蒋超
- 作品数：40 被引量：109H指数：8
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学语言文字文化科学更多>>
- 荧光定量聚合酶链反应检测去颌下腺大鼠睾丸Bcl 2和Bax mRNA的改变被引量：2
- 2008年
- 目的观察切除颌下腺对大鼠睾丸Bax和Bcl 2 mRNA表达的影响。方法切除大鼠颌下腺,分别于术后14、28和42 d处死大鼠,提取睾丸总RNA,反转录,设计特异性引物和Taqman探针,荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测Bax和Bcl 2 mRNA的改变。结果随着颌下腺切除时间的延长,实验组大鼠睾丸Bax和Bcl 2 mRNA的比值显著升高,与对照组比较,有显著性差异(P<0.01)。结论颌下腺切除大鼠睾丸Bax和Bcl 2 mRNA比值明显升高,提示颌下腺切除所致的大鼠睾丸生精细胞的凋亡可能是由Bax和Bcl 2介导的线粒体途径进行,但Fas/FasL是否参与该凋亡过程还有待进一步研究。
- 王晨阳马百坤侯林徐会茹黄祝蒋超黄宇烽姚兵
- 关键词：荧光定量聚合酶链反应颌下腺睾丸BCL
- 环状RNA hsa_circ_0001543在制备视网膜变性疾病诊断试剂中的应用
- 本发明公开了环状RNA hsa_circ_0001543在制备视网膜变性疾病诊断试剂中的应用。一种检测hsa_circ_0001543(SEQ ID NO.4)表达量的试剂在制备诊断视网膜变性疾病的试剂盒中的应用。经研究...
- 陈雪刘庆淮蒋超孙汝许杨戴帝赵晨计江东
- 文献传递
- 男性抗FSH抗体与生殖相关激素的增龄性变化
- 2007年
- 目的检测抗FSH抗体在不同年龄段男性中的分布趋势,分析FSH、LH、T和FTI的增龄性变化,并探讨不同年龄男性体内抗FSH抗体的存在与这些激素水平间的关系。方法分别采用放射免疫法和本实验室建立的抗FSH抗体ELISA检测法评价192例不同年龄段男性血清FSH、LH、T和SHBG的水平及血清抗FSH抗体,并根据血清总T和SHBG水平计算游离睾酮指数(FTI)。结果60～89岁组的男性抗FSH抗体阳性率显著高于18～59岁组(P<0.05)。血清FSH和LH水平与年龄呈正相关(r=0.305,P<0.001;r=0.246,P=0.002)。血清T水平和FTI与年龄呈负相关(r=-0.461,P=0.000;r=-0.407,P=0.000)。男性体内抗FSH抗体的存在对血清LH、T、FTI和SHBG水平无明显影响,但60～89岁组男性抗FSH抗体阳性血清的FSH水平显著低于抗FSH抗体阴性血清的水平(P<0.05)。结论抗FSH抗体的存在与男性衰老可能存在一定关系,具体机制尚待进一步研究。
- 徐会茹王晨阳侯林蒋超黄祝王国洪姚兵
- 关键词：FSH
- 光照应激对SD大鼠胃GnRH表达的影响被引量：7
- 2008年
- 目的:观察光照应激状态下SD大鼠胃内促性腺素释放素(GnRH)的表达变化.方法:建立SD大鼠光照应激模型,24h持续光照,分别取光照1d,2d,3d,4d,1wk,2wk,3wk,4wk和相应对照组的胃组织,采用免疫组化和Real-timePCR法检测GnRH在各时间段大鼠胃组织中的定位和蛋白及mRNA表达变化.结果:GnRH阳性细胞广泛分布于大鼠胃壁上皮细胞,免疫反应阳性细胞在实验组和对照组中定位没有差异.实验组的GnRH平均灰度值高于其相应的对照组,光照2-4wk时,实验组与对照组相比差异均显著(2wk:105.7±7.9vs77.4±7.2,P<0.05;3wk:97.4±7.7vs77.6±6.6,P<0.05;4wk:93.2±2.1vs77.9±4.0,P<0.05).实验组大鼠胃的GnRHmRNA水平高于对照组,与对照组相比,持续光照2-4wk时,实验组大鼠胃的GnRHmRNA增加具有显著性差异(2wk:1.01±0.10vs0.80±0.01,P<0.05;3wk:0.95±0.07vs0.81±0.01,P<0.05;4wk:0.94±0.05vs0.82±0.01P<0.05).结论:光照应激可以影响消化道中GnRH的表达,GnRH以自分泌和旁分泌的机制对消化系统产生调节作用.提示GnRH除参与消化道正常生理功能外,可能还是一种参与应激反应的激素.
