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徐逸

作品数：39 被引量：102H指数：5
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  • 39篇医药卫生

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共 39 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
胰、肾同期联合移植治疗糖尿病合并尿毒症40例被引量：1
2008年
目的报告40例胰、肾同期移植（SPK）治疗糖尿病合并尿毒症的结果及经验。方法共40例糖尿病合并尿毒症病人接受SPK，平均年龄为（45.8±82）岁。供肾先植入左侧髂窝。供胰植入右下腹腔，移植胰动脉与右侧髂外动脉端侧吻合，移植胰静脉与右侧髂外静脉端侧吻合。其中胰液膀胱引流术式2例，改进的胰液空肠引流术式38例。移植肾平均冷血时间为（7．13±2．02）h，移植胰平均冷缺血时间为（9．95±2．01）h。术后早期采用皮质激素＋霉酚酸酯＋他克莫司（36例）／环孢素A（2例）＋抗淋巴细胞球蛋白（ALG）或抗CD25抗体四联诱导治疗，以后改为三联维持。结果受者、移植肾和移植胰6个月存活率均为97．5％，1年存活率均为94．8％，受者、移植胰和移植肾3年存活率分别为94．8％、84．3％和84．3％。39例停用胰岛素，平均停用胰岛素时间为（6．87±6．80）d，空腹血糖平均恢复正常时间为（13．68±9．05）d。术后3周口服糖糖耐量试验、胰岛素和C肽释放试验显示移植胰功能完全正常。血淀粉酶恢复正常时间平均为（10．24±7．72）d。肾功能延迟恢复（DGF）8例，血肌酐恢复正常时间平均为（52．75±20．01）d，其余30例血肌酐恢复正常时间平均为（8．03±7．39）d。术后主要外科并发症为移植胰伤口感染、胰十二指肠-空肠出血和移植肾周出血，3例（7．9％）因并发症再次手术，未发生与胰液引流术式相关的并发症如胰漏、肠漏、腹腔脓肿及肠梗阻等。结论（1）SPK是治疗糖尿病合并尿毒症的有效方法；（2）改进的胰液空肠引流术式更简化、安全，更符合生理。
明长生陈文伟宫念樵曾凡军张伟杰陈知水林正斌魏来刘斌蒋继贫徐逸陈忠华
关键词：胰腺
含人p27基因的重组腺病毒的构建及鉴定
2008年
目的:构建并鉴定含有人p27基因和EGFP基因的重组腺病毒载体,并观察其表达。方法利用腺病毒载体系统Adeno-X,通过质粒抽提、电泳、酶切、连接、转化等多种基因工程技术,构建重组腺病毒质粒pAdeno-p27-EGFP;酶切、PCR鉴定重组腺病毒质粒;利用293细胞包装重组腺病毒载体PAd-p27-EGFP,通过荧光倒置显微镜观察EGFP的表达。结果:经酶切和PCR鉴定,成功构建重组腺病毒质粒pAdeno-p27-EGFP,利用脂质体转染人293细胞后,转染腺病毒质粒pAdeno-p27-EGFP可见EGFP表达和细胞致病效应(CPE)。结论:利用腺病毒载体系统Adeno-X成功构建含CMV启动子的Flag-p27和EGFP基因的腺病毒载体,为进一步研究细胞周期调控与慢性移植物失功之间的关系,并为寻找慢性移植物失功的基因治疗的途径奠定基础。
徐逸朱舟吴柯陈曦林何文涛曾宁陈忠华
关键词：P27腺病毒细胞周期慢性移植肾失功
转染真核表达载体pGFAP-IRES2-EGFP-p27对星形胶质细胞增殖的抑制作用被引量：2
2007年
