冯磊
- 作品数:13 被引量:41H指数:5
- 供职机构:大连大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金大连市科学技术基金辽宁省教育厅科学计划资助项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 脊椎动物MHCI类分子结晶研究进展
- 主要组织相容性复合体(mlajor histocompatibility complex,MHC)存在于所有的脊椎动物,是一类编码免疫应答及相关功能的基因群。MHC包括三类基因,分别是MHCⅠ、MHCⅡ和MHCⅢ。其中M...
- 冯磊孙明伟董顺鹏高凤山
- 关键词:MHC脊椎动物晶体多肽
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒乳酸菌载体疫苗对小鼠初步免疫试验被引量:13
- 2013年
- 猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的以腹泻、呕吐、脱水和哺乳仔猪高死亡率为特征的一种肠道传染病,给养猪业造成严重的损失。将构建的PEDV重组乳酸菌,诱导表达后,经不同免疫方式接种4周龄小鼠,1周后采血应用ELISA方法检测血清中的PEDV抗体及IFN-γ,评价PEDV乳酸菌疫苗刺激产生的体液免疫与细胞免疫水平。同时,在免疫前后测定小鼠体重,评价疫苗对小鼠生长发育的影响。结果显示,各免疫组对小鼠体重增加没有负影响,且略有增加;免疫后,10倍稀释口服组小鼠刺激产生的PEDV抗体水平最高,同时该组刺激产生的血清IFN-γ水平也最高。该PEDV乳酸菌载体口服疫苗能够刺激小鼠产生体液免疫和一定的细胞免疫。
- 赵德李鹏高凤山冯磊许崇波
- 关键词:猪流行性腹泻病毒Γ干扰素酶联免疫吸附试验
- 表位疫苗的设计及应用研究进展被引量:7
- 2012年
- 表位疫苗相对传统疫苗拥有较多优势,其最大的优点就是可以克服传统疫苗造成的毒力恢复或散毒的可能。另外表位疫苗本身无毒、稳定,符合未来疫苗发展的方向。表位疫苗的设计需要从表位的筛选、优化及表位的组合等多方面展开。现对表位疫苗的设计策略及应用作一介绍。
- 赵德冯磊张强郭建宏高凤山
- 关键词:表位疫苗抗原
- 猪主要组织相容性复合体研究进展被引量:12
- 2012年
- 主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)分子首先作为主要组织相容性抗原被发现,进而以此命名。随着其抗原结合分子及T细胞信使生物学功能本质的揭示,关于MHC结构与功能的研究就进入了一个崭新时代,并在这一领域中取得了许多可喜的成果。论述了近年来猪MHC(SLA)结构与功能方面的研究进展,包括SLA的分类及多态性、SLA分子结构特点、SLA分子功能及SLA分子相关领域的最新研究进展。
- 冯磊赵德高凤山
- 关键词:主要组织相容性复合体
- 荷包猪SLA-3基因及其应用
- 本发明公开荷包猪SLA-3基因及其应用,包括对我国特色品种荷包猪包括2个SLA-3等位基因cDNA的扩增、序列测定和分析。所述的2个SLA-3等位基因碱基序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示。这些基因...
- 高凤山乔翠赵德冯磊
- 猪白细胞抗原(SLA)研究进展
- 猪白细胞抗原(swine leukocyte antigen,SLA)亦称为猪主要组织相容性复合体(majorhistocompatibility complex,MHC),属于猪重要的免疫应答基因群。随着猪SLA分子抗...
- 冯磊赵德高凤山
- 关键词:主要组织相容性复合体
- 文献传递
- 托佩克猪SLA-2基因克隆与表达被引量:5
- 2013年
- 为提高托佩克猪SLA-2-TPK基因胞外区在pET-21a的表达量,对其5′端进行密码子优化,并设计表达引物,PCR扩增SLA-2-TPK胞外区,然后克隆入pMD○R19-T Simple Vector,经酶切鉴定后连接至pET-21a载体,转化BL21(Rosseta)进行诱导表达,SDS-PAGE检测目的蛋白。PCR结果显示,SLA-2-TPKe大小约为850bp,并成功克隆入pMD○R19-T Simple Vector,双酶切后大小为834bp。酶切后的SLA-2-TPKe成功与pET-21a链接,重组菌经诱导后目的蛋白大小为30.9ku,与密码子优化前重组菌相比,目的蛋白相对表达含量提高约40%。研究证明,密码子优化可明显提高蛋白的表达量,为进行其他蛋白表达研究提供了参考。
- 刘腾飞冯磊田永发刘畅姜巍严婷婷高凤山
- 关键词:密码子优化
- 荷包猪SLA-2重链基因偶合底物肽及表达研究被引量:7
- 2012年
- 目的:构建荷包猪SLA-2重链基因偶合底物肽(BSP)并研究其在pET-21a(+)中的蛋白表达。方法:设计荷包猪SLA-2-BSP复合基因引物,PCR扩增荷包猪SLA-2-HB-BSP复合基因,并克隆至pMD19-T Simple Vector,经酶切鉴定后,将SLA-2-HB-BSP复合基因与表达系统pET-21a(+)连接,并转化BL21(Rosetta)菌进行诱导表达,SDS-PAGE检测目的蛋白。结果:PCR结果显示,SLA-2-BSP大小为900bp左右,并成功克隆至pMD19-T Simple Vector载体,酶切后大小为876bp,该基因连接pET-21 a(+)并转化宿主菌BL21(Rosetta)后,经诱导表达和SDS-PAGE检测,目标蛋白大小为34.4kDa,经优化后目的蛋白相对表达含量达到了45%。结论:该研究成功构建荷包猪SLA-2偶合BSP的pET-21a重组表达系,为下一步构建猪SLAⅠ类分子四聚体奠定了基础。
- 张香春冯磊张鑫何潇涵吴子环高凤山
- 关键词:荷包猪SLA-2
- 烟台黑猪SLA-2-YTH原核表达载体的构建及表达被引量:4
- 2014年
- 为构建烟台黑猪SLA-2-YTH基因原核表达载体,本研究设计引物PCR扩增SLA-2-YTH胞外区,将其克隆至pMD?19-T Simple载体,筛选阳性克隆。阳性克隆经酶切后,进一步与表达载体pET-28a(+)连接,转化BL21(Rosseta)感受态细胞并进行诱导表达,SDS-PAGE检测蛋白表达情况。结果显示,SLA-2-YTH胞外区亚克隆大小为834bp,酶切鉴定证实其成功插入pET-28a(+)表达载体。SDS-PAGE结果显示,SLA-2-YTH基因导入宿主菌后成功表达,蛋白大小约31.0ku,与预期结果相符,优化后蛋白相对表达量达25%以上。本研究成功构建了烟台黑猪SLA-2-YTH原核表达载体,获得了表达蛋白,为今后进一步的结构和功能研究奠定基础。
- 姜巍董宋鹏李子彬姜龙冯磊高凤山
- 关键词:原核表达
- 荷包猪SLA-3基因及其应用
- 本发明公开荷包猪SLA-3基因及其应用,包括对我国特色品种荷包猪包括2个SLA-3等位基因cDNA的扩增、序列测定和分析。所述的2个SLA-3等位基因碱基序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示。这些基因...
- 高凤山乔翠赵德冯磊
- 文献传递