马斌
- 作品数：23 被引量：62H指数：5
- 供职机构：江苏大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省社会发展科技计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 小鼠Th1细胞特异性转录因子T-bet基因的克隆和序列分析被引量：1
- 2005年
- 目的:克隆小鼠Th1细胞特异性转录因子T-bet基因的全长编码区cDNA。方法:利用RT-PCR方法,从Balb/c小鼠脾细胞的mRNA中扩增T-bet基因全长cDNA,并将其连接到pGEM-T载体上,进行测序和核酸分析。结果:扩增得到的小鼠T-bet基因cDNA全长1 592 bp,编码530个氨基酸,包含一个189个氨基酸残基组成的能与T盒DNA结合的结构域;b last结果分析表明,该cDNA与Genbank中发表的序列具有99.8%的同源性。结论:获得小鼠T-bet基因的克隆,为进一步研究转基因免疫干预奠定了基础。
- 王锁英许化溪王胜军黄新祥仝佳王文兵陈巧林马斌眭建姜旭淦胡嘉波
- 关键词：T-BET基因克隆RT-PCR
- 新型辅助性CD4+T细胞亚群在自身免疫性疾病中的作用及机制研究
- 王胜军吕力为田洁马洁毛朝明汤新逸马斌
- 项目属于医学领域的基础与临床研究。自身免疫性疾病是危害中国公众健康的一类重大疾病，临床主要采用糖皮质激素和免疫抑制剂治疗，副作用大，疗效局限，并且严重影响病人生活质量。因此，阐明自身免疫性疾病发病机制，寻找致病性靶向分子...
- 关键词：
- 关键词：自身免疫性疾病糖皮质激素免疫抑制剂治疗
- 小鼠GITRL基因的克隆和序列分析被引量：5
- 2004年
- 目的 :克隆小鼠GITRL基因全长编码区的cDNA ,同时对其序列分析。方法 :采用RT PCR方法 ,从小鼠树突状细胞获得GITRL基因的cDNA ,克隆至pMD18 T载体 ,选择阳性克隆并进行序列测定。结果 :扩增得到的GITRL基因编码区cDNA的全长 5 19bp ,编码 173个氨基酸残基 ,与GeneBank中发表的序列完全一致。结论 :获得小鼠GITRL基因的克隆 ,为进一步研究其生物学功能提供基础。
- 王胜军马斌仝佳许化溪杨胜利
- 关键词：CDNA克隆RT-PCR调节性T细胞小鼠
- 小鼠Th1细胞特异性转录因子T-bet基因腺相关病毒载体的构建被引量：3
- 2006年
- 目的:构建小鼠Th1细胞特异性转录因子T-bet基因的腺相关病毒载体。方法:利用RT-PCR方法,从Balb/C小鼠脾细胞的mRNA中扩增T-bet基因全长cDNA,经测序证实后插入Pzac2.1质粒,用磷酸钙沉淀法,与pAddeltaF6及p5E18质粒共转染293细胞,包装成重组的病毒颗粒,并通过抽提病毒DNA进行PCR扩增鉴定重组病毒的形成,设立eGFP基因为对照。结果:1592bp的小鼠T-bet基因被成功克隆,分析表明,与Genbank中发表的序列相比具有99.8%的同源性。重组质粒Pzac2.1-T-bet的PCR及酶切鉴定表明T-bet基因被定向插入,与pAddeltaF6及p5E18质粒共转染293细胞包装成病毒后,经荧光显微镜和病毒DNA的PCR检测,证实已完成对重组病毒的包装。结论:成功构建了小鼠T-bet基因的腺相关病毒载体rAAV-T-bet,为免疫紊乱性疾病的T-bet基因干预治疗奠定了基础。
- 王锁英许化溪王胜军黄新祥王文斌陈巧林马斌眭建姜旭淦胡嘉波
- 关键词：T-BET腺相关病毒载体
- CD4^+CD25^+调节性T细胞抑制小鼠自身免疫性甲状腺炎的发生被引量：9
- 2005年
- 目的 :研究CD4 + CD2 5 + Treg细胞对诱导小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎 (EAT)的影响。方法 :磁性细胞分离器 (MACS)分离CD4 + CD2 5 + T细胞 ,通过体外细胞增殖试验和IFN γ的测定研究CD4 + CD2 5 + T细胞对CD4 + CD2 5 - T细胞的免疫抑制作用 ,同时通过过继转移试验研究CD4 + CD2 5 + T细胞抑制小鼠EAT的发生。结果 :MACS分离的CD4 + CD2 5 + T细胞纯度可达到 85 %～ 94 % ,特异性表达FoxP3基因 ,体外能明显抑制效应性T细胞的增殖和IFN γ的产生 ;将CD4 + CD2 5 + T细胞与病理性CD2 5 - T细胞共同注射正常小鼠 ,可抑制病理性T细胞诱导EAT的发生。结论 :CD4 + CD2 5 +
- 王胜军许化溪王永忠胡嘉波马斌
- 关键词：CD4^+CD25^+T细胞实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠
- 重组FoxP3腺相关病毒转染小鼠CD4^+CD25^-T细胞的实验研究被引量：3
- 2006年
