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曹成建: 作品数：23 被引量：85H指数：6; 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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miR-125b靶向调控DNMT3b介导p53 DNA甲基化在Hcy致血管平滑肌细胞增殖的作用研究: 目的观察同型半胱氨酸/(Homocysteine, Hcy/)对血管平滑肌细胞/(Vascular smoothmuscle cells, VSMCs/) p53甲基化程度的影响，明确DNA甲基转移酶3b/(DNAmet...; 曹成建; 关键词：血管平滑肌细胞 DNA甲基转移酶3B; 文献传递

人线粒体融合蛋白-2基因真核表达载体的构建与鉴定: 2014年; 目的构建人线粒体融合蛋白-2(mitofusin-2, MFN2)基因真核表达载体并对其进行鉴定。方法在pEGFP-N1载体多克隆位点插入人MFN2基因编码区序列,酶切、测序验证是否插入及正确性。将所构建载体转染原代培养的人血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cel s,VSMCs),荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达;荧光定量PCR和Western blot分别检测MFN2的mRNA及蛋白表达。结果成功构建了人MFN2基因真核表达载体,其转染VSMCs后,可以检测到MFN2 mRNA及蛋白水平高表达(<0.01)。结论成功构建了人MFN2基因真核表达载体,且能够在原代VSMC中过表达。; 徐弋曹成建赵丽徐华杨晓玲韩学波田珏姜怡邓

小鼠组织SAM和SAH在动脉粥样硬化评价中的应用被引量：1: 2012年; 目的探讨S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosyl Homocysteine,SAH)和S-腺苷甲硫氨酸(S-Adenosyl-methionine,SAM)在载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)评价中的应用。方法采用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)检测各组ApoE-/-小鼠(模型对照组、高蛋氨酸饮食组、叶酸和维生素B12治疗组)心脏、肝脏、肾脏组织中SAM和SAH含量的变化,并与正常对照组比较。HE染色光镜观察各组主动脉病理学改变。结果 HPLC实验数据表明,正常对照组、模型对照组、高蛋氨酸饮食组的小鼠心脏、肝脏、肾脏组织中SAM、SAH的含量依次增加,治疗组小鼠心脏、肝脏、肾脏组织中SAM、SAH的含量则有所降低,与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型对照组比较,肾脏高蛋氨酸饮食组SAM、SAH含量差异有统计学意义(P<0.05),治疗组肝脏、肾脏SAM、SAH含量差异有统计学意义(P<0.01)。与高蛋氨酸饮食组比较,肝脏、肾脏治疗组SAM、SAH含量有明显差异(P<0.01)。同时,HE染色显示高蛋氨酸饮食组主动脉AS的病理改变明显。结论 SAM、SAH含量升高可能是高蛋氨酸饮食促进ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化发生的重要机制之一。; 梁宇廖国玲马琳娜曹成建姜怡邓; 关键词：S-腺苷同型半胱氨酸 S-腺苷甲硫氨酸 APOE-/-小鼠

动脉粥样硬化患者基质金属蛋白酶组织抑制剂1基因DNA高甲基化的研究被引量：7: 2013年; 目的:探讨动脉粥样硬化(AS)患者基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)基因DNA启动子区甲基化修饰的改变。方法:选择经颈部多普勒超声确诊AS患者40例以及正常者作为对照组40例,采用ELISA法测定血浆TIMP-1蛋白水平,荧光定量PCR检测外周血TIMP-1的mRNA表达,巢氏降落式甲基化特异性PCR(ntMSP)测定外周血TIMP-1基因DNA启动子区的甲基化程度。结果:AS组血浆TIMP-1含量明显降低,外周血TIMP-1的mRNA表达也显著低于对照组(P<0.05),TIMP-1基因启动子区DNA甲基化程度显著高于对照组(P<0.05)。结论:AS患者TIMP-1含量降低,其机制可能与TIMP-1基因启动子区高甲基化有关。; 杨程田珏蔡欣王磊曹成建杨晓玲陈久凯蒲雅洁姜怡邓; 关键词：DNA甲基化动脉粥样硬化

miRNA-143在同型半胱氨酸致血管平滑肌细胞增殖中作用的研究被引量：4: 2016年; 目的探讨miRNA-143在同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)致血管平滑肌细胞增殖中的作用。方法原代培养血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs),用不同浓度的Hcy和叶酸干预,MTT法检测VSMCs增殖情况,qRT-PCR法检测miR-143的表达,巢式降落式特异性甲基化PCR法分析miR-143启动子区的甲基化状态,分别用miR-143的前体和抑制物转染细胞检测细胞增殖。结果不同浓度的Hcy均可以引起VSMCs增殖活性增强,miR-143的mRNA表达降低,miR-143启动子区甲基化程度升高,以100μmol·L^(-1)Hcy最为明显(P<0.01),miR-143前体作用VSMCs后,细胞的增殖活性减弱(P<0.01),细胞转染miR-143的抑制物后细胞增殖活性明显增强(P<0.01)。结论 miR-143可以抑制VSMCs增殖,其机制可能与miR-143启动子区高甲基化有关。; 杨晓玲郭凤英马胜超杨安宁曹成建贾月霞李桂忠姜怡邓; 关键词：同型半胱氨酸血管平滑肌细胞增殖甲基化

