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环磷酰胺对不同发育时期睾丸生精细胞毒性损伤的动物实验研究被引量：16: 2006年; 目的探讨抗肿瘤药物所致生精细胞损害与年龄的关系,为性腺保护剂的运用寻找理论依据。方法将环磷酰胺分别作用于处于不同发育时期的1周龄、3周龄、5周龄、9周龄雄性大鼠,应用HE染色法、TUNEL法和免疫组化法检测急性期生精细胞凋亡,bcl-2蛋白表达,细胞增殖能力变化及远期组织学损害。结果用药后24h,除1周龄组外,各实验组生精细胞显著凋亡(P<0.01),bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.01),生精细胞S期所占的比例显著下降(P<0.01)。用药后9周,除1周龄组外,各实验组曲细精管面积、直径、生精上皮细胞计数、Johnsen’s评分均显著低于相应对照组(P<0.01),并随年龄增大损害有增加趋势。结论环磷酰胺可诱导生精细胞增殖启动阶段以后的生精细胞显著凋亡,且伴有bcl-2明显下调。并可显著抑制精原细胞和细线前期精母细胞增殖。远期组织学改变年龄越小所受的损害越小,提示为使睾丸免受抗肿瘤药物的伤害而采用性激素使生精细胞增殖分化处于不分化状态是有效的防护方法之一。; 岳丽琴李旭良魏光辉林涛何大维刘俊宏陈志远; 关键词：环磷酰胺生精上皮

B族链球菌表面免疫原性蛋白的免疫原性及其抗体保护功能被引量：2: 2007年; 目的制备B族链球菌(GBS)表面免疫原性蛋白(Sip),研究其免疫原性及抗体保护功能,为GBS蛋白疫苗研究奠定基础。方法采用基因重组技术构建表达载体,并表达GP-Sip融合蛋白。用pET-Sip融合蛋白免疫小鼠,并免疫家兔制备多克隆抗体。Western blot检测GP-Sip蛋白特异性,ELISA检测家兔及小鼠血清中特异性抗体水平,调理吞噬试验检测Sip抗血清的功能。结果表达载体经酶切和测序证明构建正确,GP-Sip蛋白在大肠杆菌中以可溶形式表达,纯化后纯度可达90%以上。Western blot显示GP-Sip蛋白可与pET-Sip蛋白的免疫血清发生免疫反应。ELISA显示Sip可诱发小鼠产生高水平的IgG抗体。Sip抗血清具有明显地促进吞噬细胞对GBS的吞噬作用。结论已成功构建GP-Sip表达载体,并高效表达了Sip。该蛋白具有良好的免疫原性,其抗体具有良好保护功能,可作为GBS蛋白疫苗成分或荚膜多糖疫苗载体成分。; 于丽华李慎涛岳丽琴王爱华王冠王咏红杨永弘沈叙庄; 关键词：B族链球菌免疫原性

Omenn综合征一例被引量：7: 2001年; 赵晓东李秋王墨李永柏岳丽琴; 关键词：原发性免疫缺陷病综合征综合病症嗜酸性粒细胞

环磷酰胺对不同发育时期睾丸生精细胞毒性损伤的动物实验研究: 目的:通过CTX对不同发育时期睾丸生精细胞毒性损伤程度的研究,探讨是否年龄越小抗肿瘤药物对生精细胞的损害越轻,从而为性腺保护剂的运用寻找理论依据. 结论:(1)正常睾丸生精细胞的生理性凋亡:未发育睾丸罕见凋亡发生,早期精...; 岳丽琴; 关键词：CTX 生精细胞毒性损害睾丸; 文献传递

Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白基因的克隆和原核表达被引量：4: 2006年; 目的重组表达Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白(Surfaceimmunogenicprotein,SIP)基因,为进一步免疫学研究提供目标蛋白。方法用PCR的方法从GBSⅡ型标准株的基因组DNA中扩增出SIP基因,用T/A克隆法将其插入pMD18T载体,构建原核表达载体pET32aSIP,用BL21(DE3)/pET系统表达TrixSIP融合蛋白,SDSPAGE和质谱分析鉴定表达产物,并对表达蛋白进行初步纯化。结果PCR扩增产物经测序,证实与GenBank中Ⅰa/c型GBS的SIP的基因序列同源性为99%。SDSPAGE显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET32aSIP总蛋白中出现一条相对分子质量为66000的新蛋白带。质谱分析和蛋白质库的比较证实其为B族链球菌表面免疫相关蛋白(SIP)的可能性分数为74。结论已成功表达并初步纯化SIP,为SIP在细菌致病中的作用研究以及相关疫苗的制备奠定了基础。; 岳丽琴沈叙庄张华捷王咏红俞桑洁杨永弘; 关键词：B族链球菌原核表达克隆

