廖金虎
- 作品数：5 被引量：21H指数：2
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划江苏省属高校自然科学基础研究项目江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪源牛病毒性腹泻病毒SH-28分离株的全基因组序列及遗传进化分析被引量：3
- 2013年
- 为了解猪源牛病毒性腹泻病毒(BVDV)与牛源BVDV在遗传特性上的差异,本试验对实验室分离保存的1株猪源BVDV(SH-28)进行了全基因组测序。利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分段扩增了SH-28分离株的18条cDNA片段,分别克隆于pGEM-T质粒载体并进行测序,用CLUSTX(1.8)和Lasergene软件进行序列的剪切和拼接,最终获得SH-28基因组序列全长为12 279个核苷酸(nt),开放阅读框(ORF)长11 685nt,编码3 895个氨基酸(aa),5′-UTR和3′-UTR分别长385nt和206nt。全基因组进化树结果表明,虽然SH-28与HLJ-10同处于一个分支上,但其与XJ-04的全基因组核苷酸同源性最高(92.3%),而与另外2株猪源BVDV-1(ZM-95、SD0806)的亲缘性较远(70.0%、70.1%)。5′-UTR进化树结果显示,SH-28分离株属于BVDV-2a2基因亚型,而HLJ-10和XJ-04株属于BVDV-2a1。由此,我们推测SH-28很有可能是由牛源BVDV-2进化而来的,但不同于已发表的BVDV-2分离株。
- 陶洁王银廖金虎杨颖羊扬朱国强
- 关键词：BVDV同源性
- 猪感染牛病毒性腹泻病毒研究进展被引量：14
- 2014年
- 牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）和猪瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV）、绵羊边界病毒（Border disease virus,BDV）同属于黄病毒科（Flaviviridae）瘟病毒属（Pestivirus）,而且在血清学上具有一定的交叉反应,它们所引起的传染性疾病给各国养牛、养猪和养羊业造成了严重的危害.牛病毒性腹泻病（BVD）呈世界性流行,给各国养殖业造成了严重的经济损失.
- 陶洁廖金虎张倩张信军朱国强
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒猪瘟病毒VIRUS传染性疾病黄病毒科经济损失
- 牛源ISG15蛋白的原核表达及抗血清的制备
- 2015年
- 本研究利用人重组干扰素IFNα-2A刺激牛肾细胞(Mardin-Darby bovine kidney cells,MDBK),并提取细胞总RNA。RT-PCR扩增牛源干扰素刺激基因15(interferon-stimulated gene 15,ISG 15),将其克隆入p Cold-TF表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)。经IPTG诱导表达后,获得约70 k Da可溶性ISG15重组蛋白。用试剂盒对重组蛋白ISG15进行纯化回收,经BCA法测定其蛋白浓度为1 mg/m L。用纯化的ISG15重组蛋白免疫ICR小鼠,制备多克隆抗体血清,用间接ELISA方法测定多抗血清效价为1:102 400。利用Western blot进一步鉴定ISG15多抗血清,结果发现其与纯化的ISG15重组蛋白能发生特异性反应,可用于后续研究。
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- 关键词：ISG15蛋白表达
- 电子束辐照技术对病毒活性的影响研究被引量：2
- 2013年
- 通过不同电子束辐照剂量对新城疫病毒、1型牛疱疹病毒和鸡传染性法氏囊病毒活性物质进行照射试验,研究其对动物病毒活性的影响。结果表明当电子束辐照剂量高于30kGy时,可以完全灭活这三种病毒。试验证明电子束辐照在很大程度上影响动物相关病毒的活性,将此技术应用于口岸检疫处理,可直接杀灭各类动物产品相关病毒,有效防止有害病毒的传入和扩散。
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- 关键词：电子束辐照病毒活性
- ISG15蛋白促进猪源牛病毒性腹泻病毒2型对Ⅰ型IFN表达抑制的研究被引量：2
- 2015年
- 为研究ISG15蛋白与猪源牛病毒性腹泻病毒2型(BVDV-2)相互作用关系,本研究通过RT-PCR扩增ISG15基因并克隆于真核表达载体p EC129中,转染于MDBK细胞,经G418筛选获得稳定表达ISG15蛋白的细胞系E53。将猪源BVDV-2分别感染E53细胞和MDBK细胞,收集不同时间点的细胞培养液并测定病毒的TCID50。结果显示ISG15蛋白对猪源BVDV-2复制具有明显抑制作用。利用荧光定量PCR检测猪源BVDV-2感染E53细胞内ISG15基因表达的变化,结果表明,病毒感染的E53细胞内ISG15基因的表达量明显高于对照组,表明猪源BVDV-2感染能够显著提高ISG15基因的表达。此外,利用荧光定量PCR检测经poly I:C处理后感染SH-28株的MDBK和E53细胞内IFN-α和IFN-β表达情况。结果表明MDBK细胞内IFN-α和IFN-β表达量分别下降约2.49倍和3.31倍,而在E53细胞中,IFN-α和IFN-β的表达量分别下降约6.29倍和9.71倍,表明过量表达ISG15蛋白能够促进猪源BVDV-2对Ⅰ型IFN的抑制作用。本实验为进一步研究猪源BVDV-2逃逸细胞先天免疫机制奠定了基础。
- 陶洁廖金虎张倩张信军朱国强
- 关键词：I型干扰素
