叶少菁
- 作品数：17 被引量：86H指数：6
- 供职机构：浙江大学医学院病原生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程文化科学更多>>
- 幽门螺杆菌全长cagA基因和霍乱毒素B亚单位基因的克隆与表达被引量：8
- 2002年
- 目的 构建表达幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白 (CagA)及粘膜免疫佐剂霍乱毒素B亚单位 (CTB)的重组质粒 ,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白。方法 用PCR方法从幽门螺杆菌扩增CagA基因片段 ,从霍乱弧菌扩增CTB基因片段 ,将它们转入原核载体质粒pGEMEX 1,在大肠杆菌DH5α中克隆 ,并在JM10 9DE3中表达。结果 重组质粒pGEMEX CTB的全长序列经分析与Gen Bank公布的序列相符 ;各表达蛋白经SDS PAGE分析 ,相对分子量与文献相符 ;重组蛋白经Westernblot检测有较强的抗原性。
- 方平楚周林福陈智叶少菁
- 关键词：幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白霍乱毒素B亚单位胃炎
- 单核细胞株在矽肺体外研究中的应用被引量：9
- 2000年
- 目的 探索具有肺泡巨噬细胞特性的人血单核细胞株 (THP 1细胞 )在矽肺发生机制体外研究中的应用。方法 观察二氧化硅 (SiO2 )刺激THP 1细胞或佛波酯 (PMA)诱导分化的THP 1细胞培养上清液对成纤维细胞 (CHL)增殖和核仁组成区相关的嗜银蛋白 (Ag NORs)形成、肺泡上皮细胞(CCL 6 4)迁移以及大鼠矽肺样病变发生的影响。同时对PMA诱导分化的THP 1细胞受SiO2 刺激的化学发光进行研究 ,并与PAM作相应的比较。结果 THP 1细胞受SiO2 刺激上清液能有效地促进CHL细胞增殖和Ag NORs颗粒均数增加、分散度增大 ,呈良好的剂量 反应关系 ,并和SiO2 的PAM毒性指数呈高度相关性 ,同时能明显抑制肺泡上皮细胞CCL 6 4的迁移 ,阻碍上皮损伤的修复。PAM和THP 1细胞的SiO2 刺激上清液可以引起大鼠肺矽结节样病变。PMA诱导分化的THP 1细胞和PAM受SiO2 刺激后化学发光反应增强 ,呈剂量 反应关系。结论 THP 1或PMA诱导分化的THP 1细胞在矽肺体外机制及矽肺相关肿瘤有关的细胞因子和氧自由基产生的研究中有广泛的应用前景。
- 毛国根叶少菁马海燕宋志芳方海林蔡剑陈苘
- 关键词：二氧化硅肺泡巨噬细胞单核白细胞矽肺
- 幽门螺杆菌CagA蛋白的纯化与鉴定被引量：3
- 2000年
- 目的 纯化幽门螺杆菌 (Hp)相对分子质量 (Mr)为 130× 10 3 (CagA)蛋白 ,为单抗及疫苗的研制打下一定基础。方法 用盐酸胍粗提、分子筛层析及凝胶洗脱法纯化Hp970 0 2株Mr 为 130× 10 3(CagA)蛋白并鉴定。用Westernblot方法分析 6 8例患者血清中Mr 为 130× 10 3 (CagA)蛋白的阳性率。结果 纯化蛋白Mr 为 130× 10 3 ,电泳纯 ,并保持良好的抗原性。有 43例患者血清能与纯化的Mr 为 130×10 3 (CagA)蛋白反应 ,其阳性率随着浅表性胃炎、萎缩性胃炎、消化性溃疡和胃癌的排列次序呈逐渐增高趋势。结论 Mr 为 130× 10 3 (CagA)蛋白与胃部疾病的严重性相关。