miR-125b甲基化在同型半胱氨酸促进血管平滑肌细胞增殖中的作用被引量：8: 2015年; 目的探讨同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)促进血管平滑肌细胞增殖中miR-125b甲基化的作用。方法原代培养人脐静脉平滑肌细胞(VSMCs),并分为空白对照组(0μmol·L-1Hcy),不同浓度Hcy干预组(50、100、200及500μmol·L-1Hcy),以荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-125b的表达变化;利用miR-125b前体和抑制剂转染VSMCs后MTT法检测细胞增殖活性;生物信息学分析miR-125b启动子区Cp G岛分布情况,巢式降落式甲基特异性PCR(nt-MSP)法检测miR-125b甲基化状态的变化;并利用DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂胞苷(AZC)干预细胞后再次检测miR-125b的表达。结果与对照组相比,100,200及500μmol·L-1Hcy可使miR-125b的表达水平降低,差异有显著性(P<0.01);miR-125b前体可以抑制VSMCs增殖,而miR-125b抑制剂可以促进VSMCs增殖(P<0.01);以miR-125b基因上游3 700 bp作为研究对象,生物信息学分析发现miR-125b启动子区含有一个长度为792bp(1881-2672区域)的CpG岛,且在Hcy干预下miR-125b的甲基化水平增强(P<0.01);而用AZC干预后,发现miR-125b表达上调,差异有显著性(P<0.05)。结论 Hcy可能通过下调miR-125b表达从而促进VSMCs增殖,可能通过上调miR-125b基因甲基化水平从而下调miR-125b表达。; 刘现梅曹成建田珏赵丽孔繁琪周龙霞陈久凯王艳华杨晓玲贾月霞姜怡邓; 关键词：同型半胱氨酸 DNA甲基化血管平滑肌细胞动脉粥样硬化

IncRNA调控去卵巢骨质疏松大鼠BMSCs成骨分化的初步研究: 目的探讨IncRNA在去卵巢骨质疏松大鼠中调节骨髓间充质干细胞(BMSCs)定向分化的作用。方法选用3月龄雌性SD大鼠20只,随机平均分为2组:①假手术组(Control);②去卵巢手术(OVX)组,行双侧去卵巢手术,...; 曹成建俞小琴李汇明王景阁文继锐朱光光李良; 文献传递

同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞中PTEN甲基化的影响: 2014年; 目的:探讨同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)磷酸酶与张力蛋白同源缺失性基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten, PTEN)启动子区DNA甲基化的影响。方法原代培养血管平滑肌细胞(VSMCs),100 M Hcy刺激48h后,以实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PTEN mRNA表达水平的变化,western blot检测PTEN蛋白表达变化;生物信息学分析PTEN启动子区CpG岛,巢式降落时甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测PTEN DNA甲基化水平。结果与正常对照组相比(0 M Hcy),给予100 M Hcy刺激后,VSMCs中PTEN mRNA及蛋白表达水平均降低;其启动子区存在数个CpG岛,其DNA甲基化水平升高。结论 Hcy可下调VSMCs中PTEN的表达,而PTEN DNA启动子区的高甲基化可能在这一过程中起到关键调控作用。; 徐弋曹成建赵丽徐华韩学波杨晓玲田珏姜怡邓; 关键词：同型半胱氨酸 PTEN DNA甲基化血管平滑肌细胞动脉粥样硬化

ABCA1、ACAT1 DNA甲基化在Hcy致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出中作用研究被引量：9: 2014年; 目的探讨ABCA1、ACAT1 DNA甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出中的作用。方法复制泡沫细胞模型,用50、100、200、500μmol·L-1Hcy和100μmol·L-1Hcy+叶酸+维生素B12(100+F+V)干预,并设对照组(0μmol·L-1Hcy)。油红O染色观察泡沫细胞形成,巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测ABCA1、ACAT1 DNA甲基化水平,并分析两者比值变化;ELISA-like法检测DNA甲基转移酶(DNMTs)活性;化学比色法分析细胞内胆固醇含量。结果成功复制了泡沫细胞模型;给予不同浓度Hcy刺激后,ABCA1 DNA甲基化改变呈上升趋势,ACAT1 DNA甲基化改变呈下降趋势,给予100+F+V干预后可逆转上述变化,其中ABCA1 DNA甲基化改变更明显;同时,不同浓度Hcy可使泡沫细胞内DNMTs活性和胆固醇含量增加。结论 ABCA1和ACAT1 DNA甲基化的改变参与了Hcy致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出,DNMTs可能起关键调控作用。; 杨安宁王磊周龙霞赵丽王艳华蔡欣曹成建杨程陈久凯马文斌姜怡邓; 关键词：酰基辅酶A DNA甲基化胆固醇流出

低幅高频振动经ERα和Wnt3a调控大鼠骨形成: 目的探讨低幅高频振动(LMHFV)调控大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨分化的可能信号途径。方法选用4周龄雌性SD大鼠,原代培养BMSCs。选用第3代BMSCs,随机分为5组:(1) CON组,空白对照组;(2)...; 李汇明曹成建俞小琴王景阁朱光光李良; 文献传递

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