魏然 作品数:7 被引量:12 H指数:3 供职机构: 湖南农业大学农学院 更多>> 发文基金: 湖南省自然科学基金 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 更多>>
湖南药用植物菝葜种质资源亲缘关系研究 被引量:3 2007年 目的:探讨湖南药用植物菝葜种质资源的亲缘关系。方法:以湖南金刚藤主产区的15个菝葜材料为研究对象,用RAPD技术对其进行亲缘关系分析。在建立适合菝葜植物的PCR-RAPD反应体系的基础上,从45个随机引物(10 m er)中筛选出14条,对所有供试材料进行正式扩增,共获得14张DNA指纹图谱,144条DNA谱带,其中有135条为多态带。建立了基于RAPD的菝葜植物亲缘关系树形图。结果:成功地将湖南金刚藤主产区的菝葜植物划分为明山类、会同类、靖州类、雪峰山类和鸡公界类的菝葜归为会雪类、靖鸡类和明山类。会雪类与靖鸡类与明山菝葜相比较,会雪类与靖鸡类的亲缘关系又较近。结论:本研究揭示了湖南省不同菝葜类型之间亲缘关系,这个研究结果是国内外首次对湖南不同菝葜类型之间亲缘关系的报道。 仇萍 盛孝邦 彭琦 魏然 刘春林 黄宇明 张光贤 宋思才关键词:RAPD 亲缘关系分析 化学诱导激活系统的研究进展 被引量:1 2006年 以雌激素为基础的化学诱导激活系统是一种有效的基因分离和鉴定的方法。它通过雌激素的使用量严格控制内源基因的表达而产生显性功能获得型突变,从而克服了不能筛选鉴定植物生长发育中的关键基因和一些功能冗余基因的问题。同时该系统在植物转基因中具有高效和可靠的化学诱导机制并有着广泛的应用前景。综述了化学诱导激活系统原理、特点和研究现状。 魏然 阮颖 王莹 刘春林关键词:雌激素 突变体 α-甘露糖苷酶SSc4基因过表达质粒构建与油菜转化 2017年 菌核病是由核盘菌引起的一种世界性的真菌病害,对我国油菜生产危害尤为严重。但是现在已知的所有植物资源中都找不到对核盘菌完全具有抗性的基因资源。本研究采用"以毒攻毒"的途径,将核盘菌自身参与致病的一个α-甘露糖苷酶SSc4基因转到甘蓝型油菜中,以期获得对能对核盘菌产生抗性的油菜种质新资源。本研究克隆核盘菌的SSc4基因,构建了其过表达质粒,并通过农杆菌介导转化油菜,实验共筛选到159株抗性苗,其中获得了27株转基因油菜,转化率约为1%。对其中的9株转基因苗进一步作RT-PCR检测,显示有6株转基因植株中SSc4基因高表达,实现了设计目标。 魏然 何雯 刘春林关键词:核盘菌 拟南芥β-罗勒烯合成酶基因AtTPS03的克隆及其植物过表达载体的构建 植物通讯(plant communication)是指植物与植物个体之间和植物与食草动物之间的信号跨空间传递以及信号接受个体对信号作出的生理应答和行为反应。植物受食草动物攻击后产生有机挥发性化合物,这种挥发物就起着跨空间... 魏然关键词:拟南芥 CDNA克隆 文献传递 拟南芥β-罗勒烯合成酶基因T-DNA插入突变体的鉴定 被引量:1 2011年 β-罗勒烯(β-Ocimene)是一种单萜挥发性有机物,亦是一种重要的植物通讯信号分子。为了进一步研究β-罗勒烯的作用机理,需要获得β-罗勒烯合成酶基因表达沉默的实验材料。根据TAIR网站上公布的β-罗勒烯合成酶信息,从美国拟南芥生物资源中心购买该基因的T-DNA插入突变体材料,运用双引物法对这些突变体进行了T-DNA插入位点的鉴定,获得8株稳定遗传的纯合突变体,该结果为深入研究β-罗勒烯的功能奠定了良好基础。 马泉芳 魏然 刘春林关键词:T-DNA插入突变 拟南芥 禽流感抗原基因NA,HA的克隆及其表达载体的构建 被引量:3 2008年 HA和NA是禽流感病毒重要的保护性抗原基因,为了得到禽流感植物疫苗,本试验采用高保真PCR扩增方法得到目的基因,分别克隆到pMD18-T载体。经测序证实核酸序列正确后,克隆到含有GUS基因的高效植物双元表达载体pBl121上,获得含有HA/NA基因的植物双元表达载体pBI121-HA和pBI121-NA,采用冻融法将含HA/NA基因的植物双元表达载体转入根癌农杆菌LBA4404,菌液浸染生菜子叶,共培48小时后进行GUS基因表达检测,x-glue染色显蓝色,说明带有HA/NA的植物双元表达载体构建成功,为下一步的生菜转HA/NA基因研究奠定基础。 李进 阮颖 龚剑 范亚丽 姚远頲 杜培粉 魏然 刘春林关键词:HA 禽流感 甘蓝型油菜Fad2与Fae1基因双干扰RNAi载体的构建 被引量:4 2007年 将来源于甘蓝型油菜XY15的Fad2与Fae1基因编码区,长度分别为349bp和426bp的两个保守序列片段连接成807bp的大片段。然后分别以正反向插入到pFGC5941干扰载体查耳酮合成酶内含子的两端,构建成RNAi载体。以期在菜籽中转录后能有效抑制Fad2与Fae1两个基因的表达。所构建的RNAi载体最终序列全长3kb,经限制性内切酶消化、PCR扩增验证和序列测定,证明目标序列与GenBank数据库中的碱基序列一致,并且为正反向插入到pFGC5941载体上。通过农杆菌介导的油菜转化,已获得油菜抗性再生植株144个。 彭琦 张源 双桑 魏然 伍林涛 丁昕 阮颖 刘春林关键词:油菜 RNAI