张洪滨
- 作品数：6 被引量：28H指数：3
- 供职机构：山东农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 尖孢镰刀菌FoPLC4参与调控孢子形成和致病性被引量：6
- 2014年
- 【目的】黄瓜枯萎病是黄瓜生产中的重要病害,其病原菌为尖孢镰刀菌黄瓜专化型(Fusarium oxysporumf.sp.cucumerinum)。研究旨在明确尖孢镰刀菌黄瓜专化型编码磷脂酶C(phospholipase C,PLC)的FoPLC4在调控分生孢子形成和致病性等方面的功能。【方法】采用生物信息学方法,确定FoPLC4在染色体上的位置,分析FoPLC4结构。基于尖孢镰刀菌番茄专化型基因组数据库,采用特异性引物克隆黄瓜枯萎病菌FoPLC4。根据同源重组原理构建携带潮霉素磷酸转移酶(hygromycin phosphotransferase,HPH)基因的敲除载体,利用PEG(polyethylene glycol)介导的方法转化原生质体,获得黄瓜枯萎病菌的敲除突变体?FoPLC4和遗传回复突变体?FoPLC4/plc4。转化子经潮霉素B平板筛选后通过PCR和RT-PCR分子验证。在PDA(potato dextrose agar)培养基上测定?FoPLC4生物学性状。利用分生孢子接种黄瓜胚根测定?FoPLC4在黄瓜幼苗上的致病性。【结果】FoPLC4位于尖孢镰刀菌基因组的4号染色体,DNA全长3 282 bp,不含内含子,编码1 093个氨基酸;FoPLC4含有5个结构域,包括EF手形(EF-hand)区、PH(pleckstrin homology)区、C2区和2个催化区,属于PLCδ亚型。与野生型菌株相比,?FoPLC4菌落生长速率没有显著改变,但气生菌丝较疏松;?FoPLC4可以同时产生大型分生孢子和小型分生孢子,大型分生孢子只占孢子总数的12.1%,而野生型菌株在相同条件下只能产生小型分生孢子,?FoPLC4产孢量下降了82.2%。致病性测定表明?FoPLC4在黄瓜幼苗上的萎蔫症状明显减轻,接种10 d后病情指数下降了53.3%。回复突变体?FoPLC4/plc4在菌落生长、产孢和致病性等性状与野生型相比没有显著差别。【结论】尖孢镰刀菌黄瓜专化型FoPLC4全长3 282 bp,不含内含子,编码1 093个氨基酸。与野生型相比,?FoPLC4分生孢子的产孢类型明显改变、产孢数量和对黄瓜幼苗的致病性显著降低。FoPLC4在调控尖孢镰刀菌分生孢�
- 孙玲褚小静郝宇张洪滨梁元存
- 关键词：尖孢镰刀菌孢子形成
- 基因枪介导转hpa99基因小麦的获得和检测被引量：1
- 2012年
- 为了探究来源于水稻细条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola)的hpa99基因改良小麦抗赤霉病的可行性,以小麦幼胚诱导的愈伤组织为转化受体,以磷酸甘露糖异构酶(phosphomannose isomerase,PMI)作为选择标记,通过基因枪法将带有hpa99基因的表达质粒AF234296导入普通小麦品种山农15。2～3次PMI筛选后,获得38株再生植株。通过氯酚红(chlorophenol red,CPR)染色以及PMI基因和目的基因hpa99的PCR检测,获得7株阳性植株,转化率为0.108%。结果表明,hpa99已整合到小麦基因组中,获得了无抗生素标记基因的转基因小麦。
- 柳金伟焦娇张洪滨梁元存
- 关键词：小麦转基因
- 山东省小麦赤霉病菌对多菌灵的敏感性测定被引量：7
- 2013年
- [目的]测定山东省小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)对多菌灵的敏感性水平,为生产中合理用药提供参考。[方法]以2.0 mg/L多菌灵为鉴别剂量,在PDA平板上测定90个菌株的敏感性。用菌落直径法测定菌株的EC50值并计算抗性倍数;用孢子萌发法测定10 mg/L多菌灵对芽管伸长的抑制情况。[结果]90个小麦赤霉菌株的EC50平均值为(0.5269±0.0093)mg/L,没有抗性菌株存在;10 mg/L多菌灵对芽管伸长有明显抑制作用并导致芽管畸形。[结论]山东省小麦赤霉病菌均为多菌灵的敏感菌株,多菌灵可用于防治小麦赤霉病。
- 孙玲张洪滨刘秉江徐加利梁元存
- 关键词：小麦赤霉病菌多菌灵抗药性
- 转AtMYB44基因小麦的获得和检测被引量：2
- 2012年
- 为了评价拟南芥转录因子AtMYB44基因对小麦抗病能力的影响,以小麦幼胚诱导的愈伤组织为转化受体,以磷酸甘露糖异构酶(phosphomannose isomerase,PMI)基因作为选择标记,通过基因枪介导法将带有At-MYB44基因的表达质粒AF234296-44导入小麦品种扬麦158.经过2～3次甘露糖筛选后,获得75株再生苗.通过氯酚红(chlorophenol red,CPR)染色获得40株CPR阳性再生苗,进一步通过标记基因PMI和目的基因AtMYB44的PCR检测,获得22株PCR阳性植株,转化率为0.306%.结果初步表明AtMYB44基因已整合到小麦基因组中,获得了生物安全标记的转AtMYB44基因小麦.
- 柳金伟焦娇张洪滨梁元存
- 关键词：小麦转基因
- 禾谷镰刀菌磷脂酶C1基因的克隆与功能分析
- 小麦赤霉病是一种世界性的病害，它能造成包括大麦、小麦等禾谷类作物产量上极大的损失。小麦赤霉病主要发生在我国的中部和长江中下游流域，在长江中下游地区病害发生的频率最高且程度最重。随着耕作制度以及气候的变化，小麦赤霉病有大规...
- 张洪滨
- 关键词：小麦赤霉病禾谷镰刀菌菌株鉴定磷脂酶C
- 文献传递
- 山东省小麦赤霉病菌种群组成及其致病力分化被引量：13
- 2013年
- 由禾谷镰孢菌群Fusarium graminearum clade引起的赤霉病是小麦的重要病害。为明确山东省小麦赤霉病菌的种群组成及其致病力,于2011年和2012年从山东省15地市分离了95株小麦赤霉病菌,在形态和分子生物学鉴定种的基础上,采用鉴定B型毒素化学型的特异性引物进行毒素化学型分析。在95个菌株中,93株分离物为禾谷镰孢菌F.graminearum,2株为燕麦镰孢菌F.avenaceum。94株分离物为脱氧雪腐镰孢菌烯醇(deoxynivalenol,DON)化学型,1株为雪腐镰孢菌烯醇(nivalenol,NIV)化学型。在94株DON毒素化学型菌株中,90株为15-乙酰脱氧雪腐镰孢菌烯醇(15-acetyldeoxynivalenol,15-AcDON)化学型,4株为3-乙酰脱氧雪腐镰孢菌烯醇(3-acetyldeoxynivalenol,3-AcDON)化学型。在小麦扬花期,采用单花滴注接种法对29个菌株进行了致病力测定,供试菌株的致病力分化明显。表明在山东省冬小麦产区,产15-AcDON毒素的F.gra-minearum是小麦赤霉病菌的优势种群。
- 张洪滨柳金伟刘秉江刘冰梁元存
- 关键词：小麦赤霉病禾谷镰孢菌致病力分化
