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猪圆环病毒多重PCR诊断方法的建立被引量：3: 2005年; 猪圆环病毒(PCV)是迄今发现的最小的动物病毒.主要引发猪断乳后多系统衰竭综合征(PMWS),该病主要特征是猪进行性消瘦、多系统病理损伤,严重影响断乳猪生长发育.对PCV和PMWS的一系列研究表明,PCV在猪体内长期演变过程中,产生了有致病性的变异株,称为PCV2;相应地将没有致病性的持续污染PK15细胞的毒株称为PCV1.PCV1是无致病性的,广泛存在于猪群中,而PCV2是致病性的,能引起多种疾病综合征.; 全滟平崔尚金蔡阳李曦符芳; 关键词：猪圆环病毒多系统衰竭综合征 PCV2 动物病毒病理损伤

细胞生物学课程全英文教学实践与探索被引量：1: 2019年; 全英文教学是促进高校教育国际化的重要手段,结合4年来浙江理工大学细胞生物学全英文课程的教学实践,从课程概况、教学方法探讨、考核方式、存在问题等方面阐述细胞生物学课程全英文教学的实践过程,总结全英文教学过程中的经验和存在问题,提出今后教学改革的措施,从而提高全英文教学水平,促进细胞生物学全英文教学模式的健康发展。; 全滟平吴月红于威盛清代琦; 关键词：细胞生物学全英文教学教学实践

马传染性贫血病毒LTR在驴胎皮肤细胞中的基因进化及启动子活性比较: 将EIAV驴白细胞弱毒疫苗株在驴胎皮肤细胞中连续传代，分别提取第13、18、21、23、26代病毒培养物的前病毒DNA，以LTR特异性引物PCR扩增前病毒LTR，并进行克隆及测序分析。与本实验室已测定的驴白细胞毒株LTR...; 全滟平韩秀娥沈楠赵立平周建华沈荣显相文华; 关键词：基因进化启动子活性

马传染性贫血病毒第1 9、26代驴胎皮肤细胞弱毒前病毒DNA全基因序列分析: 2007年; 不同代次马传染性贫血驴胎皮肤细胞弱毒(Fetal donkey dermal virus,FDDV)的免疫保护效果各不相同,只有第10～15代驴胎皮肤细胞弱毒具有良好的免疫保护效果,可作为疫苗使用,继续传代则疫苗的保护率下降。为确定有、无免疫保护效果的FDDV在基因水平上的差异,本实验对无免疫保护效果的第19、26代驴胎皮肤细胞弱毒前病毒DNA进行了全基因序列测定,并与已测序的疫苗毒株进行序列比较。第19代和第26代FDDV全基因核苷酸序列同源性高达99.5%,与疫苗毒株全基因核苷酸序列的同源性分别为96.9%、96.7%。LTR是EIAV在细胞传代中变异最显著的区域,第19、26代FDDV的LTR与疫苗毒的LTR同源性仅为89.6%、89.3%。马传贫病毒的gag基因高度保守,第19、26代FDDV与疫苗毒株的gag基因推导氨基酸序列仅有2个氨基酸不同。第19、26代FDDV与疫苗毒株的pol基因、env基因的推导氨基酸序列的同源性分别为98.9%、98.8%、93.7%、93.6%。由序列比较结果可以推断,第19代、第26代FDDV不具有免疫保护效果的主要原因可能是由于LTR和env基因的变异,导致病毒复制能力下降或免疫原性丧失,不能诱导机体产生良好的免疫反应。; 全滟平赵立平韩秀娥沈楠吕晓玲沈荣显相文华; 关键词：马传染性贫血全基因序列分析

家蚕杆状病毒bm64基因的功能研究: <正>杆状病毒(Baculovirus)是一类专门寄生节肢动物的病原微生物,杆状病毒基因结构与功能的研究是杆状病毒分子生物学领域研究的热点之一。BmNPV bm64及其同源基因存在于所有鳞翅目杆状病毒和2/3的膜翅目杆状...; 全滟平潘慧慧毕臻乐于威; 关键词：家蚕杆状病毒功能分析; 文献传递

猪圆环病毒2型分离株的基因组克隆、序列测定与分析被引量：1: 2006年; 设计合成两对覆盖PCV2基因组全长的引物,对PCV2分离株S2、P11、L进行全基因测序。将所测序列与GenBank上已公布的PCV2毒株序列进行同源性比较,并绘制系统发育进化树。结果显示,所测毒株与其它地域的24株PCV2分离株的基因组序列同源性很高。3个分离株之间的全基因核苷酸同源性在95.4%～99.3%。序列分析表明欧洲分离株和美洲分离株分别构成PCV2的两个大的分支:欧洲系和美洲系。S2、P11属于欧洲系,L属于美洲系。; 全滟平崔尚金宋木霞姜艳玲; 关键词：猪圆环病毒克隆序列测定与分析

