廖华
- 作品数：12 被引量：95H指数：5
- 供职机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生电气工程更多>>
- 线粒体融合素基因2突变体Mfn2-1A抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖及机制研究被引量：5
- 2012年
- 目的:研究线粒体融合素基因2(Mfn2)的突变体片段Mfn2-1A,对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞的增殖抑制作用,并进一步探讨相关作用机制。方法:用已构建的重组腺病毒Adv-Mfn2-1A感染大鼠血管平滑肌细胞,利用细胞计数、四甲基偶氮唑盐比色法检测血管平滑肌细胞增殖,流式细胞仪检测细胞生长周期,蛋白免疫印迹法分析Mfn2-1A对信号通路Mek-Erk1/2蛋白表达水平的影响。结果:重组腺病毒Adv-Mfn2-1A感染平滑肌细胞能正常表达相应蛋白;转染Adv-Mfn2-1A后能抑制平滑肌细胞增殖(P<0.05),第3天开始效果明显;Adv-Mfn2-1A较Adv-Mfn2作用效果更显著(P<0.05);转染Adv-Mfn2-1A和Adv-Mfn2后阻滞于G0/G1期的细胞明显增多,转染Mfn2-1A后阻滞在G0/G1期细胞达到(77.74±3.67)%;Mfn2-1A可降低平滑肌细胞中磷酸化Erk1/2蛋白的表达,效果比Mfn2更明显(P<0.05)。结论:Mfn2基因突变体片段1A可明显抑制血管平滑肌增殖,使细胞阻滞在G0/G1期,其机制与抑制Mek-Erk1/2信号通路有关。
- 范玉璟廖华陈光慧郭小梅
- 关键词：细胞增殖血管平滑肌细胞
- 腺病毒介导的线粒体融合素基因-2诱导大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞凋亡被引量：10
- 2006年
- 目的研究腺病毒介导的线粒体融合素基因2(mitofusin2gene,Mfn2)对大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMCs)凋亡的影响。方法建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,用携带大鼠Mfn2基因(rMfn2)的重组腺病毒Adv rMfn2GFP和含有绿色荧光蛋白基因的对照腺病毒Adv GFP分别感染球囊损伤动脉段,以磷酸缓冲液(PBS)作为未感染对照组,假手术组作为正常对照组,采用免疫组织化学方法检测外源基因表达水平;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞;Image Pro图像分析系统进行血管定量组织形态学分析。结果病毒感染后5d,免疫组织化学证实Adv rMfn2GFP组Mfn2蛋白表达水平明显;TUNEL染色显示,Adv rMfn2GFP组的VSMCs凋亡率明显高于PBS组和Adv GFP组,假手术组未见TUNEL阳性VSMCs(n=10,P<0.01);感染后21d,Adv rMfn2GFP组的血管内膜面积及内膜中膜面积比明显低于对照组(n=10,P<0.01)。结论高表达Mfn2基因可诱导大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞凋亡。
- 廖华曹文静陈莉莉陈光慧郭小梅
- 关键词：线粒体融合素基因-2血管平滑肌细胞凋亡腺病毒科
- 基于IEC 61131--3的伺服驱动器开发研究
- 目前的伺服驱动器多数采用DSP芯片或者ARM芯片进行C语言程序开发,平台依赖性较高,且由于软件固化的原因,用户基本不能再对伺服驱动器进行二次开发.IEC 61131-3标准和软PLC技术得到广泛研究和应用,将IEC 61...