- 叶少菁方平楚厉朝龙
- 关键词：幽门螺杆菌胃疾病CAGA蛋白纯化
- 嗜银蛋白在矽肺纤维化过程中的意义被引量：5
- 1999年
- 目的探索ＳｉＯ２刺激ＴＨＰ１细胞（具有肺泡巨噬细胞特性的人血单核细胞株）上清液对中国仓鼠肺成纤维（ＣＨＬ）细胞核仁组成区相关的嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲｓ）形成及其增殖的关系。方法通过５个系列浓度（０、５０、１００、２００和５００μｇ／ｍｌ）的ＳｉＯ２刺激ＴＨＰ１细胞培养上清液作用于ＣＨＬ细胞，采用综合改良ＡｇＮＯＲｓ染色技术，观察其ＡｇＮＯＲｓ形成并计数；四唑盐（ＭＴＴ）比色法检测ＣＨＬ细胞的增殖。结果随ＳｉＯ２浓度增大，ＣＨＬ细胞ＡｇＮＯＲｓ颗粒均数、颗粒分散度以及ＭＴＴ分析Ａ５７０ｎｍ值均相应增大，呈良好的剂量反应关系，并和ＳｉＯ２尘的肺泡巨噬细胞（ＰＡＭ）的细胞毒性指数呈高度负相关（ｒ＝－０．９６８，Ｐ＜０．０１）。结论ＳｉＯ２刺激的ＴＨＰ１细胞上清液可以引起肺成纤维细胞ＡｇＮＯＲｓ含量的改变，并与成纤维细胞的增殖和ＳｉＯ２尘ＰＡＭ细胞毒性相一致。
- 毛国根叶少菁蔡剑张琪凤
- 关键词：矽肺肺纤维化嗜银蛋白THP-1细胞肿瘤
- SiO_2刺激肺泡上皮细胞间隙连接功能下调的研究被引量：4
- 2002年
- 目的 探索矽肺发病过程中 ,SiO2 对肺泡上皮细胞增殖和间隙连接通讯功能 (GJIC)的影响。方法 不同剂量的SiO2 刺激SD大鼠肺泡巨噬细胞 (PAM)培养上清液 ,作用于正常貂肺泡上皮细胞株CCL 6 4细胞。用四唑盐 (MTT)法测定CCL 6 4细胞增殖 (以A570nm值表示 ) ;采用激光扫描共焦显微镜 (LSCM ,LeicaTCSSP)用荧光光漂白后再恢复 (FRAP)技术测定CCL 6 4细胞GJIC功能 [以荧光扩散率K(× 10 -3 /s) ]表示。结果 体积分数为 5 %的SiO2 刺激的PAM上清液能诱导CCL 6 4细胞增殖 (F =9.6 79,P <0 .0 1) ,并抑制CCL 6 4细胞间GJIC功能 (F =2 0 .5 87,P <0 .0 1)。在 5 0～ 5 0 0 μg/mlSiO2 范围内 ,随SiO2 浓度增加 ,两者均呈良好的剂量依赖性关系 (GJIC :r =- 0 .943,P <0 .0 5 ;增殖 :r=0 .891,P <0 .0 5 )。结论 SiO2 刺激PAM培养上清液可以抑制肺泡上皮细胞的GJIC功能 ,并诱导细胞增殖。推论肺泡上皮细胞GJIC功能下调在SiO2 介导的肺泡上皮组织损伤中有重要的作用。
- 毛国根叶少菁曾群力
- 关键词：SIO2肺泡上皮细胞矽肺
- 二氧化硅致肺泡上皮细胞连接蛋白43定位的变化被引量：3
- 2002年
- 目的 研究SiO2 刺激肺泡巨噬细胞 (PAM)上清液对肺泡上皮细胞连接蛋白 43(Cx43)定位的影响 ,以深入探索SiO2 抑制肺泡上皮细胞间隙连接通讯 (GJIC)的作用水平。方法 不同剂量的SiO2 刺激大鼠 (SD)PAM培养上清液作用于正常貂肺泡上皮细胞株CCL 64细胞 [在体积分数为 2 %的小牛血清培养基 (RPMI1 640 )中加体积分数为 5 %的不同剂量的SiO2 刺激PAM的上清液 ]。采用间接免疫荧光的CCL 64细胞化学法和激光共聚焦扫描显微镜 (LCSM ,LeicaTCSSP)进行Cx43定位的测定。结果 正常培养的CCL 64相邻细胞连接处有明亮的斑片状标记 ,聚集分布、连接成线 ;SiO2 刺激PAM培养上清液作用的CCL 64细胞连接处标记斑点逐渐减少 ,Cx43标记斑点出现在胞浆内 ,呈无特异性定位状态 ,但随着SiO2 剂量的增加 ,细胞内大多数的Cx43标记斑点向细胞核聚集。结论 SiO2 刺激PAM培养上清液可以改变肺泡上皮细胞Cx43的定位。推测SiO2 抑制肺泡上皮细胞GJIC功能可能与Cx43的内移有关。