猪圆环病毒多重PCR诊断方法的建立被引量：19: 2006年; 根据GenBank中20株猪圆环病毒(PCV2)核苷酸序列设计两对引物,建立的检测猪圆环病毒的多重PCR方法,其中引物P1、P2为PCV特异性,扩增938bp片段。P3、P4为PCV2特异性扩增490bp,因此本方法不仅可以扩增PCV片段,还可以同时区分PCV1和PCV2。该方法具有良好的特异性和敏感性,为猪圆环病毒的临床诊断与流行病学调查等研究奠定了基础。; 崔尚金全滟平李曦符芳姜艳玲张莉; 关键词：猪圆环病毒多重PCR

家蚕富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白基因BmSPARC的表达及亚细胞定位被引量：1: 2009年; 富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)是一种小分子酸性糖蛋白,在有机体内广泛分布,通过与胞外基质蛋白相互作用而表现出多种生物活性。从家蚕蛹cDNA文库中获得SPARC基因(BmSPARC)的cDNA序列,GenBank登录号为FJ602783。利用生物信息学方法对此序列进行分析表明,BmSPARC的cDNA序列全长1 626 bp,含有1个954 bp的开放阅读框(ORF),编码317个氨基酸残基;同源性比较显示该基因编码蛋白的氨基酸序列在无脊椎动物中具有较高的保守性。将BmSPARC片段在大肠杆菌BL21中表达并纯化后,免疫新西兰兔制备多克隆抗体,通过亚细胞定位研究发现该基因表达蛋白主要存在于细胞质中。利用实时荧光定量PCR的方法,对BmSPARC在家蚕不同发育时期、不同组织中的mRNA转录水平进行比较,并采用Western blotting方法对BmSPARC蛋白的表达进行分析,结果表明:BmSPARC在家蚕卵期和5龄幼虫丝腺组织中无表达,而在5龄幼虫、蛹、蛾发育时期及5龄幼虫的头部、脂肪体、中肠、马氏管、卵巢、表皮和气门等7个组织中均有不同程度的表达,其中在蛾期和5龄幼虫卵巢中的表达量较高。研究结果为进一步探讨BmSPARC在家蚕生长发育过程中的生物学功能打下了基础。; 朱玉娟吕正兵陈琴聂作明王丹陈健刘立丽郑青亮陈剑清沈红丹盛清全滟平徐杰张文平吴祥甫张耀洲; 关键词：家蚕亚细胞定位实时荧光定量PCR

家蚕核型多角体病毒orf61基因缺失对病毒复制和各时期基因转录的影响被引量：1: 2017年; orf61是杆状病毒晚期表达的核心基因之一。为了研究家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)orf61基因的功能,利用Red重组技术与Bac-to-Bac系统分别敲除和异位补回orf61基因,构建了orf61缺失型病毒orf61-ko-Bacmid以及补回型病毒orf61-reBacmid,然后分别转染家蚕培养细胞Bm N,调查orf61基因缺失对Bm NPV复制和不同时期基因转录的影响。检测orf61基因缺失型病毒转染Bm N细胞液上清中的病毒滴度为0,说明orf61基因缺失导致病毒不能形成有感染活性的芽生型病毒粒子(BV);荧光定量PCR分析orf61基因缺失会显著地降低病毒基因组的复制水平,进而导致病毒各个时期基因转录水平极显著下降(P<0.01)。此外,通过体外EMSA试验和构建双荧光素酶报告基因系统,检测ORF61蛋白对多角体蛋白基因polh启动子的调控作用,结果显示该蛋白质是polh基因转录的负调节因子。研究结果有助于深入阐释Bm NPV orf61基因在病毒基因组复制中的作用以及对极晚期表达的多角体蛋白基因polh的转录调控作用。; 薛圣杰李俊余海鹏张媛媛张媛媛全滟平于威; 关键词：家蚕核型多角体病毒病毒复制基因转录调控

猪圆环病毒诊断技术的研究: 猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)是目前发现的最小的动物病毒.PCV具有2种基因型:PCV1和PCV2.PCV1和PCV2均可持续感染PK-15细胞,无细胞病变效应(CPE).PCV1无致病性.近...; 全滟平; 关键词：猪圆环病毒多重PCR 间接免疫荧光试验; 文献传递

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