郭建新
- 作品数：9 被引量：32H指数：2
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- 重组Mash1慢病毒表达载体的构建
- 2006年
- 目的:克隆小鼠Mash1基因的全长cDNA,构建其慢病毒表达载体Lentivirus-Mash1,为进一步研究Mash1在神经发育及干细胞神经分化中的作用奠定基础。方法:应用RT-PCR从小鼠13d胚胎中扩增出Mash1cDNA片段,经回收纯化与pGEM-T载体连接并转化感受态细菌J M109,通过蓝白筛选、PCR扩增和双酶切鉴定出阳性菌落,并对其进行基因测序。BamHⅠ和XholⅠ双酶切pGEM-T-Mash1和Lentivirus获得的目的基因双粘片段与Lentivirus双粘线性质粒相连接,转化J M109,酶切方法鉴定重组阳性菌落。结果:PCR扩增、酶切分析及序列测定证实成功获取Mash1cDNA克隆;酶切鉴定证实Lentivirus-Mash1含有大小正确的正向Mash1cDNA片段。结论:成功建立了小鼠Mash1cDNA克隆并构建了慢病毒表达载体Lentivirus-Mash1。
- 张瑞许予明赵国强郭建新宋波张世杰韩志强
- 关键词：慢病毒表达载体RT-PCR基因
- 小鼠SRY同源盒基因SOX1的克隆及其真核表达载体pEGFP-C_3-SOX1的构建
- 2006年
- 目的:克隆小鼠SRY同源盒基因SOX1的全长cDNA,构建其携带增强型荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-C3-SOX1,为进一步研究SOX1在间充质干细胞神经分化中的作用奠定基础。方法:采用RT-PCR方法从小鼠早期胚胎中扩增带有EcoRⅠ和HindⅢ双酶切位点的SOX1 cDNA片断,与pGEM-T载体连接后转化感受态细菌JM109,然后通过蓝白筛选、酶切技术筛选、鉴定出阳性菌落并进行DNA测序。用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切获得目的片断,再与EcoRⅠ和HindⅢ双酶切过的pEGFP-C3质粒相连接,重组子转化JM109感受态大肠杆菌,酶切方法鉴定阳性菌落。结果:多酶切及DNA测序结果表明提取及纯化的pEGFP-C3-SOX1质粒含有SOX1 cDNA碱基片段,方向及大小正确。结论:从小鼠胚胎中可成功克隆SOX1全长cDNA,并构建其真核表达载体pEGFP-C3-SOX1。
- 郭建新许予明赵国强张瑞宋波张世杰张世峰李京红
- 关键词：真核表达载体
- 小鼠SOX1基因克隆及其真核表达载体pEGFP-C3-SOX1的构建
- 目的:克隆小鼠SRY同源盒基冈SOXl的全长cDNA,构建其携带增强型荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-C3-SOXl,为进一步研究SOXl在间充质干细胞神经分化中的作用奠定基础。方法:采用RT-PCR的方法从小鼠早期胚...