黏膜免疫佐剂及抗原呈递系统研究现状被引量：2: 2005年; 经济、稳定、高效的黏膜疫苗是目前疫苗研究的新方向 ,其中 ,黏膜免疫佐剂及抗原呈递系统是黏膜疫苗研究的重点之一。; 岳丽琴沈叙庄杨永弘; 关键词：黏膜疫苗免疫佐剂

B族链球菌C5a肽酶蛋白表位的克隆、表达和免疫学分析被引量：4: 2006年; 目的应用生物信息学方法预测B族链球菌C5a肽酶蛋白表位,结合基因工程手段进行表位重组、表达和免疫原性分析。方法用预测程序ProPred和ANTIGENIC预测B族链球菌C5a肽酶蛋白的表位,应用PCR技术扩增出编码该表位基因片段,克隆PCR产物构建重组质粒,测序验证。在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达融合蛋白。表达的蛋白经质谱分析和Western blot鉴定。纯化该融合蛋白并免疫C57／BL小鼠,萃取GBS表面蛋白,双向琼脂扩散试验检测抗体水平。结果在SCPB中预测到1个既具有MHC结合肽特性又具有B细胞表位特征的肽段。重组和表达了这一肽段,质谱得出与SCPB蛋白的相似性分数为79,Western blot证实能与抗SCPB的抗体反应,纯化后融合蛋白纯度>90％。动物实验证实融合蛋白能产生特异性的抗GBS抗体。结论重组表位具有一定免疫原性,为相关蛋白的毒力机制研究和亚单位疫苗等方面的研究打下了良好的基础。; 岳丽琴沈叙庄周育森林粱王咏红于丽华杨永弘; 关键词：抗原表位融合蛋白表达免疫原性

重组B族链球菌表面蛋白SCPB和SIP的表达及免疫原性研究: B族链球菌(GroupBStreptococcus，GBS)寄生于育龄妇女的泌尿生殖道，主要引起围产期孕妇和新生儿的侵袭性感染，是新生儿的主要死因之一。最近的研究显示新生儿GBS感染所致的死亡率仍然居高不下，制备安全而有...; 岳丽琴; 关键词：B族链球菌重组蛋白侵袭性感染; 文献传递

B族链球菌表面蛋白Sip的制备及其免疫原性的研究被引量：4: 2007年; 20世纪70年代以来，B族链球菌（Group B Streptococcus，GBs）成为引起新生儿感染的首位原因。疫苗是预防GBS疾病简便有效的方法，传统的荚膜多糖疫苗及单一的荚膜多糖结合疫苗因其保护作用范围有限而使其应用受到限制。用GBS表面保守的蛋白作为疫苗成分可能会对多种血清型GBS的感染提供保护作用，因此引起人们的关注。; 于丽华李慎涛岳丽琴王爱华王冠王咏红杨永弘沈叙庄; 关键词：B族链球菌表面蛋白 STREPTOCOCCUS 免疫原性 SIP 多糖结合疫苗

B族链球菌C5a肽酶表位的预测、分段表达及其免疫原性被引量：3: 2010年; 目的应用生物信息学方法预测B族链球菌C5a肽酶蛋白(SCPB)的表位,分段表达其中4个功能活性区域,并分析其免疫原性。方法用预测程序ProPred和ANTIGENIC预测SCPB的表位;分别构建C5a肽酶4个目的片段的重组表达质粒,经酶切测序正确后,转化E. coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白的表达形式及表达量;并经镍柱亲和层析纯化,纯化的重组蛋白进行蛋白质谱分析和Western blot分析后,皮下免疫小鼠,ELISA检测小鼠血清抗体水平。结果经预测,SCPB含1个既可结合MHC又具有B细胞表位特征的肽段。构建的4个重组表达质粒经酶切及测序鉴定正确,目的蛋白主要以可溶性形式表达,表达量约占菌体总蛋白的30%～70%。纯化的重组蛋白纯度可达90%,质谱分析表明与SCPB的相似性很高;Western blot分析表明,可与兔抗全长SCPB多克隆抗体反应。重组F1、FE、Fn蛋白免疫小鼠血清抗体滴度较高,三者差异无统计学意义;F2a蛋白抗体滴度最低,与F1、FE和Fn蛋白差异有统计学意义。结论已成功构建并高效表达了SCPB的4个功能活性区域;Fn是重要的免疫优势表位功能区;本文为B族链球菌毒力机制的研究及亚单位蛋白疫苗的研制奠定了基础。; 岳丽琴周育森张庶民杨永弘沈叙庄; 关键词：B族链球菌表位免疫原性

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