蒋廷旺
- 作品数：88 被引量：71H指数：5
- 供职机构：常熟市第二人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术生物学文化科学更多>>
- CD4^＋T细胞活化诱导细胞凋亡在原发性胆汁性肝硬化小鼠模型中的作用研究被引量：3
- 2008年
- 目的研究CD4^＋T细胞活化诱导细胞凋亡（activation induced cell death，AICD）在poly I：C诱导的原发性胆汁性肝硬化（研marybiliarycirrhosis，PBC）小鼠模型中的作用。方法30只C57BL／6雌性小鼠随机分为模型组和对照组，模型组小鼠腹腔注射poly I：C5mg／kg，对照组小鼠注射等体积无菌PBS，16周后通过测定血清抗线粒体抗体（antimitochondrial antibody,AMA）、碱性磷酸酶（alkali phosphatase，ALP）及肝脏HE染色验证模型。磁珠分离小鼠脾脏CD4^＋T细胞，分别以ConA和anti—CD3体外诱导细胞凋亡；实时荧光定量PCR测定T细胞中凋亡相关基因Fas、FasL和TRAIL（tumor necrosis factor-related apoptosis—inducing ligand）的表达；Westernblot检测CD4^＋T细胞中抗凋亡基因Bcl-2的表达。结果poly I：C注射16周后模型组小鼠血清AMA均为阳性，同时肝组织汇管区出现不同程度的炎性细胞浸润，而对照组AMA均为阴性，肝组织未出现明显病变。模型组小鼠血清ALP[（110．4±18．3）U／L]显著高于对照组[（52．2±15．4）U／L]，P〈0．001；模型组小鼠脾CD4^＋T细胞AICD显著低于对照组（P〈0．001），同时定量PCR结果表明：FasLmRNA水平较对照组有所降低（P〈0．05），而两组Fas水平差异无统计学意义（P〉0．05），TRAIL水平则显著低于对照组（P〈0．001）；Westernblot结果表明模型鼠的抗凋亡蛋白Bcl-2的表达较对照组显著增高。结论TH1细胞的凋亡缺陷可能在PBC小鼠模型的发病机制中有重要作用，该缺陷可能是由于自身免疫机制引起凋亡相关分子Fas体系及TRAIL的表达变化引起，同时通过上调Bcl-2的表达抑制自身反应性T细胞的凋亡。
- 蒋廷旺邓安梅吴传勇陈波周晔钱琤谷明莉陈燕仲人前
- 关键词：聚肌胞苷酸凋亡
- 利用重组人源靶抗原二联体OP检测M2抗体及临床意义
- 2006年
- 目的 利用重组抗原检测自身免疫病患者血清中抗OP自身抗体并探讨其临床意义。方法 经Ni-NTA柱纯化表达重组OP融合蛋白作为抗原，分别用免疫印迹法（IBT）和酶链免疫吸附试验（ELISA）检测70份PBC患者血清，80份其它肝病患者血清，80份自身免疫病患者血清和100份正常人血清。结果 70份PBC患者血清中检测出阳性患者62例，阴性8例，阳性率为87．6％。其它肝病患者血清、自身免疫病患者血清和正常人血清均为阴性。重组抗原检测M2抗体有一定的敏感性。结论 利用重组抗原OP检测M2抗体，有较好的敏感性及特异性，有助于PBC的临床诊断。
- 陈燕姚定康周晔蒋廷旺吴传勇钱琤邓安梅仲人前
- 关键词：胆汁性肝硬化自身抗体免疫印迹
- 一种乳糖酸酰腙乳化剂的制备方法
- 本发明公开了一种乳糖酸酰腙乳化剂的制备方法，属于乳化剂材料领域。步骤如下：以甲醇作为溶剂，三氟乙酸作为催化剂，通过酯化反应得到粗品；将粗品溶解在甲醇中，加入水合肼将酯基还原成酰肼；与具有不同直链烷基的醛反应，通过缩合反应...