- 郭建新许予明张瑞宋波张世峰李京红张世杰赵国强
- 通心络对脑梗死大鼠的神经保护作用被引量：9
- 2009年
- 目的观察通心络对大鼠局灶性脑缺血损伤的改善作用。方法建立MCAO大鼠模型,通心络灌胃后,TTC染色检测脑梗死体积,ZeaLonga评分检测神经功能的损伤情况。结果与脑缺血组相比,通心络组大鼠脑梗死体积显著缩小(P<0.01),ZeaLonga评分明显降低(P<0.01)。结论通心络可减小脑梗死体积,对脑梗死大鼠具有明显的神经保护作用。
- 吕昀李学玲李文战郭建新
- 关键词：通心络脑缺血脑梗死体积神经功能
- 帕罗西汀联合心理干预治疗多发性硬化伴发抑郁疗效观察
- 2009年
- 目的:观察帕罗西汀联合心理干预治疗多发性硬化伴抑郁的疗效。方法:42例多发性硬化伴抑郁患者随机分为联合治疗组22例,帕罗西汀治疗组20例;于治疗前、治疗后6周进行汉密顿抑郁量表(HAMD)及日常生活活动能力(ADL)量表测定。结果:与治疗前相比,两组在治疗后HAMD、ADL评分均有显著差异(P<0.01);治疗后两组间各项评分亦有显著性差异(P<0.05)。结论:帕罗西汀联合心理干预能明显减轻多发性硬化所致的抑郁状态,疗效优于单用抗抑郁药物帕罗西汀。
- 郭建新吕韵孙建奎
- 神经生长因子对实验性脑梗死大鼠神经细胞凋亡的影响被引量：19
- 2009年
- 目的本研究拟观察神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对脑梗死大鼠脑部Caspase-3的表达及神经元凋亡的影响。方法建立MCAO大鼠模型,腹腔注射NGF,免疫组织化学法检测脑部Caspase-3的表达;TUNEL染色检测神经元的凋亡。结果脑梗死后,Caspase-3的表达明显增高,神经元的凋亡亦比较明显。腹腔注射NCF能显著降低Caspase-3的表达与抑制神经元的凋亡。结论NGF可以抑制神经细胞的凋亡,对脑梗死大鼠具有明显的神经保护作用。
- 吕昀郭建新李文战李学玲
- 关键词：脑梗死神经生长因子CASPASE-3TUNEL
- 成人骨髓间充质干细胞的体外培养和定向神经分化被引量：2
- 2009年
- 目的探讨成人骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外培养和定向神经诱导分化的条件。方法从正常成人志愿者髂骨中分离获取MSCs,体外培养扩增纯化后传代于塑料培养皿中,以含有脑源性生长因子(BDNF)联合维A酸(RA)的培养液对传至3～5代的细胞进行体外诱导分化,采用免疫细胞化学法对诱导后的细胞鉴定。结果诱导1h有部分细胞表达神经干细胞标志巢蛋白nestin,6h后大部分细胞具有典型神经元形态。表达神经元特异性烯醇化酶(NSE)阳性细胞占细胞总数的(46.45±2.54)%。结论MSCs可通过体外培养并纯化,应用BDNF联合RA可以在体外诱导MSCs成为神经元样细胞。
- 郭建新孟凡超
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞培养神经分化
- β-BME与BDNF联合RA体外诱导成人MSCs分化为神经元样细胞对比观察被引量：2
- 2009年
- 目的寻找体外诱导人骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元样细胞的良好方法。方法分别采用β-巯基乙醇(BME)、脑源性神经营养因子(BDNF)和维A酸(RA)为诱导剂,体外诱导人MSCs分化为神经元样细胞。用免疫组化SP法对诱导后细胞进行鉴定。结果两种方法诱导6 h后,MSCs均呈现神经元样细胞改变,伸出突起,类似树突和轴突。该细胞神经元特异性烯醇化酶(NSE)均呈阳性表达,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)均呈阴性表达。其中β-BME诱导6 h后神经元样细胞分化率为68.32%±2.58%,BDNF+RA诱导6 h后神经元样细胞分化率仅为42.45%±3.26%,两组比较,P<0.05。但β-BME诱导后分化细胞存活时间较短,而BDNF+RA诱导后分化细胞存活时间较长。结论两种诱导方法均可在体外定向诱导人MSCs转化为神经元样细胞,神经元分化率及存活时间不同。
- 郭建新许予明宋波
- 关键词：神经元脑源性神经营养因子维A酸
- 真核表达载体pEGFP-C_3-MASH-1的构建
- 2006年
- 目的构建含小鼠MASH1基因的绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-MASH1,为进一步研究MASH1在间充质干细胞神经分化中的作用打下基础。方法应用RT-PCR方法从小鼠13.5d胚胎组织中扩增出两端带有H indIII和EcoR I酶切位点的MASH1 cDNA编码片段,经回收、纯化、酶切后,依次连接到质粒pGEM-T和pEGFP-C3上。结果酶切及测序结果表明:重组质粒PEGFP-C3含有MASH-I片段,方向及大小正确。结论成功构建了小鼠真核表达载体PEGFP-C3-MASH-I。
- 赵杰张瑞许予明赵国强郭建新宋波韩志强
- 关键词：绿色荧光蛋白真核表达载体
