鲁洁
- 作品数：8 被引量：15H指数：2
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- 棉花皱叶病毒分子检测方法被引量：1
- 2013年
- 棉花皱叶病毒(Cotton leaf crumple virus,CLCrV)是典型的双生病毒,含A和B两个组分。根据B组分的保守序列设计的一对普通PCR引物,得到约为636 bp的片段,实验结果显示能特异性地扩增CLCrV B组分,棉花曲叶病毒(Cotton leaf curl virus,CLCuV)、非洲木薯花叶病毒(African cassava mosaec vi-rus,ACMV)、花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus,CaMV)及番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)不干扰普通RCR方法对CLCrV的检测。设计的实时荧光PCR引物和探针也能特异性地检测棉花皱叶病毒,而CLCuV、ACMV和TYLCV不影响实时荧光PCR对CLCrV的检测。
- 雷荣辛言言乔文婕周雪平鲁洁马洁张永江
- 关键词：PCR实时荧光PCR
- 两种抗原制备黄瓜花叶病毒多克隆抗体的比较研究被引量：2
- 2013年
- 以提纯的黄瓜花叶病毒M株系(CMV-M)病毒粒子以及体外原核表达的外壳蛋白(CMV-CP)为抗原免疫健康家兔,制备了CMV-M多克隆抗体。采用间接酶联免疫吸附试验检测其效价,并结合Western-blot比较了两种多克隆抗体的灵敏度。结果表明:制备的两种CMV-M多克隆抗血清效价均达到1:25600;检测病汁液的灵敏度方面,以病毒粒子为抗原的多克隆抗血清达到1:3200,明显优于以原核表达蛋白作为抗原的抗血清1:800,蛋白印迹着色前者在样品量倍比稀释后免疫条带清晰,后者条带模糊甚至消失。
- 杜智欣李桂芬马洁孔君鲁洁朱水芳
- 关键词：黄瓜花叶病毒多克隆抗体ELISAWESTERN-BLOT效价
- 犀牛角制品真伪及其所属种类的分子鉴定方法
- 本发明公开了一种犀牛角制品真伪及其所属种类的分子鉴定方法。本发明提供了通用引物对在辅助鉴定犀牛角制品中的犀牛角材料来源于哪种犀牛中的应用。所述通用引物对为序列表的序列1所示DNA分子和序列表的序列2所示DNA分子组成的引...
- 赵竹宋云李明福张永江鲁洁王仁睿许瑾
- 文献传递
- 烟草环斑病毒磁免疫层析试纸条的研制被引量：3
- 2014年
- 烟草环斑病毒是我国检疫性有害生物,为防止该病毒传入国内,需建立快速的诊断和检测方法。将烟草环斑病毒的多克隆抗体吸附到磁性纳米颗粒上,研制出磁免疫层析检测试纸条。该试纸条可特异性检测烟草环斑病毒,检测部分提纯病毒的灵敏度为1μg/mL,检测烟草病汁液可稀释1000倍(重量/体积)。该试纸条和线虫传多面体病毒属的番茄环斑病毒、番茄黑环病毒、南芥菜花叶病毒和葡萄扇叶病毒未出现交叉反应,可用于烟草环斑病毒的现场检测。
- 魏梅生李桂芬马洁鲁洁张永江孔君
- 关键词：烟草环斑病毒试纸条
- 青岛浒苔完整叶绿体分离及其蛋白质提取方法的初步建立被引量：1
- 2013年
- 初步建立青岛海域漂浮浒苔完整叶绿体的分离纯化及其叶绿体蛋白质提取方法,为进一步研究浒苔叶绿体蛋白质组学奠定基础。本研究应用组织研磨结合Percoll密度梯度离心的方法分离出浒苔的完整叶绿体,随后以两种蛋白裂解液配方分别提取叶绿体总蛋白,并通过蛋白定量和两种聚丙烯酰胺凝胶电泳进行比较分析。结果表明:Percoll密度梯度离心的方法能够获得完整且较纯的浒苔细胞叶绿体;含有尿素以及CHAPS的蛋白裂解液抽提的叶绿体蛋白质数量比SDS裂解液更多;相较于普通Tris-SDS-PAGE,采用Tricine-SDS-PAGE电泳系统可以有效分离40kDa以下的小分子叶绿体蛋白质。
- 杜智欣邱艳红鲁洁段维军孔君朱水芳
- 关键词：浒苔叶绿体蛋白质密度梯度离心
- 鉴定番茄严重曲叶病毒的引物和探针及其检测方法
- 本发明公开了一种鉴定番茄严重曲叶病毒的引物和探针及其检测方法。本发明提供了鉴定或辅助鉴定番茄严重曲叶病毒（Tomato severe leaf curl virus，ToSLCV）的组合物，该组合物由一个引物对和一个探针...
- 张永江朱水芳辛言言鲁洁牟海青
- 文献传递
- 应用纳米磁珠实时荧光PCR检测非洲木薯花叶病毒被引量：7
- 2013年
- 建立非洲木薯花叶病毒(African cassava mosaic virus,ACMV)灵敏快速的纳米磁珠实时荧光PCR检测技术,防止其传入中国。采用TaqMan探针结合纳米磁珠(magnetic nanoparticles,MNPs)技术,以外壳蛋白基因为目标基因,通过特异性及灵敏度试验建立MNP荧光PCR检测方法。成功建立了非洲木薯花叶病毒(ACMV)的MNP荧光PCR检测方法;该方法检测阈值约为13pg DNA,比普通PCR及ELISA方法灵敏度高25倍;该方法具有良好的特异性,能够有效区分双生病毒属的ACMV、棉花曲叶病毒(CLCuV)、番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)及番茄严重曲叶病毒(ToSLCV)。MNP荧光PCR方法能够快速灵敏的检测茎叶样品中的ACMV,无需任何PCR后处理,交叉污染风险小,适于口岸检验检疫。
- 张永江马洁李桂芬鲁洁辛言言孔君李明福邓丛良朱水芳
- 关键词：实时荧光PCR
- 植物抗病毒分子机制的研究进展被引量：1
- 2012年
- 植物在进化过程中为微生物提供了丰富的物质环境,微生物的生存依赖于植物的生物合成和产生能量的能力。有近450种植物致病病毒,可导致一系列的疾病。但植物不是被动地面对病毒的攻击,而是进化了精细而有效的防御机制来抵抗、限制或损害病毒的感染。植物抗病基因(R-gene)可以抵抗包括病毒在内的多种病原体。由特定病毒而引发的防御反应是先天固有的,而且研究人员已经鉴定了与这种防御反应相关的细胞学和生理学特性。作为抵抗外来核酸(包括病毒)的重要细胞防御途径,RNA沉默近来获得了显著性的研究进展。在植物中这些途径的协同作用有效地防御了病毒的感染。
- 孔君杜智欣朱水芳鲁洁
- 关键词：植物病毒RNA沉默抑制子
