彭霞
- 作品数：13 被引量：30H指数：2
- 供职机构：上海市公共卫生临床中心更多>>
- 发文基金：上海市卫生局青年科研基金国家高技术研究发展计划王宝恩肝纤维化研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- LC—MS／MS法同时测定奈韦拉平、拉米夫定、司他夫定、齐多夫定和依非韦伦的血浆浓度
- 2009年
- 目的建立高效液相色谱串联质谱技术（LC—MS／MS）同时检测艾滋病常用的5种药物：奈韦拉平（NVP）、拉米夫定（3TC）、司他夫定（d4T）、齐多夫定（AZT）和依非韦伦（EFV）的血药浓度方法。方法采用蛋白沉淀法提取，Eclipse XDB—C18色谱柱（5μm，4．6mm×150mm）分离药物，以（甲醇＋0.3％甲酸）：（水＋0．3％甲酸）（V：V）=80．20为流动相，流速为0．5mL／min，采用质谱多反应监测方法（MRM）检测。结果LC—MS／MS对AZT，3TC的线性范围为25～3200μg/L，NVP和EFV的线性范围为50-6400μg／L，最低检测限均为1μg／L，d4T的线性范围为100～3200μg／L，最低检测限为5μg/L，r均大于0．99。高、中和低3个浓度的日内精密度小于10％，日间精密度小于15％，绝对回收率均大于50％。结论采用HPLC—MS／MS法能同时怯谅、准确测定血浆中这常用的百种药物．
- 姚亚敏孙建军贾小芳彭霞卢洪洲张丽军
- 乙型肝炎病毒基因调控的小鼠肝细胞质膜蛋白质变化被引量：2
- 2008年
- 目的通过对转HBV全基因小鼠肝细胞质膜蛋白质组的分析，研究病毒基因对宿主肝细胞质膜蛋白质表达的影响，探讨HBV感染机制。方法以HBV转基因C57小鼠和正常鼠肝为材料，通过蔗糖密度梯度离心结合抗体亲和法纯化肝细胞质膜。用Western blot法验证质膜的纯度和转基因鼠肝细胞质膜中HBV外膜蛋白质的表达。对纯化的质膜组分进行差异蛋白质组学分析。结果亲和纯化法较密度梯度离心法能进一步富集质膜近3倍，线粒体的污染减少近2倍；HBV外膜蛋白质只在转基因鼠肝细胞质膜中表达。蛋白质双向电泳分离得到500多个蛋白质点，分析得到26个具有2倍以上差异的蛋白质点，准确鉴定出7个蛋白质。结论获得了好的质膜纯化方法；HBV基因调节了小鼠肝细胞质膜蛋白质的表达，鉴定得到了与HBV病毒感染相关蛋白质，为进一步探讨HBV感染机制打下了基础。
- 彭霞贾小芳周文江彭建涛沈燕刘立文张丽军
- 关键词：蛋白质组细胞质膜
- 复方鳖甲软肝片治疗免疫性肝纤维化大鼠肝细胞质膜蛋白质组分的变化被引量：12
- 2009年
- 目的研究复方鳖甲软肝片治疗肝纤维化大鼠肝细胞质膜蛋白质组分的变化,以寻找与肝纤维化逆转相关的质膜蛋白质。方法以猪血清腹腔注射大鼠8周制备肝纤维化模型,再以复方鳖甲软肝片灌胃治疗8周。采用蔗糖密度梯度离心获得肝组织匀浆和质膜组分,采用免疫印迹法检测质膜的纯度,分析差异蛋白质组学变化。结果病理学检查发现实验8周后,大鼠肝脏发生中度肝纤维化;经鳖甲软肝片治疗8周后肝纤维化程度减轻,基本恢复到正常水平;免疫印迹检测显示质膜组分得到了较好的富集,其中线粒体等其他细胞器蛋白减少;通过差异蛋白质组学分析发现,治疗组中有22个3倍以上差异蛋白质点,准确鉴定了9个蛋白质,通过免疫印迹验证发现了II型细胞支架蛋白8和膜联蛋白A2的差异表达。结论鳖甲软肝片治疗后,大鼠肝纤维化发生了逆转,并伴随一些质膜蛋白质的表达变化。