- 蒋廷旺席焱海
- 定量RT-PCR检测PBC患者外周血中颗粒溶素的基因表达水平被引量：3
- 2006年
- 目的建立检测人颗粒溶素(granulysin,GNLY)mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并测定PBC患者外周血单个核细胞(PBMC)中GNLY的基因表达水平,探讨GNLY基因表达水平与原发性胆汁性肝硬化(PBC,primarybiliary cirrhosis)发生发展的关系。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建质粒pET28a-GNLY,作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。用此方法测定了60例PBC、60例乙型肝炎肝硬化及60例健康对照者外周血中GNLY mRNA的含量。结果PBC患者GNLY mRNA的表达范围为5.35×107-4.61×109拷贝/μg RNA;健康对照者为9.28×105-7.32×107拷贝/μg RNA。PBC组GNLY mRNA的平均拷贝数显著高于健康对照组(P<0.01)和疾病对照乙型肝炎肝硬化组(P<0.001)。结论成功建立了人GNLY基因表达含量的荧光定量检测方法,PBC患者GNLY mRNA的含量显著高于健康对照组,GNLY表达与PBC的发生发展存在一定的关联性。
- 钱琤陈波陈孙孝周晔王燕谷明莉吴传勇蒋廷旺陈燕邓安梅仲人前
- 关键词：PBC逆转录-聚合酶链反应
- 原发性胆汁性肝硬化模型中淋巴细胞增殖及活化诱导凋亡机制研究被引量：1
- 2010年
- 目的通过检测原发性胆汁性肝硬化（PBC）动物模型肝脏和脾脏淋巴细胞增殖及活化诱导凋亡（AICD），了解PBC模型小鼠的免疫耐受情况。方法聚肌苷酸胞嘧啶核苷酸（polyI：C）5mg／kg剂量注射C57BL／6小鼠建立PBC模型，分离肝、脾淋巴细胞并纯化CD4^＋T淋巴细胞，然后以M2蛋白及刀豆蛋白A（ConA）结合抗-CD3刺激细胞增殖及AICD，定量PCR和免疫印迹技术检测凋亡相关基因及信号蛋白。结果①M2蛋白刺激后，空白对照组和PBS组的细胞增殖能力（分别为0．1988±0．0111和0．2068±0．0115）差异无统计学意义（P〉0．05），但是PBC组小鼠细胞增殖能力（0．358±0．022）与以上两组相比显著增强，且PBC组小鼠肝内淋巴细胞增殖能力强于脾淋巴细胞（P〈0．01）。②空白对照组和PBS组之间AICD情况差异无统计学意义（74．70％±4．58％比74．20％±4．44％，P〉0．05），但均显著高于PBC组（44．85％±6．47％，P〈0．01），同时PBC组小鼠肝内CD4^＋T细胞的凋亡率显著低于脾脏（P〈0．01）。③PBC组小鼠肝脾淋巴细胞FasL、TRAIL基因的表达较PBS组均明显降低（P〈0．01），而Fas表达无明显改变。④PBC组小鼠CD4^＋T细胞长构型Fas相关死亡区域样白细胞介素-1G转化酶抑制蛋白（FLIPL）表达明显升高，且肝内T细胞表达较脾脏显著增加（P〈0．01）。结论FLIPL表达增高可能是AICD受到抑制的重要原因，同时FasL和TRAIL mRNA表达降低可能也起到一定的作用。
- 蒋廷旺熊怀民盛建华龚燕萍沈艳红陆建文许国华邓安梅仲人前
- 关键词：原发性胆汁性肝硬化凋亡免疫耐受
- 颗粒溶素对免疫细胞具有趋化作用
- 目的:探讨颗粒溶素(GNLY)对免疫细胞的趋化作用。方法:抽取正常人全血20ml,并通过Ficoll-Hypaque(聚蔗糖-泛影葡胺)密度梯度离心法,分离出PBMC。经免疫磁珠法纯化单核细胞、CD4+T细胞、CD8+T...
