贾继辉
- 作品数：130 被引量：414H指数：10
- 供职机构：山东大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 食管癌幽门螺杆菌L型感染与其血管形成的关系被引量：30
- 2003年
- 目的探讨食管癌Hp-L型(即球形:Hp)感染与肿瘤血管形成的相关性及Hp-L型对食管癌生长、侵袭和转移等生物学行为的影响。方法应用革兰染色、电镜和免疫组化ABC法,检测98例食管癌和30例对照组(食管癌切缘正常组织)的Hp-L型;用免疫组化SP法检测上述组织的微血管密度(MVD)值和血管内皮生长因子(VEGF)、p53表达,分析Hp-L型与MVD、VEGF、p53表达以及临床病理因素的关系。结果 食管癌组的Hp-L型阳性率为60.2％。电镜下组织中的Hp-L型有两种类型,可位于癌细胞间或癌细胞胞浆。食管癌组的Hp-L型阳性率、MVD值以及VEGF、p53表达阳性率均高于对照组(P<0.005～0.001),食管癌组中Hp-L型阳性组的MVD值、VEGF和p53表达阳性率也高于其Hp-L型阴性组(P<0.005～0.001)。Hp-L型阳性与MVD呈正相关(r=0.46,P<0.01),与VEGF、p53表达呈正相关(r=0.31,P<0.01)。食管癌组的Hp-L型阳性数与癌细胞的血管侵袭、侵袭深度、食管旁淋巴结转移及远处淋巴结转移相关,而与肿瘤大小无关。结论 Hp-L型与食管癌的血管形成密切相关,是影响食管癌生长、侵袭和转移的重要因素之一。
- 于东红承泽农贾继辉唐素兰吴炎王启之田怡王萍
- 关键词：食管癌幽门螺杆菌L型感染血管形成免疫组化染色法微血管密度
- HPV58 E6体外降解p53蛋白作用的研究
- 2002年
- 通过PCR方法从人乳头瘤病毒 5 8型 (HPV5 8)全基因克隆中扩增出HPV5 8E6基因片段 ,克隆至真核表达质粒pcDNA3的T7启动子下游 ,并在体外转录成mRNA后 ,在源自网织红细胞的翻译缓冲液中成功表达了含有生物素标记的HPV5 8E6蛋白 ,并在体外成功发现HPV5 8E6能够降解p5 3蛋白 ,从而推断结合并降解p5 3蛋白是其致癌作用的关键环节 。
- 杨海宁于修平卞继峰JasonJChen赵蔚明贾继辉周亚滨刘颖栾怡齐眉
- 关键词：体外降解P53蛋白乳头状瘤病毒抑癌蛋白
- 人源化BPVL1-GFP融合基因的构建以及在哺乳动物细胞中的瞬时表达被引量：2
- 2003年
- 目的:构建牛乳头瘤病毒晚期基因L1-GFP融合基因真核表达质粒,自细胞水平探讨优化密码对晚期基因L1蛋白瞬时表达的影响。方法:用PCR方法扩增获得优化密码人源化BPVL1(hL1)基因。TA克隆后,酶切释放hL1基因,定向插入质粒pET30a/NM-GFP的BamHI、SacII位点,获得正确框架的hL1-GFP融合基因。再用BamHI、NotI酶切释放hL1-GFP融合基因,与pcDNA3载体定向重组构建真核表达质粒pcDNA3/hL1-GFP。同法克隆获得含野生型BPVL1-GFP融合基因的表达质粒pcDNA3/wL1-GFP。用质粒DNA分别在体外转染哺乳动物细胞COS-1细胞和Wish细胞,荧光显微镜下观察L1-GFP融合蛋白的瞬时表达情况。结果:酶切鉴定表明成功构建了含wL1-GFP、hLI-GFP的真核表达载体,与pcDNA3/wL1-GFP相比,pcDNA3/kL1-GFP在COS-1细胞、WISH细胞中获得有效表达。结论:优化密码能提高乳头瘤病毒L1基因在哺乳动物细胞内的蛋白表达。