- 廖华
- 关键词：伺服驱动器IEC61131-3微处理器矢量控制速度环
- 成年大鼠心肌细胞分离方法的改良被引量：14
- 2009年
- 背景:目前多采用酶解法分离成年大鼠心肌细胞,但在灌流装置、灌流液体和灌流方法等方面的差异较大,且多以单个细胞的急性分离为目的,仅适于进行电生理研究。目的:建立稳定的改良成年SD大鼠心肌细胞分离方法,使之适于进行原代培养和研究。设计、时间及地点:细胞学体外实验,于2008-03/09在华中科技大学同济医学院附属同济医院分子心脏病中心完成。材料:8～10周龄雄性SD大鼠30只,由同济医学院实验动物中心提供,Ⅱ型胶原酶、蛋白酶和不含脂肪酸的牛血清白蛋白分别为美国Worthington公司、美国Sigma公司和德国Merck公司产品。方法:SD大鼠麻醉后,快速取出心脏,采用改良的Langendorff灌流装置行主动脉逆行灌注,无钙Krebs-Henseleit缓冲液(KH液)非循环灌流4min,0.6g/LWorthington2型胶原酶联合0.03g/L蛋白酶消化约15min,剪下心室组织于消化液和10g/L牛血清白蛋白的混合液中,剪碎后于37℃振摇孵育10min,200μm尼龙网过滤,500g离心1min,梯度复钙,自然沉降。主要观察指标:心肌细胞的形态、活力和产量。结果:复钙后的杆状存活心肌细胞得率为(73±5.6)%(n=30),其中90%以上的杆状心肌无明显搏动,横纹清晰。每只大鼠心脏的平均存活心肌细胞产量为(4.2±0.4)×106。结论:经过改良的Langendorff逆行主动脉灌流酶解法分离成年大鼠心肌细胞,可稳定获得高比例的存活心肌细胞并用于原代培养和细胞/分子生物学研究。
- 廖华糜涛涂志业陈莉莉郭小梅
- 关键词：心肌细胞细胞分离细胞培养
- 慢性心力衰竭诊断与治疗新进展被引量：48
- 2011年
- 慢性心力衰竭作为一种进展性临床综合征,严重威胁患者的生命,也给整个社会带来了沉重的经济负担。近年来,随着研究的不断深入,针对衰竭心肌生物学性质的新的诊断方法和治疗手段不断涌现。现结合近年来的循证医学证据和国内外的最新指南,综述了慢性收缩性心衰的诊疗进展,同时也简介了舒张性心力衰竭(射血分数正常的心力衰竭)的诊疗进展。
- 廖华郭小梅
- 关键词：心力衰竭舒张性心力衰竭药物疗法
- 去除穿膜区序列的线粒体融合素2基因通过线粒体凋亡路径促进大鼠血管平滑肌细胞凋亡被引量：4
- 2009年
- 目的研究去除穿膜区序列的大鼠线粒体融合素2（tMfn2）基因对大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡的影响及其相关的信号通路。方法用携带tMfn2基因和线粒体融合素2（Mfn2）基因的重组腺病毒（Adv—tMfn2和Adv—Mfn2）感染VSMC。采用流式细胞术、细胞凋亡ELISA、TUNEL染色等方法检测tMfn2对VSMC凋亡的影响。Western blot分析磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）以及线粒体凋亡路径中B细胞淋巴瘤／白血病-2蛋白（Bcl-2）、Bcl-2相关的X蛋白（Bax）、有活性的天冬氨酸特异一半胱氨酸蛋白酶9（cleaved caspase-9）的表达变化。结果流式细胞仪检测和ELISA结果表明，tMfn2促VSMC凋亡的作用显著强于Mfn2，且呈时产依赖性[72h凋亡率分别为（79．2±0．2）％和（65．0±1．2）％，P〈0．01]。TUNEL染色发现tMfn2组的凋亡细胞明显多于Mfn2组（P〈0．01）。Western blot结果显示，tMfn2和Mfn2组中p-Akt水平均明显降低，但前者作用更显著（P〈0．01）。进一步检测线粒体凋亡路径中的相关蛋白，tMfn2组的Bax蛋白表达显著升高、Bcl-2蛋白表达显著降低，且cleaved caspase-9的活性明显增强，较Mfn2诱导凋亡的作用更强（P〈0．01）。结论与Mfn2相比，tMfn2促进VSMC凋亡的作用更强，其机制与抑制Akt磷酸化并激活线粒体凋亡途径有关。
- 赵丽周炜王四坤廖华张文娟陈光慧郭小梅
- 关键词：细胞凋亡腺病毒科
- Mfn2基因抑制血管平滑肌细胞增殖的功能序列及肽研究
- 第一部分 携带Mfn2基因不同结构序列的重组腺病毒的构建、扩增和纯化
1.目的
采用DNA重组技术，构建、制备、鉴定、扩增和纯化含线粒体融合素2基因（Mitofusin 2，Mfn2）不同结构序列的重组腺病毒...