目的:探讨脂质体介导真核表达载体pGFAP-IRES2-EGFP-p27转染体外培养星形胶质细胞后对其增殖的影响。方法:利用脂质体将质粒pGFAP-IRES2-EGFP-p27转染入纯化培养的星形胶质细胞,通过免疫荧光化学标记观察转染质粒pGFAP-IRES2-EGFP-p27后星形胶质细胞内外源基因EGFP、p27的表达情况,并观察其对星形胶质细胞Ki67表达的影响。结果:脂质体介导质粒pGFAP-IRES2-EGFP-p27转染后24 h即开始有EGFP的表达,48-72 h EGFP表达达高峰;通过免疫荧光标记发现,表达EGFP的细胞同时有p27表达水平明显增高;和EGFP阴性细胞相比,EGFP阳性细胞中Ki67的阳性率明显下调(P<0.01)。结论:GFAP启动子能启动目的基因p27和EGFP在星形胶质细胞的表达;连于p27的下游EGFP可作为报告基因,通过观察EGFP的表达可了解外源性p27的表达情况;导入外源性p27能有效抑制星形胶质细胞的增殖。
朱舟潘邓记徐逸喻志源徐沙贝王伟
关键词：真核表达载体
大鼠缝隙连接蛋白Connexin 43的shRNA重组腺病毒载体的构建和鉴定被引量：1
2010年
目的:构建缝隙连接蛋白connexin 43(CX43)特异性shRNA重组腺病毒载体,为应用基因沉默技术从转录后水平进行基因治疗研究奠定基础。方法:合成CX43发夹样shRNA的DNA单链一对和对照单链scramble一对,退火后将其克隆至带有增强型绿色荧光蛋白(eGFP)报告基因的穿梭质粒pAd shRNA/H1,得到pAd shRNA/H1-CX43和pAd shRNA/H1-scramble。分别酶切及DNA测序鉴定后,经Pme I线性化后转化入BJ5187-AD-1感受态细菌,在细菌内进行同源重组构建含目的基因的重组腺病毒质粒载体。用Pac I酶切鉴定重组菌。将Pac I酶切重组的两种腺病毒质粒载体后,经脂质体转化293细胞进行包装得到重组的腺病毒颗粒,并通过293细胞绿色荧光表达反应重组腺病毒表达情况。将重组的腺病毒Ad-Cx43 shRNA和对照病毒Ad-scramble shRNA分别感染大鼠原代培养的星形胶质细胞,并检测星形胶质细胞CX43的表达。结果:证实穿梭质粒的以及重组腺病毒质粒均构建正确,腺病毒质粒转染293细胞后48 h即可见绿色荧光蛋白表达,10 d后全部细胞表达绿色荧光,并有半数细胞飘起,收获病毒感染培养星形胶质细胞后48 h,均有绿色荧光表达,经感染Ad-Cx43 shRNA的星形胶质细胞CX43的表达明显低于感染对照病毒Ad-scramble shRNA的星形胶质细胞。结论:成功构建表达大鼠CX43特异性发夹状shRNA的重组腺病毒载体,将为应用基因沉默技术研究CX43在神经系统疾病尤其是缺血性脑损伤中的作用提供依据。
汪琦徐逸王伟朱舟
关键词：CX43腺病毒载体缺血性脑损伤
胃肠复合术式治疗病态性肥胖症的疗效观察被引量：2
2013年
目的探讨行胃肠复合术式一胃袖状切除附加改良空回肠旁路术（Sleeve Gastrectomy and Modified Jejunoileal Bypass，SG—MJIB）治疗病态性肥胖症的疗效。方法对本科室治疗的7例病态性肥胖症伴有多种合并症的患者进行疗效随访分析。结果7例患者SG—MJIB术后仅出现1例切口液化裂开，术后随访10-39（27．13±11．33）个月，多余体重减少百分比（Percent Excess Weight Loss，％EWL）为（53．15±19．18）％，SG—MJIB术后4例肥胖症患者的高血压或血糖异常均恢复正常；7例高脂血症中5例缓解或好转；7例脂肪肝中5例好转；7例高尿酸血症术后5例缓解，2例好转；4例呼吸睡眠综合征患者3例缓解，1例好转。结论SG—MJIB对病态性肥胖伴有多种合并症的患者疗效较好，并发症轻微，但目前病例偏少，值得进一步研究。
张建军徐逸任玉萍吴毅平
关键词：胃切除术肥胖症外科学
Galeetin-9（Tim-3L）显著减弱小鼠移植排斥
2009年
