陈春芳
- 作品数:10 被引量:18H指数:2
- 供职机构:南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目圳市宝安区科技局立项项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 角质细胞生长因子对高氧暴露下新生大鼠SP-A表达的影响
- 2010年
- 目的研究角质细胞生长因子(KGF)对高氧暴露下新生大鼠肺组织SP-A表达的影响。方法将生后3d的54只SD大鼠随机分为三组。A组:空气组,B组:高氧组,C组:KGF干预组。B、C组大鼠持续暴露于95%氧气中,C组于吸氧同时于背部皮下注射htKGF1mg/kg/d,连用3d后改为0.5mg/kg/d直至实验结束。A组和B组给予等量生理盐水。A组大鼠呼吸空气。于高氧暴露后3d、7d、14d取肺组织,采用免疫组化方法观察肺组织中SP-A表达的变化。结果B组高氧暴露3d时SP-A表达强度较A组增强(P<0.05);高氧暴露7d时SP-A表达强度与A组相比较,差异无统计学意义(P>0.05),高氧暴露14d时SP-A表达强度较A组和KGF组减弱,差异有统计学意义(P<0.01)。SP-A在C组与A组在3d、7d、14d的表达无显著性差异。结论长时间暴露于高氧环境,使肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)受损,SP-A分泌随之减少,导致PS功能丧失,阻碍肺发育,KGF促进AECⅡ增殖和分化,增加肺表面活性物质合成与分泌,对胎肺的发育和分化具有重要作用。
- 邱其周王斌陈春芳杜江
- 关键词:表面活性蛋白A角质细胞生长因子高氧
- 角质细胞生长因子对吸入高体积分数氧新生大鼠肺组织的影响被引量:2
- 2012年
- 目的研究角质细胞生长因子(KGF)对高体积分数氧(高氧)暴露下新生大鼠肺组织结构的影响。方法将新生的108只SD大鼠随机分为空气组、高氧组和KGF干预组,每组36只。每组又分为3 d、7 d、14 d 3个亚组。高氧组、KGF干预组大鼠持续暴露于氧体积分数>950 mL.L-1氧箱中,KGF干预组于吸氧同时背部皮下注射重组人角质细胞生长因子(rhKGF)1 mg.d-1,连用3 d后改为0.5 mg.d-1直至实验结束。空气组和高氧组给予等量9 g.L-1盐水。空气组大鼠呼吸空气。3 d、7 d、14 d亚组在相应时间点取肺组织,通过肉眼及光镜下观察其肺组织病理学变化,并作肺泡辐射状计数(RAC)。结果空气组7 d时出现肺泡化,14 d时肺泡化成熟。高氧组时小血管扩张充血,肺间质细胞增多,7 d时肺间隔变厚,肺泡腔大小不一,肺泡数减少,14 d时肺泡数明显减少,肺泡大小不等,出现明显纤维化。KGF干预组7 d时可见肺泡结构较完整,14 d时少数肺泡融合,间质细胞增生不严重。高氧组3 d时RAC与空气组相比差异无统计学意义(P>0.05),7 d、14 d时RAC与空气组相比差异均有统计学意义(Pa>0.01)。KGF干预组各时间点RAC与空气组比较差异均无统计学意义(Pa>0.05)。结论长时间暴露于高氧环境,可导致新生大鼠肺组织发育障碍,但KGF能促进肺泡的发育,减轻纤维化,可有效减轻高氧吸入对新生大鼠肺组织的损伤。
- 邱其周陈春芳王斌杜江肖毅
- 关键词:角质细胞生长因子肺损伤
- 高氧致新生鼠肺结构及VEGF的变化及相关分析
- 目的 本研究的目的 是探讨新生大鼠高氧肺损伤后肺组织结构,血管密度及VEGF蛋白的表达变化及相关性。方法 新生Sprague-Dawley大鼠72只随机分为高氧实验组和空气对照组,高氧组吸入95%高氧建立高氧肺损伤模型。...