- 王红赵蔚明周亚滨贾继辉孙建芝于修平
- 关键词：乳头状瘤病毒基因L1密码子
- 光电化学竞争法检测生物素被引量：2
- 2013年
- 建立了光电化学系统竞争性检测生物素(Biotin)小分子浓度的方法。采用联吡啶钌[Tris(2,2'-bipyridine)ruthenium,Ru-bpy)]作为标记物,以氧化锡纳米颗粒为电极,草酸盐为电子供体还原标记物。在470 nm光激发下,联吡啶钌的外层电子吸收能量后由基态变为激发态,注入半导体氧化锡纳米颗粒电极的导带,形成光电流信号;草酸盐还原失去电子的联吡啶钌使其恢复初始状态,从而可以再次作为电子供体受激发产生光电流信号。在竞争性检测生物素(Biotin)浓度时,亲和素(Avidin)吸附到氧化锡纳米颗粒电极表面作为识别元件,在浓度大于0.5 g/L时能够达到最大的电极表面覆盖率。1μmol/L Ru-bpy-biotin与不同浓度Biotin组成的混合溶液与电极表面的Avidin发生亲和反应,光激发后检测光电流大小;当溶液中Biotin的浓度增加时,致使与电极表面Avidin结合的Ru-bpy-biotin量减少,在光照射下光电流信号降低。这一竞争性光电检测方法检测Biotin时,检出限为8μg/L。本方法可进一步扩展,应用于有机化合物的竞争性免疫检测。
- 刘世利陈守臻赵倩徐政虎李玉贾继辉郭良宏
- 关键词：生物素
- 幽门螺杆菌CagA诱导的组蛋白去甲基化酶RBP2的表达参与了胃粘膜上皮细胞的恶性转化
- <正>幽门螺杆菌可以诱导胃粘膜上皮细胞的恶性转化从而促进了肿瘤的发生,但是其中的具体作用机制目前还有待于进一步探讨。我们通过研究发现组蛋白去甲基化酶RBP2可以被幽门螺旋菌CagA诱导表达。这种诱导方式是通过PI3K/A...
- 梁修明曾季平于晗孙允东李汶娟周亚滨贾继辉
- 文献传递
- 窄范围pH梯度干胶条可提高胃癌细胞蛋白质组表达谱分辨率被引量：1
- 2006年
- 目的 探讨不同pH梯度干胶条在提高胃癌细胞蛋白质表达谱分辨率中的作用,为深入研究胃癌的蛋白质组学奠定基础.方法 提取胃低分化腺癌细胞MGC-803的蛋白质,分别采用pH 3～10和pH4～7不同pH梯度干胶条建立胃低分化腺癌细胞MGC-803蛋白质双向凝胶电泳图谱,与相对应pH区域的蛋白质斑点进行比较.结果 成功地构建出两种不同pH梯度MGC-803细胞的双向凝胶电泳图谱,经比较两种图谱蛋白质斑点结果显示,运用窄范围pH 4～7干胶条可更有效分辨出pH 3～10部分区域内聚积的蛋白质斑点.结论 采用窄范围pH的干胶条可提高双向电泳图谱分辨率,优化了胃癌细胞蛋白质组学研究的技术体系,可有效获取待测靶蛋白.