目的探究Galectin-9（即Tcell immunoglobulin domain and mucin domain protein-3 lig-and，Tim-3L）的真核定位与功能，及其对同种异基因排斥反应的影响。方法PCR扩增Galectin-9片段，插入到pEGFP—N1质粒，转染中国仓鼠卵巢癌细胞系（CHO）行G418筛选，分选增强型绿色荧光蛋白（EGFP）阳性细胞。免疫组化检测Galectin-9的表达，Alamar Blue法检测稳定转染Galectin-9的CHO细胞及其新鲜培养上清对脾细胞增殖的影响，ELISA检测IL-2水平。给予BALB／c→C57BL／6心脏移植受鼠Galectin-9蛋白100μg×7d。结果Galectin-9表达于细胞浆，稳定转染Galectin-9-EGFP的CHO细胞上清抑制淋巴细胞增殖和IL-2的产生。上述效应可被Tim-3-Fc融合蛋白逆转。Galectin-9干预的心脏移植物中位生存时间明显延长[（22．7±1．2）d，（7．2±0．4）d）]。结论真核细胞中Galectin．9可通过分泌形式负调节同种异基因免疫；Galectin-9有望成为新型的抗排斥药物。
何文涛袁劲方泽民汪峰徐逸周鸿敏高英张维娜王璐陈忠华
关键词：TIM-3GALECTIN-9免疫抑制小鼠
转化生长因子-β1联合白细胞介素-2体外诱导非肥胖糖尿病小鼠调节性T细胞的产生被引量：2
2008年
目的体外诱导非肥胖糖尿病（NOD）小鼠CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞（Treg）的产生并检测其免疫抑制功能。探讨外源性白细胞介素（IL）-2在诱导方案中的作用。方法分选NOD小鼠童贞T细胞（NmveT），利用Anti—CD3、Anti—CD28刺激，同时给予转化生长因子-β1（TGF—B1）和白细胞介素-2（IL-2），共同培养5d，收获诱导性Treg（iTreg），经流式细胞仪检测其表型。利用体外T细胞增殖体系，对比NOD小鼠天然Treg（nTreg），评价iTreg的免疫抑制能力。将诱导方案中的IL-2撤除以观察其作用。结果TGF-β1联合IL-2能诱导NOD小鼠NaiveT转化为iTreg，较对照组有统计学意义[（41．33±3．21）％比（8．00±3．00）％，P〈0．05]。iTreg可有效抑制T细胞增殖，其能力与nTreg的差异无统计学意义[（40．33±1．03）％比（38．33±3．06），P〉0．05]。外源性IL-2有利于iTreg的产生[（41．33±3．21）％比（15．00±1．00）％，P〈0．05]。结论TGF-β1联合IL-2可在体外诱导Naive T转化为具有免疫抑制功能的Treg。
吴轲徐逸昌盛吴丁安陈忠华张伟杰
关键词：糖尿病IL-2
Neuropilin-1在CD4^+CD25^+T细胞上的表达被引量：2
2007年
目的探讨neuropilin-1(NRP1)在外周血中CD4^+CD25^+T细胞上的表达以及意义。方法收集肾移植术后长期存活、慢性移植物肾病和急性排斥患者以及健康成年人的外周血,分离外周血淋巴细胞,用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞中CD4^+CD25^+T细胞上NRP1和Foxp3的阳性细胞的百分比。结果各组CD4^+CD25^+T细胞NRP1的表达率差异有统计学意义(P<0.05);各组CD4^+ CD25^+T细胞Foxp3的表达率差异亦有统计学意义(P<0.05)。长期存活组CD4^+CD25^+T细胞NRP1和Foxp3表达率分别为19.76%±3.84%、50.19%±3.90%,显著高于对照及慢性移植物肾病和急性排斥组(P<0.05);急性排斥组的CD4^+CD25^+T细胞NRP1和Foxp3表达率最低4.64%±1.26%、17.24%±5.29%。