- 彭霞袁松华冯艳玲贾小芳杨华张丽军
- 关键词：肝纤维化复方鳖甲软肝片
- 转乙型肝炎病毒表面抗原基因小鼠肝细胞质膜蛋白质组学研究
- 2012年
- 目的分析转HBsAg基因小鼠与正常小鼠肝细胞质膜的差异蛋白质组，为了解乙型肝炎发病机制，寻找药物作用靶标提供指导。方法构建6月龄转HBsAg基因C57小鼠模型，检测转基因组小鼠和正常对照C57小鼠肝脏病理变化。以转基因组和正常对照C57小鼠肝脏为材料，蔗糖密度梯度离心结合磁珠纯化法纯化肝细胞质膜，Western印迹验证纯化的质膜组分纯度，二维凝胶电泳结合ImageMaster软件图像分析质膜蛋白质，获得的差异蛋白质点经胰酶酶切后，进行差异蛋白质的液相色谱串联质谱分析鉴定。结果转HBsAg基因小鼠肝脏呈现肝炎表现，而正常对照C57小鼠肝脏未见异常。蔗糖密度梯度离心结合磁珠纯化法可以有效富集小鼠肝质膜组分，并减少线粒体的污染。小鼠肝脏质膜组分中，共获得30个≥2倍的差异蛋白质点，成功鉴定到11个可能与HBV感染相关的差异蛋白质，其中9个蛋白质在转基因鼠肝质膜中表达上调，2个蛋白质表达下调。这些差异蛋白质包括细胞支架蛋白、心脏钙离子释放通道蛋白、细胞色素B5和ATP合成酶a亚基等。结论本研究鉴定了一批与HBsAg基因表达相关的小鼠肝脏质膜蛋白质，它们可能是乙型肝炎的药物作用靶标，本研究将为进一步探讨HBV感染的机制提供指导。
- 贾小芳李春洪彭霞尹林冯艳玲马芳张丽军
- 关键词：病毒包膜蛋白质类蛋白质组学
- 慢重型乙肝患者血浆蛋白质组差异表达的初步研究
- 2009年
- 目的探讨慢性重型乙肝病变的血浆蛋白质组变化，为研究慢性重型乙肝的发病机制及治疗提供新的线索。方法收集健康对照者，慢性重型乙肝患者血浆各10份，去除血浆中高丰度蛋白。应用双向凝胶电泳（2-DE）技术构建两组研究对象血浆蛋白2-DE图谱，经ImageMaster差异分析软件进行分析，寻找差异蛋白质点。用电喷雾离子串联质谱（ESI-MS—MS）对重要的差异蛋白质点进行鉴定。结果经过样品预处理后，血浆中白蛋白和免疫球蛋白IgG含量大大减少，低丰度蛋白得到较好的富集。ImageMaster 2D Platinum6．0软件将银染图谱分成2个类别进行找点、匹配等分析，正常健康组蛋白质点287个，慢性重型乙肝组蛋白质点297个，筛选出2倍以上的差异蛋白质点31个。对差异蛋白质点进行ESI—MS—MS分析，鉴定了8个慢性重型乙肝相关蛋白质，其中上调的蛋白质有α1-抗胰蛋白酶，载脂蛋白E；下调的蛋白质有补体因子B；CD5抗原相关蛋白；纤维蛋白原B链；α-1B糖蛋白；载脂蛋白AI；触珠蛋白。结论慢性重型乙肝患者血浆蛋白质组与正常人血浆对比存在明显差异，成功鉴定了8个慢性重型乙肝相关蛋白。这些差异蛋白质的功能涉及能量代谢、脂蛋白代谢、蛋白质分泌、补体旁路活化途径等过程。对这些重要蛋白质的结构和功能的进一步研究，对于进一步揭示慢性重型乙肝发病分子机制及寻找治疗靶标可能具有重要的意义。
- 欧强彭霞殷科珊张丽军
- 关键词：慢性重型乙肝血浆蛋白质组学双向凝胶电泳
- 血浆置换对慢性重型乙肝患者血浆蛋白质组影响的初步研究
- 目的:探讨慢性重型乙肝血浆置换(PE)治疗前后的血浆蛋白质组变化，为研究PE治疗重型肝炎的作用机制及寻找治疗靶标提供新的线索。方法:收集慢性重型乙肝患者PE前后血浆各15份，去除血浆中高丰度蛋白质。应用双向凝胶电泳(2-...
