史卫峰
- 作品数：51 被引量：108H指数：6
- 供职机构：泰山医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学理学更多>>
- pSecTag-EGFP真核表达载体的构建及其转染鸡胚胎成纤维细胞条件的优化
- 2007年
- 目的构建含报告基因增强绿色荧光蛋白(EGFP)的分泌型真核表达载体pSecTag-EGFP,用以研究pSecTag/HygroB转染鸡胚胎成纤维细胞的转染效率,为目的基因的成功表达奠定基础。方法用PCR方法克隆得到EGFP基因,通过酶切、连接、转化构建pSecTag-EGFP分泌型真核表达载体,设计优化实验,通过脂质体介导的方法转染鸡胚胎成纤维细胞,在荧光显微镜下直接观察该基因的表达。用B radford法检测不同组合的细胞培养液中的EGFP蛋白的相对含量。结果脂质体介导的方法能有效转染鸡胚胎成纤维细胞,实验中EGFP蛋白相对表达量随质粒量的增加而明显升高(P<0.01)。其中脂质体2μl、质粒1.0μg时目的蛋白相对表达量最高。结论pSecTag-EGFP质粒构建成功,并成功优化了转染条件。
- 杨娜娜史卫峰崔英杰赵晓民杜立新
- 关键词：真核表达载体脂质体转染
- 冷冻蝇蛹用于丽蝇蛹集金小蜂繁育的探讨 Ⅱ.对丽蝇蛹集金小蜂后代发育和品质的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探讨冷冻蝇蛹对丽蝇蛹集金小蜂繁殖的影响。方法考查丽蝇蛹集金小蜂在-20℃和-70℃条件下,冷冻不同时间的棕尾别麻蝇蛹内的发育历期、后代大小和雌蜂寿命、后代的寄生和繁殖能力。结果丽蝇蛹集金小蜂在-20℃和-70℃冷冻后不同时间棕尾别麻蝇蛹内的发育历期均为12～13d,后代雌蜂体长约为2mm,雄蜂体长约为1.4mm,后代雌蜂寿命约为11d,与对照比较差异无统计学意义;冷冻棕尾别麻蝇蛹中羽化出的丽蝇蛹集金小蜂对正常棕尾别麻蝇蛹的寄生率为90%～97%,寄生后蝇蛹的出蜂率为80%～87%,每蛹出蜂数为40只左右,雌蜂比90%左右,与对照相比差异亦无统计学意义。结论冷冻蝇蛹对丽蝇蛹集金小蜂的后代发育和品质均无显著影响。
- 张忠史卫峰叶恭银胡萃于爱莲
- 关键词：冷冻
- 2013～2014年山东省4株柯萨奇B4型分离株遗传分析被引量：3
- 2018年
- 尽管柯萨奇病毒B4（Coxsackievirus B4,CVB4）分离率不高,但是在我国引起儿童脑炎的病例屡屡报道。目前人们对CVB4基因组的遗传变异了解并不多,GenBank公共数据库仅仅存储有20几个CVB4全基因组序列,分离自我国的CVB4基因组序列不足10条。本研究对2013~2014年山东省分离的4株CVB4阳性样本进行高通量测序,测得其全基因组序列,利用Mega 5.1对CVB4型毒株全基因组及VP1片段进行系统发生及同源性分析,用RDP3和SimPlot 3.5.1软件进行基因重组分析。结果显示这4株病毒为柯萨奇病毒B4（Coxsackievirus B4,CVB4）型,全基因组序列长度分别为7 372bp、7 389bp、7 389bp和7 391bp,核苷酸同源性为97.1%~99.9%,氨基酸同源性为98.5%~99.9%。与2013年温州CVB4分离株CVB4/P11/2013/China（GenBank登录号：KP289433）分离株同源性最高,核苷酸及氨基酸同源性分别为97.1%~98.3%和98.6%~99.4%。对VP1基因进行系统发育树分析表明,VP1基因可划分成5个基因型,基因型内部序列距离小于15%,而基因型间距离均大于15%。另外,4株CVB4分离株VP1的进化关系较近,同近年来国内其他分离株单成一簇,属于基因型V分支。经RDP3和SimPlot 3.5.1软件分析发现,这四个CVB4分离株均发生了基因重组,分离株SDJN/CHN/2013可能发生了两次基因重组。综上,这4个CVB4分离株基因组高度相似,均位于基因型V分支,且基因组发生了基因重组。
- 王敏韦庆娟李娟江新泉张振杰童贻刚丁淑军王显军史卫峰
- 关键词：系统发育分析VP1基因重组
- 柯萨奇肠道病毒CVA12的荧光定量PCR检测试剂盒
- 本实用新型涉及一种柯萨奇肠道病毒CVA12的荧光定量PCR检测试剂盒，所述试剂盒使用方便，对于病毒CVA12可实现特异性检测，其特异性强、灵敏性高，临床上可快速检测且分型，实现一检定型的效果。本实用新型具有很强的临床实践...
