方亮
- 作品数:2 被引量:6H指数:2
- 供职机构:武汉生物制品研究所更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人巨细胞病毒特异性免疫球蛋白原料血浆的筛选被引量:3
- 2009年
- 用北京贝尔公司的人巨细胞病毒(HCMV)IgG检测试剂盒检测5-6月入库的武汉生物制品研究所(WIBP)下属四个浆站共7433份普通血浆,HCMV-IgG阳性率为36%-55%。建立内部参考品Pc1、Pc2、Pc3、Pc4,用德国赛润公司的HCMV-IgG定量检测试剂盒对内部参考品进行标定,效价分别为648、962、1757、2940PEI-U/ml。以A450值〉Pc1为标准确定HCMV-IgG阳性的献血员名单,按照检疫期的要求,利用浆站管理系统软件查找献血员前3个月的血浆编号,统计建档。逐批检测符合检疫期的建档血浆,以A450值〉Pc2为标准收集阳性血浆,以A450值〉Pc3为标准投料,进行人巨细胞免疫球蛋白(HCMV-IG)的低温乙醇纯化。通过成品的中和试验结果决定收浆方案是否可行。
- 彭良俊林连珍高菲方亮李策生周志军
- 关键词:效价
- 微量滴定板上的弹性蛋白酶动态显色法检测α_1-蛋白酶抑制剂活性被引量:3
- 2011年
- 目的建立微量滴定板上的弹性蛋白酶动态显色法(以下简称微量滴定板法),用于α1-蛋白酶抑制剂(α1-Pro-teinase inhibitor,α1-PI)的活性检测。方法以微量滴定板为载体,将不同量的α1-PI样品与定量的弹性蛋白酶混合,通过适宜的显色底物对剩余的弹性蛋白酶活性进行测定。用酶标仪测定405 nm处A值的变化,分析试验的有效性,并计算α1-PI样品的活性。优化微量滴定板法的实验条件。用BCS凝集分析仪检测α1-PI的活性,确认样品的工作浓度。采用两种方法检测19份样品的α1-PI活性,分析二者的相关性。结果微量滴定板法的最优实验条件为:样品加样体积50μl,标准曲线范围为(2~14)μg/ml;弹性蛋白酶稀释度为1∶1 400,体积100μl;孵育时间15 min;底物稀释度为1∶10,体积50μl;连续监测A405值10 min。微量滴定板法和BCS法检测19份样品的相关系数大于0.99。结论微量滴定板法检测α1-PI活性的时间更短,同一样品不同稀释度之间检测结果的变异率更低,且检测结果与BCS法相关性良好,可替代全自动的BCS法,降低检测成本。
- 周志军林连珍方亮周雁翔李策生彭良俊
- 关键词:Α1抗胰蛋白酶胰弹性蛋白酶滴定分析法BCS