- 郭强张茂修李玉瑭贾继辉
- 关键词：细胞蛋白质GASTRICADENOCARCINOMA腺癌细胞靶蛋白
- 表达HPV6b L1-E7嵌合蛋白的减毒沙门菌诱导小鼠免疫应答
- 2003年
- 目的 探讨表达人乳头状瘤病毒 6b型 (HPV6b)L1 E7嵌合蛋白的减毒沙门菌诱导小鼠粘膜及系统免疫反应的可行性。方法 对重组减毒沙门菌S .BRD5 0 9 pTETnir15 6bL1E7体外厌氧诱导其表达 ,Westernblot方法鉴定表达的L1 E7蛋白。此重组沙门菌经滴鼻和口服联合粘膜免疫BALB c小鼠 ,采用ELISA方法及足垫肿胀试验分别检测免疫小鼠血清及阴道冲洗液中特异性抗体和DTH反应。结果 Westernblot分析显示 ,重组沙门菌在预计相对分子质量 (Mr) 5 6× 10 3 处有特异染色带 ,提示此重组沙门菌能表达特异的HPV6bL1 E7蛋白。ELISA检测结果表明实验组小鼠阴道冲洗液中HPV6bL1特异性sIgA显著升高 ,和对照组比较两者差异有显著性 (P <0 .0 1) ,但小鼠血清中HPV6bL1IgG抗体无明显变化 ,实验组和对照组两者差异无显著性。DTH结果显示 :与对照组比较 ,实验组小鼠接受HPV6bL1 E7抗原刺激后产生明显阳性反应 ,提示重组沙门菌免疫小鼠产生了针对HPV6bL1 E7抗原的特异性细胞免疫反应。结论 构建的重组减毒沙门菌S .BRD5 0 9 pTETnir15 6bL1E7可激发有效的粘膜免疫及细胞免疫反应 ,为进一步研制新型HPV粘膜疫苗奠定了实验基础。
- 孙新六赵蔚明卞继峰于修平贾继辉周亚滨栾怡齐眉王红
- 关键词：HPV6B嵌合蛋白减毒沙门菌小鼠免疫应答尖锐湿疣
- 食管癌与幽门螺杆菌L型感染和PCNA、CerbB-2、P53表达关系的研究被引量：1
- 2001年
- 目的探讨幽门螺杆菌L型(Hp-L)感染和增殖细胞核抗原(PCNA)、CerbB-2、P53表达在食管癌发生机制中的作用.方法应用革兰染色和免疫组化技术检测112例食管癌和30例对照组做Hp-L型、PCNA和CerbB-2、P3基因蛋白,对Hp-L型阳性和阴性组织的PCNV、CerbB-2和P53表达进行比较分析.结果癌组的革兰染色L型检出率(67.9%)与对照组(26.7%)差异有显著性(P＜0.05);与免疫组化Hp-L型抗原阳性表达率(65.2%)差异无显著性(P＞0.05),Hp-L型检出阳性率为61.6%(69/112).癌组的PCNA、CerbB-2、P53表达阳性率也高于其Hp-L型阴性组,其差异均有显著性(P＜0 05).表明Hp-L型感染与食管癌相关,与食管癌的PCNA、CerbB-2、P53表达也相关.结论Hp-L型可能通过促进细胞增殖加速和引起基因突变而导致食管癌的发生.
- 于东红贾继辉王萍姚敏
- 关键词：幽门螺杆菌增殖细胞核抗原癌基因
- HPV58 E6基因的克隆及体外表达被引量：2
- 2001年
- 目的 :克隆并体外表达HPV5 8E6,为E6致癌作用和疫苗的研究奠定基础。方法 :通过PCR方法从HPV5 8全基因克隆中扩增出HPV5 8E6基因片段 ,利用基因重组技术 ,将其克隆至真核表达质粒pcDNA3的T7启动子下游 ,体外转录成mRNA后 ,在源自网织红细胞的翻译缓冲液中表达生物素标记的HPV5 8E6蛋白 ,化学发光法检测 ,X光胶片曝光显影鉴定。结果 :酶切电泳证实质粒构建正确 ,SDS PAGE电泳显示在相当于HPV5 8E6分子量约 18.8kD的位置出现条带 ,X光胶片亦在相应位置出现印迹条带。结论 :成功表达了含有生物素标记的HPV5 8E6蛋白 。
- 杨海宁于修平卞继峰赵蔚明董杰德贾继辉周亚滨刘颖栾怡齐眉
- 关键词：乳头状瘤病毒分子克隆基因表达基因克隆
- 急性白血病患者血清微量元素谱分析被引量：4
- 1997年
- 采用ＤＣＰ－ＡＥＳ检测了４０例急性白血病（初发１８例，化疗后２２例）血清中锌、铜、铁、硒、镍、钛等１５种元素含量。结果显示：初发急性白血病患者血清锌、铁、硒、镍、钛均降低，铜、钙、镁、铜／锌比值均升高。化疗达ＣＲ后，血清锌、铜、铜／锌、硒均可正常，而化疗后ＮＲ组上述元素无改变。血清钙、镍、钛化疗后ＣＲ和ＮＲ组均无改善。表明微量元素与急性白血病转归相关。
- 陈春燕孟月生高海青钟浩芦鑫贾继辉
- 关键词：急性白血病微量元素血清