- 廖华
- 关键词：血管平滑肌细胞腺病毒细胞增殖
- 血管平滑肌细胞增殖信号转导通路与血管再狭窄防治被引量：8
- 2007年
- 上游激活蛋白(Ras)信号通路与血管再狭窄的发生有着十分密切的关系。雷帕霉素和紫杉醇等药物涂层支架主要通过抑制Ras下游的信号转导发挥抗细胞增殖作用。新基因M fn2可直接抑制Ras,其抑制点更高,效果更明显,因而可望用于研制基因涂层球囊与基因涂层支架,从而成为血管再狭窄等血管增殖性疾病基因治疗的新靶点。
- 廖华糜涛郭小梅
- 关键词：血管平滑肌细胞增殖信号传导血管再狭窄
- Mfn2基因突变体诱导大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞凋亡被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨线粒体融合素2(Mfn2)基因蛋白激酶A(PKA)磷酸化位点突变对大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞凋亡的影响。方法:建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,感染组分别以携带全长Mfn2基因的重组腺病毒(Adv-Mfn2)、携带不同Mfn2基因PKA磷酸化位点突变体的重组腺病毒(Adv-Mfn2-S442A,Adv-Mfn2-S442D)和仅含有半乳糖苷酶基因的对照腺病毒(Adv-LacZ)感染损伤的颈总动脉段,以注射磷酸盐缓冲液(PBS)作为未感染对照组,同时以假手术组作为正常对照组,分别于术后5 d、14 d取材,应用免疫组化检测外源基因的表达,原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测凋亡细胞,苏木精-伊红染色行组织形态学分析。结果:术后5 d,免疫组化证实Adv-Mfn2、Adv-Mfn2-S442A、Adv-Mfn2-S442D 3组Mfn2蛋白表达水平明显增加,TUNEL染色显示Adv-Mfn2、Adv-Mfn2-S442A组凋亡细胞数较对照组、Adv-LacZ组和Adv-Mfn2-S442D组明显增加(P<0.01);与Adv-Mfn2组相比,Adv-Mfn2-S442A组凋亡细胞数更多(P<0.01)。术后14 d,苏木精-伊红染色显示Adv-Mfn2组、Adv-Mfn2-S442A组内膜/中膜面积比明显低于对照组、Adv-LacZ组和Adv-Mfn2-S442D组(P<0.01);且Adv-Mfn2-S442A组内膜/中膜面积比值较Adv-Mfn2组更低(P<0.01)。结论:高表达Mfn2基因可促进大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞凋亡,且Mfn2-S442A促凋亡作用更强,而Mfn2-S442D无此作用。
- 廖华曾经纬张远恒王新夺童雪影陈光慧郭小梅
- 关键词：颈动脉疾病基因突变凋亡球囊损伤
- 青蒿琥酯对大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响
- 目的：研究青蒿琥酯对体外培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(ratvascularsmoothmusclecells，rVSMCs)增殖和凋亡的影响，并初步探讨其作用机制。方法：体外培养rVSMCs，随机分为4组：溶剂对照组...
- 廖华
- 关键词：青蒿琥酯主动脉血管血管平滑肌细胞增殖凋亡
- 文献传递