- 黄祝恽时锋卢坤刚韩雪峰张艳梅蒋超姚兵
- 关键词：光照应激免疫组化实时荧光定量PCR
- LncRNA LINC00167在制备诊断视网膜变性疾病的试剂盒中的应用
- 本发明公开了LncRNA LINC00167在制备诊断视网膜变性疾病的试剂盒中的应用。一种检测LINC00167表达量的试剂在制备诊断视网膜变性疾病的试剂盒中的应用；所述的LINC00167在NCBI数据库中的RNA编号...
- 陈雪刘庆淮孙汝许蒋超赵晨杨戴帝计江东
- 文献传递
- C反应蛋白对3T3-L1脂肪细胞总脂联素和高分子量多聚体脂联素的影响及其调控机制
- 刘媛馨刘翠萍蒋超王苏杨奇超蒋丹唐伟娄青林袁国跃
- 逆转录病毒感染法对RP患者人体细胞向iPS细胞和iPS—RPE细胞诱导分化的研究
- 2016年
- 背景视网膜色素上皮（RPE）细胞移植是目前人类尝试治疗视网膜色素变性（RP）的主要手段。诱导多能干细胞（iPSCs）将成为移植细胞的一个重要来源，人胚胎干细胞（hESCs）可以无限期地自我更新和分化，是RPE细胞移植的重要供体来源。此外，iPS-RPE细胞为患者自身细胞成为治疗源组织提供了个性化治疗平台。目的评估利用逆转录病毒将Oct4、Sox2、c—Myc和K归4种基因导入RP患者皮肤成纤维细胞后诱导入iPSCs的可行性，并建立将正常人iPSCs诱导分化为RPE细胞的方法。方法分别采集基因突变点为SNRNP200p．S1087L的RP患者及无SNRNP200p．S1087L突变受试者的大腿皮肤组织块约2cm-3cm。采用胰蛋白酶消化和组织块培养法分离纯化得到成纤维细胞并进行传代，取第3代细胞用于研究，分别采用形态学和免疫荧光技术对培养细胞进行鉴定。采用含OCT4、SOX2、C—MYC和KLF44种cDNA的质粒病毒转染的成纤维细胞，并用hESCs条件培养液诱导iPSCs，采用细胞形态学、碱性磷酸酶（AP）染色、干细胞表面多潜能标志物表达对所得到的iPSCs和iPS—RPE细胞进行鉴定，并通过细胞在SCID小鼠的体内种植考察iPSCs的成瘤性。采用诱导分化拟胚体（EB）法将不含SNRNP200p．S1087L突变的iPSCs诱导分化为RPE细胞，分别采用免疫荧光技术和实时荧光定量PCR法检测细胞中特异性蛋白的表达。结果用皮肤组织块培养的成纤维细胞呈梭形和多角形，光学显微镜下可见细胞间排列紧密，细胞形态和大小趋于一致，细胞中特异性蛋白Vimentin表达阳性。经逆病毒转染的成纤维细胞培养后第5～7天可见小的细胞聚集，细胞形态由梭形变为圆形；培养后20d出现类似hESCs集落形态的iPSCs克隆；培养后25～30d细胞中的标志物SSEA3、SSEA4、TRA—1-60、TRA-1-81及Nanog均呈阳性表达，培养后12周形成的iPSCs克隆中AP染色阳性，接种到
- 田媛媛蒋超陈雪丁思加徐敏赵晨
- 促性腺激素释放激素类似物对大鼠睾丸间质细胞膜联蛋白5和3β-羟类固醇脱氢酶mRNA表达的影响被引量：15
- 2008年
- 目的:观察促性腺激素释放激素(GnRH)类似物对大鼠睾丸间质细胞annexin 5和3β-HSD mRNA表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞48 h后,分别用不同终浓度的GnRH激动剂(GnRH-agonist,GnRHa)(10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L)和GnRH拮抗剂(GnRH-antagonists,GnRHant)(10-6mol/L、10-7mol/L、10-8mol/L)处理细胞,提取细胞总RNA,反转录,设计特异性引物和Tagman探针,荧光定量PCR检测膜联蛋白5(annexin 5)和3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)mRNA表达的改变。结果:荧光定量PCR结果显示,与未加GnRH类似物的对照组相比,当GnRHa的终浓度为10-5mol/L、10-6mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞annexin 5 mRNA分别升高了38.89%和35.29%,均具有统计学意义(P<0.05);当GnRHa的浓度为10-5mol/L时,3β-HSD mRNA也显著升高了46.43%(P<0.01)。同样,与对照组相比,当GnRHant的浓度为10-6mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞annexin 5 mRNA下降了45.45%(p<0.05),当GnRHant的浓度为10-6mol/L,10-7mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞3β-HSD mRNA也分别显著地降低了63.64%(P<0.01)和50%(P<0.05),其余各组与对照组相比,差异无统计学意义。结论:GnRH类似物能够调控大鼠睾丸间质细胞annexin5和3β-HSD mRNA表达,GnRH类似物可能与睾丸间质细胞上GnRH受体结合后,通过特定的生理机制,进而影响annexin5和3β-HSDmRNA表达,为揭示GnRH类似物调控间质细胞分泌睾酮的作用机制提供了一定的依据,其内在的机制还有待进一步研究。