- 陈春芳李秋平杜江王斌
- 血管内皮生长因子基因转染骨髓间充质干细胞对支气管肺发育不良大鼠肺发育的影响被引量:12
- 2013年
- 目的研究血管内皮生长因子(VEGF)基因转染骨髓问充质干细胞(MSCs)移植对支气管肺发育不良大鼠肺泡结构和肺部微血管的作用。方法采用密度梯度离心法分离sD大鼠骨髓MSCs,贴壁培养传代并鉴定,应用DNA重组技术构建真核表达载体pcDNA3.1(-)/VEGF164,然后转染至MSCs。将新生SD大鼠置于950mI/L氧箱中14d后,随机分为转染组(MSCs/VEGF组)、对照组(MSCs组)、空白组(无血清培养基组),每组10只,分别于气管内注入1×10^5个转染VEGF的MSCs、单纯MSCs和等量无血清培养基。分别于移植后1、4周取大鼠肺组织行HE染色观察肺组织结构和放射状肺泡计数(RAC),免疫组织化学染色法评价VEGF蛋白表达和新生血管密度情况,Western blot方法检测肺组织中VEGF164蛋白表达情况。结果免疫组织化学结果显示移植后1、4周转染组大鼠肺组织RAC、VEGF蛋白表达、再生血管密度较对照组和空白组均明显增加(P均〈0.05)。Westernblot检测结果显示移植后1、4周转染组VEGFl64蛋白表达较对照组和空白组均明显增加(P均〈0.05)。结论VEGF基因转染MSCs移植能显著促进肺泡发育以及微血管再生,VEGF与新生大鼠肺发育有密切关系。
- 王斌刘茹陈春芳钟春霞杜江李秋平
- 关键词:血管内皮细胞生长因子骨髓间充质干细胞基因治疗支气管肺发育不良
- VEGF真核表达载体构建及其转染骨髓间充质干细胞的表达
- 2011年
- 目的构建大鼠血管内皮细胞生长因子164(vascular endothelial growth factor,VEGF164)真核表达载体pcDNA3.1(-)/VEGF164,观察大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)转染pcDNA3.1(-)/VEGF164基因后,外源性基因VEGF在蛋白水平的表达,为其在治疗肺组织损伤中的应用奠定基础。方法应用DNA重组技术构建VEGF164真核表达载体。采用脂质体介导的转染方法将pcDNA3.1(-)/VEGF164转染大鼠MSCs,并设立空质粒对照组(转染pcDNA3.1空载体)、脂质体对照组,用细胞免疫组化和Western blot检测大鼠MSCs中VEGF164蛋白的表达情况。结果重组质粒pcDNA3.1(-)/VEGF164测序结果与基因库(GENEBANK)中序列一致。细胞免疫组化检测显示pcDNA3.1(-)/VEGF164转染组MSCs中可见散在黄色颗粒,而空质粒对照组和脂质体对照组均未见明显黄色颗粒。Western blot检测pcDNA3.1(-)/VEGF164转染MSCs 72 h后,细胞裂解产物中VEGF含量明显高于空质粒对照组和脂质体对照组。结论成功构建了大鼠VEGF164真核表达载体,实现VEGF164基因在大鼠MSCs的成功转染,并有外源性基因及蛋白的表达,具有促进肺组织损伤修复的应用前景。
- 刘茹陈春芳杜江李秋平王斌
- 关键词:血管内皮细胞生长因子真核表达载体转染
- 高氧暴露对新生大鼠肺SP-C表达的影响
- 2012年
- 目的探讨高氧暴露对新生大鼠肺组织表面活性蛋白C(SP-C)表达的影响。方法将新生的72只SD大鼠随机分为空气组、高氧组,每组36只。每组又分为3、7、14d三个亚组。于空气或高氧暴露后3、7、14d取肺组织,采用免疫组化方法观察肺组织中SP-C表达的变化。结果高氧组3d SP-C表达强度较空气组增强(P<0.05),高氧组7dSP-C表达强度与空气组比较,差异无统计学意义(P>0.05),高氧组14d SP-C表达强度较空气组减弱,差异有统计学意义(P<0.01)。结论高氧暴露可导致新生大鼠肺SP-C表达减弱或功能缺失,SP-C表达异常可能是高氧肺损伤的重要因素。
- 邱其周肖毅杨永玲陈春芳
- 关键词:肺损伤
- 血管内皮生长因子基因转染骨髓间充质干细胞对支气管肺发育不良大鼠肺发育的影响
- 目的研究VEGF基因转染骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对支气管肺发育不良(BPD)大鼠的肺泡结构和肺部微血管的作用方法采用密度梯度离心法分离SD大鼠的MSCs,贴壁培养传代并鉴定,应用DNA重组技术构建真核表达载体pc...
