目的研究冠心病患者血清消皮素D(gasdermin D,GSDMD)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)水平与冠心病患者冠状动脉粥样硬化斑块稳定性的相关性。方法收集2017年10月~2020年12月于哈尔滨医科大学附属第五医院心内科二病区收治住院的冠心病患者97例,根据血管内超声(intravascular ultrasound,IVUS)检查结果分为易损斑块组(55例)、稳定斑块组(42例)。比较两组患者一般资料;利用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)检测患者血清GSDMD、IL-1β、IL-18水平;利用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)评价血清GSDMD、IL-1β、IL-18对患者斑块稳定性的诊断价值;运用Logistic分析方法预测患者斑块稳定性的危险因素。结果易损斑块组和稳定斑块组男性患者比例、患者年龄、体质指数(body mass index,BMI)、吸烟史、糖尿病史、高血压史以及血脂水平均无显著性差异(P>0.05);与稳定斑块组患者比较,易损斑块组患者血清GSDMD、IL-1β、IL-18表达水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清GSDMD、IL-1β、IL-18诊断易损斑块的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.782(95%CI:0.690~0.874)、0.647(95%CI:0.536~0.757)、0.680(95%CI:0.572~0.787),敏感度分别为0.800、0.582、0.491,特异度分别为0.738、0.714、0.857。Logistic回归分析结果表明,血清GSDMD、IL-1β、IL-18水平可作为冠心病患者发生易损斑块的独立危险因素(P均<0.05)。结论血清GSDMD、IL-1β、IL-18水平对判断冠心病斑块稳定性具有一定的诊断价值,血清GSDMD、IL-1β、IL-18水平高是冠心病患者发生易损斑块的独立危险因素。
目的建立针对PELP1基因启动子区CpG岛的甲基化特异性PCR(Methylation specific PCR,MSP)检测方法,分析乳腺癌细胞中PELP1基因表达与启动区CpG岛甲基化的相关性。方法设计针对PELP1基因启动子区的MSP引物组,以甲基化和非甲基化DNA为模板验证MSP引物的特异性,建立针对PELP1基因启动子区的MSP检测方法。以DNA甲基转移酶抑制剂5'-氮杂-脱氧胞苷磷酸(5'-Aza-d C)分别处理MCF-7乳腺癌细胞、MCF-10正常乳腺导管上皮细胞,采用MSP检测PELP1基因启动子区甲基化状态变化,采用Western blot检测蛋白表达。结果针对PELP1基因启动子区设计的MSP引物组特异性良好,甲基化特异性引物仅在甲基化DNA模板获得阳性扩增条带,非甲基化引物仅在非甲基化DNA模板获得阳性条带。MCF-7乳腺癌细胞中PELP1基因启动子区呈非甲基化状态,MCF-10正常乳腺导管上皮细胞中PELP1基因启动子区呈甲基化状态,MCF-10细胞中PELP1蛋白表达水平为MCF-7细胞的1/16(P<0.05)。采用5'-Aza-dC去除MCF-10细胞PELP1基因启动子区甲基化后,PELP1蛋白表达水平上升了9.7倍(P<0.05)。结论所建立的PELP1基因启动子区MSP检测方法特异性良好,去甲基化可能是导致乳腺癌细胞中PELP1基因过表达的重要机制。