- 戈一峰王大勇蒋超张艳梅韩雪峰卢坤刚崔英霞黄宇烽黄祝姚兵
- 关键词：GNRH类似物荧光定量PCR大鼠睾丸间质细胞
- 不同pH值精子营养液对男性精液各参数的影响以及机制的初步探讨被引量：3
- 2007年
- 目的研究不同 pH 值的精子营养液对男性精液各参数的影响。方法采用精子尾部低渗肿胀实验、毛细管穿透实验分别检测了15名健康供精者的精液在 pH 值分别为4.2、5.2、6.2、7.2(为实验对照组)、8.2、9.2、10.2、11.2下的精子的活动率、活力、肿胀率,毛细管爬高高度,同时使用比色法检测精液在不同 pH 值下精子的钠-钾交换 ATP 酶(Na^+/K^+-ATP 酶)的活性变化。结果精子在中性和偏碱的溶液中活力较强,在 pH 值为4.2、11.2时,由于溶液 pH 值过酸或过碱,精子活动被完全抑制。以 pH=7.2为对照组,除 pH 值为8.2组外,其余各组在精子尾部肿胀率、毛细管爬高高度水平上与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);pH 值为5.2、6.2、9.2、10.2各组在精子活动率、活力上与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。同时在 pH 值为5.2、9.2、10.2下的精子肿胀率与精子活动率有相关性(r 值分别为0.633、0.729、0.713,P<0.05),pH 值为5.2、8.2、9.2、10.2下的精子肿胀率与精子的活力也有相关性(r 值分别为0.546、0.532、O.826、0.723,P<0.05)。精子在低于或高于正常精液 pH 值条件下,Na^+/K^+-ATP 酶的活性均有不同程度地下降,精子营养液在 pH 值为4.2、9.2、10.2、11.2时,Na^+/K^+-ATP 酶的活性分别为(0.62±0.38)、(1.51±1.08)、(0.81±0.20)、(0.75±0.28)μmolPi/mgprot/hour,与对照组(pH=7.2)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在低于或高于正常精液 pH 值条件下,氢离子浓度可能引起精子 Na+~/K^+-ATP酶活性的下降,从而影响精子的活动率、活力、肿胀率和毛细管爬高高度,提示女性阴道 pH 环境改变也是引起不孕不育的原因之一。
- 蒋超黄祝徐会茹王晨阳侯林崔英霞黄宇烽姚兵
- 关键词：氢离子浓度精子
- 卷曲蛋白4基因新致病突变p.E160K引起家族性渗出性玻璃体视网膜病变被引量：2
- 2016年
- 目的 研究1个常染色体显性遗传家族性渗出性玻璃体视网膜病变（FEVR）家系的致病基因突变.方法 一个3代常染色体显性遗传FEVR家系中3例患者及1例患者的配偶纳入研究.先证者,男,5岁.其母亲和外公眼底均表现为典型的FEVR改变;父亲眼底检查正常.采集所有受试者外周静脉血,提取基因组DNA,扩增候选致病基因Norrie病、卷曲蛋白4（FZD4）、低密度脂蛋白受体相关蛋白5、四旋蛋白12、锌指蛋白408基因的全部编码区及外显子-内含子交界区剪切位点附近的序列,直接测序法检测潜在致病基因突变.应用分析软件明确该基因突变位点的保守性、有害性及可能引起的蛋白结构改变.结果 3例患者及先证者父亲共检测到5个单核苷酸变异,滤过最小等位基因频率值高于0.001的高频变异位点4个,可疑致病突变位点1个即FZD4基因c.478G＞A.该突变位点所对应的氨基酸改变为FZD4基因所编码蛋白的第160号氨基酸从谷氨酸突变为赖氨酸（p.E160K）.基因型和表型共分离验证结果表明,FZD4 p.E160K为该家系的致病突变位点.蛋白序列同源性分析结果显示,该突变位点在多个物种中均高度保守;功能性分析结果显示,该突变为有害性突变;晶体结构分析结果显示,该突变能够引起第160号氨基酸位点与第152号天冬酰胺间的氢键消失,影响蛋白的三级结构和正常功能.结论 发现并证实了该家系FZD4 p.E160K为FEVR的新突变位点.
- 徐敏田媛媛陈雪黄健成丁思加蒋超赵晨
- 关键词：基因突变
