铭辉

慢病毒与精子孵育法介导转基因猪的制备: ＜正＞精子介导基因转移是以精子作为外源基因的载体,在受精过程中将外源基因导入动物胚胎,从而使外源基因进入子代的基因组中,被认为是目前操作最简单的转基因动物生产技术,但该方法的重复性差、实验结果不稳定。慢病毒能够感染分裂细...; 蔡伟光丁景华习欠云肖敏江青艳吴珍芳张永亮; 文献传递

慢病毒介导的水牛BMP15及GDF9干涉质粒的筛选: ＜正＞RNAi能让特定的基因发生特异性沉默,抑制蛋白表达,现在被广泛用来做基因功能缺失的研究。慢病毒载体能在哺乳动物各类细胞稳定表达shRNA,能长期抑制基因的表达,目前被认为是研究活体RNAi的最佳载体。本研究针对水牛...; 肖敏习欠云施振旦杨林蔡伟光江青艳张永亮; 文献传递

GDF9下调转基因小鼠模型对繁殖与生长的影响被引量：5: 2015年; 本研究旨在对转GDF9shRNA基因小鼠进行扩群繁殖,统计分析转基因小鼠的产仔数及增重,检测GDF9shRNA、GDF9表达水平以及血清中FSH和GH的水平,以观察GDF9的下调对转基因小鼠繁殖性能及生长发育的影响。通过RT-PCR方法,分别检测了GDF9shRNA在体内的表达,以及下丘脑、垂体和卵巢中GDF9mRNA表达水平;同时用ELISA检测了血液中FSH和GH水平。结果表明,扩群后得到16只GDF9shRNA阳性小鼠,转基因GDF9shRNA在小鼠体内广泛表达,转基因小鼠的产仔数与野生型小鼠相比差异显著(P<0.05);转GDF9shRNA阳性公鼠的体重比阴性公鼠高,且在第7周差异显著(P<0.05),而母鼠间体重无显著差异;与阴性小鼠相比,转GDF9shRNA阳性小鼠GDF9基因的表达量在下丘脑、垂体中分别下降35.4%和39.8%,差异显著(P<0.05),在母鼠卵巢中表达水平差异不显著(P>0.05);阳性母鼠血液中FSH水平比阴性母鼠高55%,差异极显著(P<0.01)。结果表明,GDF9基因下调可以提高动物繁殖性能,为提高大型牲畜繁殖力提供了有利的素材和靶点参考。; 习欠云焦莉肖敏张永亮; 关键词：GDF9 RNA干涉繁殖转基因小鼠

利用造纸污泥厌氧消化后的二次纤维配抄瓦楞原纸的方法: 本发明公开了一种利用造纸污泥厌氧消化后的二次纤维配抄瓦楞原纸的方法，属于可再生材料与环境保护领域。该方法以将造纸污泥厌氧消化后得到的二次纤维与废纸浆、针叶木浆为原料，通过疏解、打浆处理，使其分丝帚化，然后脱水，将其混合，...; 林云琴尹德星陈志欢肖敏区嘉明梁铭辉; 文献传递

水牛BMP15和GDF9基因RNAi效应的筛选和转基因小鼠的制备: 骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein15，BMP15)和生长分化因子9(growth differentiation factor9，GDF9)主要在卵母细胞内表达，调节卵泡发育和生殖...; 肖敏; 关键词：RNAI技术慢病毒载体

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肖敏