- 欧强殷科珊彭霞陈良张丽军
- 关键词：慢性乙肝血浆置换蛋白质组双向凝胶电泳
- 文献传递
- 免疫性和酒精性肝纤维化大鼠肝脏细胞质膜的蛋白质组学研究被引量：1
- 2010年
- 目的 研究肝纤维化的发生机制,寻找新的与肝纤维化相关的生物学标志物. 方法将48只大鼠分为乙醇组、免疫组和对照组,分别进行乙醇灌胃、猪血清注射与等渗盐水注射处理.采用James＇s网状染色法染色并检测处理后第2、4、6、8周大鼠肝脏的病理学变化.将处理后第2、4、6、8周的各组大鼠分别处死4只后取肝,并将肝脏组织作匀浆处理,通过2次蔗糖密度梯度离心获得细胞质膜组分,用Western blot法检测细胞质膜的纯度.提取肝脏细胞质膜蛋白质,通过双向凝胶电泳分析各个时期的大鼠肝脏细胞质膜蛋白质,差异蛋白质点在酶解后经戴安纳升级液相色谱Ultimate 3000串联布鲁克高容量离子阱质谱HCT进行鉴定.并对被鉴定的差异蛋白质进行功能和定位的分类分析. 结果大鼠肝脏细胞质膜得到了有效富集.双向凝胶电泳分析第2周和第8周的大鼠肝细胞质膜蛋白质,共找到87个差异蛋白质点,这些蛋白质点经过质谱鉴定后对应于30个非冗余蛋白质,包括膜联蛋白A2,细胞支架角蛋白8和18. 结论膜联蛋白A2、细胞支架角蛋白8和18等蛋白质可成为肝纤维化诊断的新标志物.
- 贾小芳彭霞冯艳玲杨华袁正宏张丽军
- 关键词：蛋白质组
- 血浆置换对慢性重型乙型肝炎患者血浆蛋白质组影响的初步研究
- 2009年
- 目的探讨慢性重型乙型肝炎血浆置换(P E)治疗前后的血浆蛋白质组变化,为研究PE治疗重型肝炎的作用机制及寻找治疗靶标提供新的线索。方法收集慢性重型乙型肝炎患者PE前后血浆各15份,去除血浆中高丰度蛋白质。应用双向凝胶电泳(2-DE)技术构建两组研究对象血浆蛋白2-DE图谱,经Image Master差异分析软件进行分析,寻找差异蛋白质点。用电喷雾离子串联质谱(ESI-MS/MS)对重要的差异蛋白质点进行鉴定。结果经过样品预处理后,血浆中白蛋白和免疫球蛋白IgG等高丰度蛋白质含量明显减少,低丰度蛋白得到较好的富集。PE前组蛋白质点297个,PE后组蛋白质点305个,筛选出3倍以上的差异蛋白质点15个,鉴定了5个差异蛋白质,其中在PE后血浆中上调的蛋白质有补体因子B(Complement factor B precursor,CFB,点1)、CD5antigen-like蛋白(CD5antigen-like precursor,点2)、纤维蛋白原B链(Fibrinogen beta chain precursor,FGB,点3)、触珠蛋白(Haptoglobin precursor,点4),下调的蛋白质有载脂蛋白E(Apo-E,点5)。结论鉴定了5个PE治疗前后差异表达的蛋白质,这些蛋白表达的改变提示PE可以干预机体脂蛋白代谢、蛋白质分解合成代谢,并能调节机体免疫功能,补体旁路活化途径等。深入研究这些蛋白质结构和功能对于进一步揭示PE的治疗作用机制具有重要的临床意义。
- 欧强殷科珊彭霞陈良张丽军
- 关键词：慢性重型乙型肝炎血浆置换蛋白质组双向凝胶电泳
- 应用抗体特异免疫吸附去除血浆中高丰度蛋白
- 目的:建立血浆高丰度蛋白去除方法,评价其应用价值。方法:应用 Bio-rad 公司生产的血清白蛋白和 IgG 去除试剂盒对血浆样品进行处理,比较去除和未去除高丰度蛋白血浆2-DE 图谱。结果:血浆高丰度蛋白经去除后,血浆...
- 欧强彭霞卢洪洲张丽军
- 关键词：血浆高丰度蛋白双向凝胶电泳
- 文献传递
- 慢性重型乙肝患者血浆蛋白质组差异表达的初步研究
- 目的:探讨慢性重型乙肝病变的血浆蛋白质组变化,为研究慢性重型乙肝的发病机制及治疗提供新的线索。方法:收集健康对照者,慢性重型乙肝患者血浆各10份, 去除血浆中高丰度蛋白。应用双向凝胶电泳(2-DE)技术构建两组研究对象血...
- 欧强王冯滨彭霞贾小芳张丽军
- 关键词：慢性重型乙肝血浆蛋白质组学双向凝胶电泳
- 文献传递