各组CD4^+CD25^+T细胞NRP1表达变化趋势与Foxp3变化趋势相同。结论NRP1在长期存活组的外周血淋巴细胞中CD4^+CD25^+T细胞的表达上调,在急性排斥组时表达下调,且其在各组的表达变化趋势与Foxp3的表达变化趋势是一致的,这就提示CD4^+CD25^+NRP1^+T细胞是一群调节性T细胞,即NRP1是CD4^+CD25^+T_(reg)的一个重要的表面标志。
张利改周鸿敏童荔蔡兰军徐逸吴轲陈忠华
关键词：肾移植移植耐受调节性T细胞NEUROPILIN-1
32例胰、肾同期联合移植的近期疗效被引量：7
2006年
目的报告32例胰、肾同期联合移植(SPK)的近期结果及经验。方法为合并尿毒症的27例1型糖尿病和5例2型糖尿病患者施行SPK,其中胰液膀胱引流(BD)术式2例,改进的胰液空肠引流(ED)术式30例。术后早期采用他克莫司、霉酚酸酯及皮质激素预防排斥反应,同时以抗淋巴细胞球蛋白或抗CD25单克隆抗体诱导治疗。结果32例手术均获得成功,术后随访2～12个月,1例术后9周死于肺部感染,死亡时肾功能正常,另1例术后6个月死于急性心肌梗死,死亡时移植胰、肾功能正常,其余患者目前仍存活;术后(12.7±8.1)d空腹血糖恢复正常,(8.3±4.5)d停用胰岛素,(8.4±7.8)d血肌酐恢复正常。术后发生手术相关并发症有出血、移植胰切口感染、上消化道出血、右股静脉血栓形成和淋巴漏;其它并发症有药物不良反应、肺部感染,采用BD术式者并发代谢性酸中毒和镜下血尿;4例发生移植肾急性排斥反应,均经活检证实。结论SPK治疗糖尿病并发尿毒症的近期疗效满意,ED术式更符合正常生理。
明长生甑忠广曾凡军陈知水张伟杰林正斌魏来宫念樵刘斌蒋继贫徐逸陈文伟陈忠华
关键词：胰腺
NF-κB启动子调控的pNF-κB-IRES2-EGFP-p27双顺反子真核表达载体的构建及表达分析
2008年
目的构建并鉴定携带核转录因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)特异性启动子的Flag-p27和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)双顺反子真核表达载体pNF-κB-IRES2-EGFP-p27,转染经H2O2干预的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),观察其表达。方法采用基因工程技术,经过多步亚克隆后完成能同时表达p27和EGFP基因的NF-κB特异性启动子双转基因真核表达载体。转染体外培养的经H2O2干预的HUVEs,观察EGFP的表达,并通过免疫荧光细胞化学技术观察p27基因的表达。结果经酶切鉴定和测序鉴定,成功地构建真核表达载体pNF-κB-IRES2-EGFP-p27,转染经H2O2干预的HUVEs后,可见部分细胞有EG-FP的表达,并且在EGFP阳性的细胞中p27基因的表达水平明显增高,而未经H2O2处理的对照组转染pNF-κB-IRES2-EGFP-p27后无EGFP的表达。结论NF-κB启动子能够特异性地激活p27基因的表达。EGFP基因可以指示p27基因的表达情况。由NF-κB特异性启动子启动的p27和EGFP双顺反子真核表达载体的构建为进一步研究细胞周期调控与慢性移植物失功(chronic graft dysfunction,CGD)之间的关系,并为进一步寻找慢性移植物失功的基因治疗途径奠定基础。
徐逸朱舟吴轲曾宁田学俾陈忠华
关键词：双顺反子P27基因
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