- 毛国根叶少菁曾群力
- 关键词：二氧化硅肺泡上皮细胞连接蛋白43共焦显微镜
- 浙江地区幽门螺杆菌cagA、vacA、iceA基因型别分析
- 2003年
- 尤建飞方平楚叶少菁茅海燕周林福邱翔
- 关键词：幽门螺杆菌CAGAVACAICEA基因型别HP菌株
- 幽门螺杆菌感染与胃上皮细胞间隙连接功能的体外研究被引量：9
- 2005年
- 目的 探讨幽门螺杆菌(H.pylon,Hp)对胃上皮细胞间隙连接通讯(GJIC)功能的影响及其发病机制。方法 应用Hp(包括Cag A+和Cag A-株)全菌和超声粉碎上清分别作用胃上皮细胞株SGC- 790 1。采用激光扫描共焦显微镜(L SCM,L eica TCS SP)以荧光光漂白后再恢复(FRAP)技术测定SGC- 790 1细胞GJIC功能(以荧光传递速率K表示,×10 - 3/ s)。结果 Cag A+和Cag A- Hp株均下调SGC- 790 1细胞GJIC功能(Cag A+ :F=5 7.98;Ca-g A- :F=2 9.5 9,P<0 .0 1) ;且Cag A+ 与Cag A- Hp相比前者更显著下调胃上皮细胞GJIC功能(全菌:t=13.86 ,P<0 .0 1;超声粉碎上清:t=11.87,P<0 .0 1)。结论 Cag A+ 比Cag A- Hp显著抑制胃上皮细胞的GJIC功能,提示其在胃癌发生中起重要作用。
- 陶然方平楚叶少菁姜云水邢美圆
- 幽门螺杆菌CagA基因及其与致病性关系的研究进展被引量：1
- 1999年
- 自本世纪８０年代初，Ｗａｒｒｅｎ和Ｍａｒｓｈａｌ［１，２］最先从胃炎及胃溃疡患者的胃粘膜活检标本中发现并分离到幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，ＨＰ）以来，开创了感染与胃部疾病发生有关的新领域。随后，大量研究资料确证ＨＰ与慢性胃炎、消...
- 叶少菁方平楚
- 关键词：幽门螺杆菌CAGA基因
- 二氧化硅致肺成纤维细胞连接蛋白Cx43定位的改变被引量：4
- 2001年
- 目的 研究SiO2 刺激肺泡巨噬细胞 (PAM)培养基上清液对肺成纤维细胞连接蛋白Cx43定位的影响 ,以深入探索SiO2 抑制肺成纤维细胞间隙连接通讯 (GJIC)的作用水平。方法 用0～ 5 0 0 μg/mlSiO2 刺激PAM和佛波酯 (TPA)诱导分化的THP 1(TPA primedTHP 1,pTHP 1)细胞 (具有PAM特性的人血单核细胞株 )的培养上清液对培养的中国仓鼠肺成纤维细胞 (CHL)作用 2 4h ,采用间接免疫荧光细胞化学法和激光共聚焦扫描显微镜 (LCSM)进行连接蛋白Cx43定位的测定。结果 正常对照组相邻细胞连接处有明亮的斑片状标记 ,聚集分布连接成线 ;SiO2 刺激PAM和pTHP 1细胞培养上清液作用的CHL细胞连接处标记斑点逐渐减少 ,Cx43蛋白标记斑点出现在胞浆内 ,呈无特异性定位状态 ;随着SiO2 剂量的增加 ,细胞内Cx43蛋白标记斑点向细胞核聚集。结论 SiO2 刺激PAM和pTHP 1细胞培养上清液可以改变肺成纤维细胞Cx43蛋白的定位。
- 毛国根曾群力叶少菁
- 关键词：连接蛋白CX43激光共聚焦显微镜肺成纤维细胞职业卫生二氧化硅