- 刘茹陈春芳钟春霞李秋平杜江王斌
- 携带VEGF基因的MSCs对BPD的治疗研究:1.VEGF真核表达载体构建及表达
- 支气管肺发育不良(Bronchopulmonary dysplasia,BPD)是早产儿常见的慢性肺部疾病,患儿长期氧依赖,重症患儿多因反复感染而死亡,存活者可遗留脑瘫、听力丧失、视力损害等残疾,与儿童哮喘病、慢性阻塞性...
- 陈春芳
- 关键词:高氧肺损伤血管内皮细胞生长因子真核表达载体
- 文献传递
- 高氧致新生鼠肺结构及VEGF的变化及相关分析被引量:2
- 2010年
- 目的探讨新生大鼠高氧肺损伤后肺组织结构,血管密度及VEGF蛋白的表达变化及相关性。方法新生Sprague-Dawley大鼠72只随机分为高氧实验组和空气对照组,高氧组吸入95%高氧建立高氧肺损伤模型。分别采用HE染色和免疫组化法观察新生大鼠3d、7d、14d肺组织形态改变并作肺泡辐射状记数(Radial alveolar countsRAC),检测Ⅷ因子及VEGF蛋白表达。结果对照组大鼠生后随着肺发育,肺泡化逐渐完善,RAC计数、VEGF蛋白及Ⅷ因子表达逐渐增加。高氧组随着吸氧时间延长RAC计数、肺组织VEGF蛋白及Ⅷ因子表达均出现降低,并出现肺泡化阻滞,VEGF与Ⅷ因子始终具有相关性。结论 VEGF促进新生大鼠肺发育,新生大鼠高氧可抑制VEGF及Ⅷ因子在鼠肺内的表达,致肺泡化阻滞,出现类似早产儿支气管肺发育不良的肺组织形态学特征,VEGF在新生鼠肺发育和高氧肺损伤机制中起重要作用。
- 陈春芳李秋平杜江王斌
- 关键词:高氧肺损伤新生大鼠
- 角质细胞生长因子对高氧暴露新生大鼠肺表面活性蛋白B表达的影响被引量:4
- 2013年
- 目的:研究角质细胞生长因子(KGF)对高氧暴露下新生大鼠肺组织表面活性蛋白B(SP-B)表达的影响。方法:将新生的108只SD大鼠随机分为空气组、高氧组和KGF干预组,每组36只,每组分为3、7、14d 3个亚组。高氧组、KGF干预组大鼠持续暴露于氧体积分数>950 mL/L氧箱中,KGF干预组于吸氧同时在背部皮下注射重组人角质细胞生长因子(rhKGF)1 mg/d,连用3d后改为0.5 mg/d至实验结束。空气组和高氧组给予等量生理盐水背部皮下注射。空气组大鼠呼吸空气。3、7、14d亚组分别于3、7、14d取大鼠肺组织,采用免疫组化方法检测肺组织中SP-B表达的积分光密度值(OD)。结果:高氧组3d SP-B表达强度较空气组增强(P<0.05),高氧组7d SP-B表达强度与空气组比较,差异无统计学意义(P>0.05),高氧组14d SP-B表达强度较空气组和KGF干预组减弱,差异有统计学意义(P<0.01)。空气组和KGF干预组SP-B在3、7、14d的表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:长时间暴露于高氧环境,可导致SP-B表达减弱或功能障碍,是高氧肺损伤的重要原因;KGF能促进肺表面活性物质合成,对高氧性肺损伤具有重要的保护作用。
- 邱其周肖毅杨永玲陈春芳
- 关键词:角质细胞生长因子肺损伤