- 史卫峰王敏张振杰李娟
- 文献传递
- 毛细管区带电泳法分离白花丹参中主要的水溶性活性成分被引量：9
- 2007年
- 为建立一种快速分离白花丹参水溶性有效成分的毛细管区带电泳体系,分别考察了缓冲液浓度、缓冲液pH、运行电压、检测波长对样品的分离度、迁移时间等因素的影响。最终优化的分离条件为:5mmol/L硼砂缓冲液(pH7.5);毛细管柱75μm×60.2cm,有效长度50cm,压力进样(3.45kPa×4s),27.5kV恒压分离,210nm波长下检测,柱温25℃。在优化的条件下,8min内使白花丹参样品中的原儿茶醛、丹参素、原儿茶酸组分达到完全基线分离。
- 崔英杰李玉琴史卫峰杨明峰赵晓民夏作理
- 关键词：毛细管区带电泳原儿茶醛丹参素原儿茶酸白花丹参
- 简单INDEL编码与其它空位编码方法的比较被引量：1
- 2006年
- 不同的系统发育重建算法以不同的方式编码空位,但是不同的编码方式对系统发育分析结果的影响并不清楚。介绍了一种新的空位编码方式———简单indel编码,并将它与将空位编码成丢失的数据和编码成第5性状作了比较。统计分析表明,简单indel编码的确比将空位编码成丢失的数据更有效,但是与将空位编码成第5性状相比两者结果差异不大。而且,随着空位含量的降低,简单indel编码发挥的作用也减少。
- 史卫峰黄大卫沈佐锐
- 关键词：空位
- 成虫期冷藏对丽蝇蛹集金小蜂雌蜂寿命和繁殖的影响被引量：6
- 2011年
- 目的观察成虫期冷藏对丽蝇蛹集金小蜂雌蜂寿命和繁殖能力的影响。方法考察羽化后不同时间的丽蝇蛹集金小蜂雌蜂在15℃冷藏不同时间后的寿命、寄生和繁殖能力。结果成虫期冷藏可延长丽蝇蛹集金小蜂雌蜂的成虫寿命,但随冷藏时间的延长,丽蝇蛹集金小蜂雌蜂的寄生能力和产卵能力均受到不同程度的负面影响,当冷藏时间不超过12d时,丽蝇蛹集金小蜂雌蜂的寄生和产卵能力均不受显著影响,而超过12d后,其产卵和寄生能力均呈线性下降趋势;冷藏前至冷藏后24d,雌蜂对棕尾别麻蝇蛹的寄生率由85%下降至35%,蝇蛹的平均出蜂数由33头/蛹下降至6头/蛹,而后代的雌蜂比和体长均不受影响。结论成虫期冷藏可延长丽蝇蛹集金小蜂雌蜂的寿命,但影响其繁殖能力。
- 任倩王瑞松沈忱于爱莲史卫峰万文菊李晓霞张忠
- 关键词：成虫冷藏繁殖能力
- H5N1禽流感病毒血凝素基因密码子的变异被引量：2
- 2008年
- 应用固定效应似然模型研究了作用于H5N1禽流感病毒血凝素基因的选择压力．研究发现，除2000年以外，1997—2007年，H5N1病毒的血凝素基因都受到正选择压力的作用．东南亚、中国香港和中国大陆的血凝素序列氨基酸多态性最复杂，并且具有相似的非同义突变模式．大部分地区的H5N1病毒血凝素基因的一些位点受到正选择压力的影响，并且其中一些位点在不同地区的病毒中具有不同的氨基酸模式．另外，正选择压力对分离自欧洲、非洲和俄罗斯以及不同宿主类型的H5N1病毒产生了不同的影响．一个位点只在取自人类的病毒中被发现受到正选择压力的影响．尽管一些受到正选择压力的位点的功能尚不清楚，但是本文的分析提供了H5N1禽流感病毒适应不同时间、地点和寄主的遗传证据．
- 史卫峰Mark J Gibbs张彦周庄东明顿爱社于广福杨娜娜Robert W Murphy朱朝东
- 关键词：H5N1禽流感病毒血凝素密码子
- BLASTALIGN在同源基因片段检索中的应用被引量：1
- 2007年
- 多序列比对程序的开发在生物信息学中是一个很活跃的研究领域。作为一种新诞生的多序列比对程序,BlastAlign利用blastn算法进行序列比对,并且采用空位替代比对结果中的高变区。目前,该程序主要用于多条基因序列的比对研究。本文则以获取膜翅目小蜂总科28SrDNAD2区基因片段为例,通过应用BlastAlign的序列比对过程,提供一种较为简便和有效的方法,实现从GenBank数据库中检索并筛选特定的同源基因序列,从而克服目前利用关键词或检索式进行检索所存在的局限性。
- 罗阿蓉史卫峰张彦周周宏宇乔慧杰朱朝东
- 关键词：GENBANK小蜂总科RDNA
- 一种同时检测多种A组人类肠道病毒的引物组合及其应用
- 本发明涉及一种同时检测多种A组人类肠道病毒的引物组合及其应用。该引物组合包括：引物对1—4，其序列分别如SEQ ID No.1和2、SEQ ID No.4和5、SEQ ID No.7和8、SEQ ID No.10和11；...
- 史卫峰王敏张振杰李娟
- 文献传递
