孟清
- 作品数：73 被引量：55H指数：4
- 供职机构：东华大学生物科学与技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 断裂蛋白质内含子的剪接机制、起源和进化被引量：4
- 2008年
- 蛋白质内含子(intein)是具有自我催化活性的蛋白质.翻译后,通过蛋白质剪接从蛋白质前体中去掉,并以肽键连接两侧蛋白质外显子(extein)形成成熟蛋白质.断裂蛋白质内含子(splitintein)在蛋白质内含子中部区域特定位点发生断裂,形成N端片段和C端片段,分别由基因组上相距较远的两个基因编码.现在已知,它仅分布于蓝细菌和古细菌中.断裂蛋白质内含子的N端片段和C端片段通过非共价键(如静电作用)相互识别,重建催化活性中心,介导蛋白质反式剪接.断裂蛋白质内含子的发现进一步深化了人们对基因表达和蛋白质翻译后成熟过程复杂性的认识,而且它在蛋白质工程、蛋白质药物开发和蛋白质结构与功能研究等方面有非常广泛的应用.本文试图综述断裂蛋白质内含子的分布、结构特征和剪接机制,并分析其可能的起源和进化途径.
- 邵爱云孟清
- 关键词：蛋白质内含子蛋白质反式剪接进化
- 一种大腹园蛛包卵丝蛋白全长基因及其制备方法
- 本发明涉及一种大腹园蛛包卵丝蛋白全长基因及其制备方法，所述基因序列如SEQ ID NO.1所示。制备方法包括：利用简并PCR的方法扩增出部分包卵丝蛋白基因的NT以及CT，用锚定PCR将NT和CT补全，根据测序得到的序列来...
- 温睿孟清
- 文献传递
- 大腹园蛛重组嵌合蛛丝蛋白:一种高分子量的生物材料
- 2022年
- 基于大腹园蛛的两种蛛丝基因构建三部分嵌合的重组蛛丝蛋白iN7RC,在大肠杆菌中成功表达,通过纯化得到产量为34 mg/L的高纯度分子质量高达165.2 ku的重组蛛丝蛋白。不同pH值下的圆二色谱分析显示iN7RC蛋白质的二级结构组分中的α-helix结构占比随着pH值的降低明显减少。通过手工牵拉的方式获得具有高强度和高延展性的重组蛛丝纤维,为蛛丝仿生材料的广泛应用奠定基础。
- 贾秋品孟清
- 关键词：大腹园蛛蛋白表达
- 一种重组蛛丝蛋白的制备方法
- 本发明涉及一种重组蛛丝蛋白的制备方法，以大腹园蛛次壶腹腺丝的全长编码基因和梨状腺丝完整重复区为模板，采用融合PCR技术进行拼接，并与pET28a载体连接，构建重组质量，转入BL21中进行表达，使用变性纯化手段，最终获得重...
- 吴忠笏孟清
- 利用搭桥PCR技术对蛋白质内含子HP进行改造(英文)被引量：1
- 2012年
- [目的]利用搭桥PCR技术对蛋白质内含子HP进行改造。[方法]根据搭桥PCR中寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板的原则设计多对引物,通过多次PCR扩增获得目的基因片段,进而实现对蛋白质内含子HP在基因水平上进行多个位点同时定点突变和添加Linker。[结果]搭桥PCR产物克隆经DNA测序分析,证明蛋白质内含子HP内部的4个半胱氨酸成功突变成丝氨酸,几个PCR前体片段也无缝的融合成HP基因片段,而且没有引进任何其他突变;经DNA测序,46bp的DNALinker成功的插入到设计好的HP基因序列中,且没有任何碱基突变和错配。[结论]该研究不仅实现了对蛋白质内含子HP的快速改造,而且扩大了搭桥PCR的应用范围,同时也为蛋白质内含子的基础改造提供了低成本、简捷、高效的方法。
- 李佳林瑛张秀丽扬子江贾秋品孟清
- 关键词：引物设计
- Ⅱ组内含子(Group Ⅱ Introns)的分布及多样性被引量：2
- 2007年
- Ⅱ组内含子(groupⅡintron)存在于原生生物、真菌、藻类、植物细胞器以及细菌和古细菌基因组中.在体内,Ⅱ组内含子可通过两步连续的转酯反应从前体RNA中自剪接,并连接两侧外显子.许多Ⅱ组内含子的剪接反应是由蛋白质辅助完成的,这种蛋白质有的是由内含子编码,有的是由宿主基因编码.Ⅱ组内含子能够有效地归巢进入无内含子的等位基因,也能够以低频率逆转座进入非等位基因.转座过程依赖内含子RNA和内含子编码的蛋白质(内切核酸酶活性和逆转录酶活性).本论文在总结Ⅱ组内含子最新研究成果的基础上,分析Ⅱ组内含子可能的起源和进化途径.
- 周海燕邵爱云孟清
- 关键词：逆转座子RNA剪接逆转座
- 大腹圆蛛Fosmid文库的构建及MaSp基因筛选方法的探讨被引量：3
- 2010年
- 介绍了构建大腹圆蛛Fosmid基因组文库及牵引丝蛋白(MaSp)基因克隆筛选的全过程.采用改良CTAB法提取大片段基因组DNA,通过自主构建的电洗脱核酸回收装置分离回收30～40kbDNA片段,经补平磷酸化、与pCC2FOS载体连接、体外包装和转染EPI300TM-T1R,首次构建了无偏向性的大腹圆蛛Fosmid文库,其滴度为4.5×105cfu/mL,覆盖基因组倍数为10.以α-32P标记寡核苷酸探针对文库进行初步筛选,获得含MaSp基因的12个阳性克隆.该文库符合Fosmid文库的品质要求,为进一步筛选并研究大腹圆蛛MaSp基因序列奠定了基础.
- 张云龙陈格飞陈国亮林森珠张蒙恩孟清
- 关键词：大腹圆蛛FOSMID文库
- 自我剪接内含子结构与剪接的关系
- 2009年
- 自我剪接内含子是指具有催化活性的RNA分子,可介导自身的剪切和两侧外显子的连接。自我剪接内含子包括Ⅰ型内含子和Ⅱ型内含子两类,主要存在于原生生物、真菌、藻类、植物细胞器以及细菌和古细菌(Ⅱ型内含子)基因组中。尽管核苷酸序列保守性很低,但两类自我剪接内含子均能分别形成不同的保守二级结构,且它们都可通过两步连续的转酯反应完成剪接。但由于其结构存在较大差异,导致其剪接机制也各不相同。对其结构与剪接关系的深入研究将有助于进一步探索自我剪接内含子在生物体内的功能、起源和进化。
- 张相萍林瑛屈艾孟清
- 关键词：ORF剪接
- 应用突变的断裂蛋白质内含子标记蛋白质的N端和C端
- 戴旭东孟清
- 关键词：蛋白质剪接荧光基团
- 一种重复模块基因拼接方法
- 本发明涉及一种重复模块基因拼接方法，包括：(1)利用两条PCR引物对目的基因进行扩增；(2)双酶切PCR产物和质粒pET-LIC，片段与载体相连接，转化感受态细胞后得到质粒pET-TS；(3)双酶切质粒pET-TS并回收...
- 孟清李梦梦施长华
