应燕玲
- 作品数：66 被引量：107H指数：7
- 供职机构：浙江省血液中心更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学理学经济管理更多>>
- 一例Bw亚型的糖基转移酶等位基因鉴定及蛋白结构分析被引量：3
- 2021年
- 目的对1例Bw亚型个体进行分子遗传学及蛋白结构分析。方法采用血清学技术进行红细胞表面抗原和血清中抗体的测定,并用PCR-基于序列的分型(PCR-sequence-based typing,PCR-SBT)方法进行ABO基因的全编码区序列和第1内含子区红系特异性调控元件的分析。进一步对存在突变位点的第5~7外显子扩增片段进行T-A克隆分离单倍体和序列验证分析。应用Pymol软件对突变蛋白进行3D结构的模拟,分析氨基酸残基的变化对蛋白结构稳定性的影响。结果该样本血清学表现为B抗原减弱,血清中含有抗-B抗体。ABO基因全编码区测序初步确定其基因型为ABO*B.01/ABO*O.01.01伴有c.734C/T的杂合突变。第1内含子红系特异性调控元件区碱基序列无异常。通过单倍体克隆分离,确定突变位点c.734T位于ABO*B.01等位基因链,另一个等位基因为ABO*O.01.01。该突变将B糖基转移酶活性中心245位Thr置换为Ile。蛋白3D结构的模拟分析发现氨基酸置换后,与之结合的残基未发生改变而连接的氢键距离发生变化,同时增加了与远距离水分子之间的连接。结论B糖基转移酶基因c.734C>T突变导致酶活性中心氨基酸置换,影响了突变B糖基转移酶蛋白稳定性,引起酶活性减弱,从而产生了Bw变异型。
- 应燕玲洪小珍张晶晶许先国何吉朱发明
- 关键词：糖基转移酶基因变异蛋白结构
- 参加ISBT第15届血小板免疫学研讨会质控项目结果分析
- 目的国际输血协会(ISBT)血小板免疫学研讨会通过发放血小板免疫血清学和基因分型样本,评价各国参与实验室在血小板免疫学和基因分型方面的研究检测能力。方法本届研讨会共发放4组血小板质控品:1)2份血浆,用于血小板GPⅡb/...
- 许先国刘瑛应燕玲洪小珍朱发明吕杭军严力行
- 一种同步检测5个红细胞血型系统12个抗原的基因分型方法及试剂
- 快速、准确的一种同步检测5个红细胞血型系统12个抗原的基因分型方法，包括步骤：(1)制备基因分型样本的人基因组DNA；(2)提供扩增引物，用聚合酶链反应同步扩增所述基因组DNA中5个血型系统12个抗原对应的基因序列；(3...
- 朱发明许先国应燕玲洪小珍陈舒马开荣何吉
- 文献传递
- 一种人红细胞血型抗原系统基因分型的多重PCR方法、引物及试剂盒
- 本发明提供一种人红细胞血型抗原系统基因分型的多重PCR‑SBT方法、引物及试剂盒。所述多重PCR‑SBT方法对24个红细胞血型系统基因在同一多重扩增反应体系、反应程序和测序反应下进行分型，具体包括以下步骤：(1)制备人基...
