陈双
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：新疆医科大学更多>>
- 发文基金：中国科学院“百人计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人细菌透性增加蛋白cDNA的克隆及序列分析
- 2007年
- 从新疆维吾尔族健康人造血干细胞中提取总RNA,用反转录(reverse transcription,RT)和降落PCR (touchdown PCR,TD-PCR)相结合的方法扩增人细菌透性增加蛋白(human bactericidal/permeability-increasing protein,hBPI)的cDNA,将其克隆到pEGFP-N1载体上并进行DNA序列测定。结果表明,所克隆的hBPIcDNA全长为1,464个碱基,其序列与GenBank中另外4个序列进行了比对,有两个碱基与其它4个序列不同:其中第576位碱基其它序列为G,该位置碱基是C;第676位碱基其它序列为A,该位置碱基是G。其中第676位碱基的变化导致第185位氨基酸由Lys改变为Glu。
- 马海蓉雷卫祺孙怡赵民安丁凌陆陈双曹旭汪汉卿
- 关键词：CDNA基因克隆DNA序列分析
- hBPI与EGFP融合蛋白真核表达载体的构建及其在MCF-7细胞中的表达和定位被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨人细菌透性增加蛋白(hBPI)在哺乳细胞中的表达和亚细胞定位。方法:以本人克隆得到的质粒pBE1为模板,利用一对带有Kozak序列以及删除终止密码子的引物进行PCR,获得的产物与pEGFP-N1载体连接,构建pBE2哺乳细胞特异表达载体并稳定转染MCF-7细胞,获得了转基因细胞系。提取其基因组DNA,PCR扩增检查BPIcDNA片段和EGFP片段是否已整合入MCF-7细胞基因组中。提取总RNA,通过RT-PCR方法检查BPI-EGFP在转录水平的表达。Western blot进一步鉴定融合蛋白的表达定位。结果:荧光显微镜观察显示,BPI-EGFP融合蛋白分布在整个细胞质中,并且在核膜周围有高表达。PCR扩增证实了BPIcDNA片段和EGFP片段已整合入MCF-7细胞基因组中。RT-PCR证明了hBPI和EGFP的融合蛋白在MCF-7细胞中在转录水平的表达。Western blot分析显示hBPI-EGFP以定位于细胞质和分泌到MCF-7细胞外两种形式表达。结论:hBPI-EGFP融合蛋白与天然的嗜中性的多核粒细胞中的定位和转运特点是一致的。
- 马海蓉孙怡雷卫祺陈双马艳赵民安曹旭
- 关键词：融合蛋白MCF-7细胞
- 骨髓增生异常综合征患者中Gli1的表达水平及其临床意义被引量：2
- 2019年
- 目的:探讨Shh信号通路关键因子Gli1在骨髓增生异常综合征(MDS)患者中的表达水平及其临床意义。方法:对53例MDS患者采用流式细胞术检测骨髓CD34^+阳性率,磁珠分选CD34^+细胞,再用荧光实时定量PCR法检测CD34^+上Gli1基因的表达,以25例缺铁性贫血患者作对照,分析Gli1表达与MDS患者临床特征和预后的关系及其意义。结果:MDS患者中Gli1表达水平(0. 73±1. 26)明显高于对照组(0. 07±0. 46)(P <0. 05);Gli1表达水平与血小板计数、染色体分组和IPSS危险度分层均相关(P <0. 05);Gli1高表达和低表达组患者中位生存时间分别为7个月和20个月(P <0. 05)。多因素分析显示,Gli1和染色体分组是2个独立的不良因素(均P <0. 05)。结论:Gli1在MDS中高表达,并与患者的临床特征及预后存在显著相关性,Gli1可能参与MDS的发生及发展。
- 银臻秦玉婷邓春阳尼罗帕尔·吐尔逊陈双王欢哈力达·亚森江明郝建萍
- 关键词：骨髓增生异常综合征预后