- 陈燕钱铮陈波谷明莉吴传勇蒋廷旺周晔蒋天舒邓安梅仲人前
- 关键词：颗粒溶素趋化作用
- 文献传递
- Caspase在原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞的表达及其临床意义被引量：2
- 2009年
- 目的检测caspase8和caspase3在原发性胆汁性肝硬化(PBC,primary biliary cirrhosis)患者外周血单个核细胞中的表达,探讨其与PBC疾病进展的相关性。方法采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法,检测30例PBC和30例正常对照者的外周血单个核细胞(PBMCs)中caspase8和caspase3的基因和蛋白表达。结果PBC患者PBMCs中的caspase8和caspase3的mRNA和蛋白的表达明显低于健康对照组(P<0.05)。结论PBC患者caspase8,3的表达与疾病的发生发展存在一定的相关性,可以为PBC的诊断和预防提供新线索。
- 韩志君蒋廷旺朱萍唐裕杰胡志德孙懿周晔陈燕谷明莉邓安梅仲人前
- 关键词：原发性胆汁性肝硬化凋亡外周血单个核细胞
- CD39^+CD73^+B细胞亚群在原发性胆汁性胆管炎患者中的变化及其临床价值分析被引量：1
- 2020年
- 目的:分析原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者外周血CD39^+CD73^+B细胞亚群在B细胞中所占比例的变化,及其与PBC的临床指标间的关系。方法:收集江苏苏州吴江区和常熟地区PBC患者60例,健康人对照者40例,以流式细胞术分析所有研究对象外周血CD39^+CD73^+B细胞在B细胞中的比例,多重微珠流式荧光法定量分析PBC患者抗线粒体抗体M2(AMA-M2)水平,全自动生化分析仪检测肝功能各项指标。统计分析CD39^+CD73^+B细胞比例的组间差异及其与自身抗体和肝脏酶指标之间的关系。结果:PBC患者CD39^+CD73^+B细胞的比例较对照组显著降低[55.6%(44.9%,60.5%)vs 73.0%(69.8%,74.9%),P<0.001]。PBC组CD39^+CD73^+B细胞比例与AMA-M2呈明显的负相关关系(r=-0.349,P=0.027)。抗糖蛋白210抗体(anti-GP210)阳性患者CD39^+CD73^+B细胞比例较anti-GP210阴性患者明显降低[44.6%(38.2%,49.9%)vs 58.7%(49.8%,63.8%),P<0.001],抗核蛋体100抗体(anti-SP100)阳性和阴性患者间CD39^+CD73^+B细胞比例差异无统计学意义[58.6%(47.9%,62.7%)vs 51.6%(44.7%,60.4%),P=0.292]。结论:PBC患者外周血CD39^+CD73^+B细胞比例显著降低,且与特异性自身抗体存在显著相关性,提示该群B细胞在PBC发病过程中可能发挥重要作用。
- 杨鸿林蒋廷旺龚燕萍沈昊钱靖钮丽萍朱安渡钱雄杰
- 关键词：CD73流式细胞术
- 原发性胆汁性肝硬化动物模型的建立及其免疫耐受相关机制探讨
- 原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis, PBC)是一种好发于成年女性的自身免疫性肝病,病因不明且发病率逐年上升。PBC患者的免疫系统对部分线粒体及细胞核抗原的免疫耐受遭到破坏,致使大部分...
- 蒋廷旺
- 关键词：原发性胆汁性肝硬化抗线粒体抗体动物模型免疫耐受
- 文献传递
- 激发人体抗结核杆菌的保护性免疫反应的抗原表位及其用途
- 本发明涉及分子免疫学领域，近年来结核病在全球范围内又死灰复燃，由于耐药菌株的出现，抗生素治疗常常无效；常用的结核疫苗——卡介苗也具有局限性。本发明的目的是筛选出能激发人体抗结核杆菌的保护性免疫反应的抗原表位的分子模拟肽，...
- 邓安梅仲人前娄加陶吴传勇陈孙孝周晔陈燕陈波钱琤蒋廷旺
- 文献传递