- 朱发明应燕玲张晶晶洪小珍何吉
- 文献传递
- MICB基因的克隆及其在原核系统中的表达
- 应燕玲陶苏丹陈男英和艳敏何吉朱发明吕杭军
- ABO血型新等位基因Ael08的分子生物学研究被引量：14
- 2011年
- 目的研究ABO新等位基因Ael08的分子机制。方法利用单克隆抗体检测先证者标本红细胞ABO血型抗原，标准A、B、O红细胞检测血清中的ABO抗体，吸收放散试验检测红细胞上微量抗原；采用PCR技术扩增先证者ABO基因的第5～7外显子序列，PCR产物经双酶切后直接测序分析6和7外显子；扩增产物经TOPOTA克隆到质粒载体中获得单链，对所得克隆作ABO基因第6、7外显子双向测序分析；家系调查采集先证者父亲和哥哥的标本作血型血清学试验和ABO基因第6和7外显子直接测序分析。结果先证者红细胞上表达很弱的A抗原，只有通过吸收放散才能有效检出，同时其血浆中存在较强的抗-B和较弱的抗-A；直接测序分析发现：6号外显子第261位缺失杂合，7号外显子第297位A／G、467C／T、646T／A、681G／A、771C／T、829G／A、804insG／G杂合；克隆测序发现1个为常见的002等位基因，另1个为1种新的等位基因（已被dRBCNCBI命名为Ae抑8），与A102比较，Ael08在第804位碱基处插入G，这导致氨基酸第268位后阅读框架发生改变，编码产物比正常A1转移酶多37个氨基酸。家系调查显示：先证者Ael08等位基因从父亲遗传所得。结论发现1个ABO新等位基因Ael08，α-1，3-N．乙酰半乳糖胺基转移酶基因（A基因）第804位碱基处插入G突变导致产生Ael表型。
- 吕杭军洪小珍应燕玲许先国朱发明严力行
- 关键词：ABO基因抗-A
- 一例ABO血型系统B抗原减弱表达的分子机制被引量：18
- 2011年
- 目的研究1例B抗原减弱献血者的血清学特性和抗原减弱的分子机制。方法应用单克隆抗体检测献血者红细胞ABO血型抗原，标准A、B、O红细胞检测其血清中的ABO抗体，并检测其血清转移酶活性。采用聚合酶链反应技术扩增ABO基因全部外显子序列和5′端非编码区序列并进行测序分析，应用逆转录-PCR和克隆测序技术分析献血者ABO cDNA转录剪接情况，采用重亚硫酸盐转化直接测序法分析ABO基因启动子区CpG岛甲基化水平。结果献血者血清学表现为B抗原明显减弱，血清中无抗-B抗体，B转移酶活性降低。基因型为B101／O01，全部外显子序列和拼接接受位点碱基无任何突变。5′端非编码区序列多态性符合B101／O01的特征，启动子、增强子、负调控序列和微卫星重复序列未发现异常。献血者存在ABO基因全长cDNA转录本，未发现新的转录剪接体。与正常对照标本比较，在启动子区CpG岛内发现启动子附近有多个特异性半甲基化位点。结论启动子区CpG岛中的甲基化位点可能是引起B抗原弱表达的原因。
- 应燕玲陶苏丹和艳敏许先国朱发明吕杭军严力行
- 关键词：ABO基因甲基化表观遗传
- 血小板膜糖蛋白GPIV与血小板输注无效相关性的研究
- 刘瑛洪小珍许先国应燕玲蓝小飞马开荣朱发明严力行
- 该项目首先采用流式细胞术调查浙江地区人群中血小板CD36抗原缺失的频率，然后对临床送检的血小板输注无效样本进行了血小板相关抗体的血清学筛查和鉴定，获取血小板输注无效与GPIV抗体的相关性数据，最后利用PCR-SBT方法对...
- 关键词：
- 关键词：输注治疗血小板制品
- 红细胞血型系统稀有血型高通量基因筛选方法的建立及其应用
- 洪小珍朱发明陈舒应燕玲马开荣蓝小飞刘瑛严力行
- 红细胞血型系统在输血医学、器官移植、法医学的诊断、亲子鉴定等方面有重要意义，新近国际上提出根据红细胞血型基因型匹配选择合适的供者，以提高血液相合的程度，保证血液安全。要实现红细胞血型基因诊断和供受者基因型数字匹配，需要建...
- 关键词：
- 关键词：红细胞血型系统临床输血
- 浙江人群血小板供者库中HPA相关的膜糖蛋白基因多态性研究
- 目的建立血小板供者HPA分型数据库以帮助产生抗体的患者进行有效的血小板输注。方法采集750名浙江人群血小板献血者血样,以PCR-SBT法进行HPA-1-17w系统的基因分型,其中5%的样本同时采用PCR-SSP法进行HP...
- 刘瑛许先国应燕玲洪小珍朱发明吕杭军严力行