- 目的:研究FoxP3(ForkheadBoxP3)基因在小鼠T细胞的表达情况,以及重组FoxP3腺相关病毒(adenoassociatedvirus,AAV)对小鼠CD4+CD25-T细胞功能的影响。方法:采用实时定量PCR检测CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞FoxP3mRNA表达情况,利用基因重组技术构建FoxP3腺相关病毒载体,体外转染CD4+CD25-T细胞,通过细胞增殖试验观察转染CD4+CD25-T细胞功能变化。结果:CD4+CD25+T细胞较CD4+CD25-T相比高水平表达FoxP3基因mRNA,重组FoxP3腺相关病毒转染后的CD4+CD25-T细胞对CD3单抗的刺激呈低反应性,并且能抑制新鲜分离CD4+CD25-T细胞的增殖。结论:FoxP3基因转染的CD4+CD25-T细胞在体外具有抑制T细胞活化增殖的功能。
- 王胜军许化溪钱晖邵启祥马斌杨胜利
- 关键词：FOXP3T细胞腺相关病毒免疫调节
- 实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠体内Th17细胞检测的意义被引量：6
- 2011年
- 目的:研究Th17细胞及相关细胞因子IL-17在实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thy-roiditis,EAT)小鼠体内的变化。方法:利用小鼠甲状腺球蛋白(Tg)建立小鼠EAT模型。应用流式细胞术(FCM)分析小鼠脾脏细胞中Th17细胞的比例。采用qRT-PCR检测小鼠脾脏细胞中IL-17 mRNA水平。结果:EAT小鼠脾脏细胞中Th17细胞的比例为(2.44±0.56)%,明显高于正常对照组小鼠(1.12±0.37)%(t=2.712,P<0.05);EAT小鼠脾脏细胞中IL-17 mRNA的含量也明显高于正常对照组(t=3.458,P<0.05)。结论:Th17细胞及其相关细胞因子IL-17 mRNA水平在EAT小鼠体内明显升高,并与疾病的发生密切相关。
- 马斌田洁刘艳刘青玲马洁汤新逸魏衍财吴彩云柳迎昭许化溪陈永昌王胜军
- 关键词：TH17细胞IL-17实验性自身免疫性甲状腺炎
- 小鼠GITR真核表达载体的构建及表达
- 2011年
- 目的:构建小鼠GITR(mGITR)的真核表达载体,转染COS-7细胞表达小鼠GITR蛋白。方法:用TRIzol试剂抽提小鼠脾细胞总RNA,经RT-PCR扩增出GITR全长基因,构建真核重组载体pIRES2-EGFP-mGITR,经鉴定后采用脂质体介导DNA法转染COS-7细胞。结果:从小鼠脾细胞中成功扩增得到GITR全长基因。重组载体pIRES2-EGFP-mGITR转染COS-7细胞后,经荧光显微镜观察可见绿色荧光,提取蛋白后经蛋白质印迹鉴定有目的蛋白mGITR。结论:成功构建了小鼠GITR基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-mGITR,转染COS-7细胞后mGITR蛋白获得成功表达。
- 沈培郑东刘艳田洁赵银霞刘青玲朱晨露马洁苏兆亮马斌许化溪王胜军
- 关键词：真核表达转染COS-7细胞
- 老年支气管哮喘患者血浆中IL-9检测及临床意义被引量：1
- 2010年
- 目的 检测老年支气管哮喘患者血浆中IL-9的水平,探讨IL-9在支气管哮喘发生发展中的意义.方法 收集老年支气管哮喘患者和健康对照外周血标本.采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆中IL-9和总IgE浓度.结果 老年支气管哮喘急性发作期患者血浆IL-9水平显著高于健康对照组（P〈0.05）,而临床缓解组与健康对照组差异无统计学显著性意义（P〉0.05）.老年支气管哮喘急性发作期患者血浆IL-9水平与总IgE浓度呈正相关.结论 老年支气管哮喘患者血浆中IL-9水平升高,与疾病的发生发展关系密切.
- 徐庆雷王洪建胡礼仪马斌仝佳陈建国
- 关键词：支气管哮喘白介素-9酶联免疫吸附试验
- 真核表达质粒pDisplay-hGITRaa_(1-165)构建及其在COS-7细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的:构建含有人GITR胞外段的真核表达质粒pDisplay-hGITRaa1-165,并检测其在真核细胞内的表达。方法:将带有信号肽的GITR基因片段克隆至真核表达载体pDisplay,经酶切鉴定及测序分析,脂质体介导法转染COS-7细胞,通过蛋白质印迹法检测其在COS-7细胞内的表达水平。结果:所构建的真核表达质粒pDisplay-hGI-TRaa1-165转染COS-7细胞后,在其培养上清中检测到目的蛋白的表达。结论:成功表达pDisplay-hGITRaa1-165蛋白,为GITR的生物学功能研究奠定了基础。
- 陈君王胜军仝佳王海生马斌唐莉胡正军鲍俊峰史烨许化溪
- 关键词：GITRCOS-7细胞真核表达
