李为民
- 作品数：4 被引量：32H指数：3
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 马铃薯Y病毒蚜传辅助因子促进马铃薯X病毒长距离运输(英文)被引量：2
- 2001年
- 采用PCR和定点突变法 ,对马铃薯Y病毒中国株系 (ChinesestrainofpotatoYpotyvirus,PVY_C)蚜传辅助成分 (helpercomponentproteinase ,HC_Pro)基因中心区域的CCCT基序和PTK基序进行了定点改造 ,获得了 4种突变体。然后将突变体克隆到植物表达载体pBin438中 ,所得到的重组体通过根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)介导法转化了烟草 (NicotianatabacumL .cv .K32 6 )。Southernblotting和Westernblotting分析表明 4种突变体已经成功地整合到烟草的基因组中 ,并在蛋白水平上得到了表达。马铃薯X病毒 (potatoXpotexvirus,PVX)对转基因烟草的攻毒实验表明 ,4种突变体均使PVY_CHC_Pro严重丧失了促进PVX病毒粒子在寄主体内积累和提高PVX致病性的功能 ,说明CCCT、PTK基序为PVY_CHC_Pro介导PVX/PVY协生作用所必需。同时证明了HC_Pro具有增强PVX在寄主体内长距离运输的功能。
- 李为民鲁瑞芳郭明陈毓荃彭学贤
- 关键词：马铃薯Y病毒马铃薯X病毒基因突变协生作用病毒传播
- 马铃薯Y病毒蚜传辅助成分介导PVX/PVY协生作用被引量：6
- 2001年
- 构建了马铃薯Y病毒中国株系 (PVY C)蚜传辅助成分 (HC Pro)基因的正义、反义和缺失三种植物表达载体 ,通过农杆菌介导法转化烟草品种NC89。Southernblot分析表明 ,HC Pro基因及其突变体已经整合到烟草染色体中 ,Westernblot分析证明 ,正义HC Pro基因及其缺失突变体在转基因烟草中有表达产物。攻毒试验结果证明 ,转正义HC Pro基因及其缺失突变体不仅能够提高T1转基因烟草中PVY C的病毒积累和致病性 ,而且对异源病毒PVX具有同样的作用 ,而转反义HC Pro基因烟草对PVY C和PVX的致病性无影响。因此PVY CHC
- 鲁瑞芳郭明李为民梁小波彭学贤
- 关键词：马铃薯Y病毒HC-PRO基因协生作用
- 植物病毒协生作用及其分子机理被引量：19
- 2001年
- 植物病毒协生作用分布广 ,是造成农作物减产的重要原因之一。抗病毒转基因植物中协生作用的出现 ,严重限制了基因工程植物的商品化生产。本文对植物病毒协生作用的类型和特点、协生作用中病毒与病毒、病毒与环境间的相互作用及其分子机制进行了阐述。
- 鲁瑞芳李为民彭学贤
- 关键词：植物病毒协生作用分子机制
- 马铃薯Y病毒HC-Pro中心区域在病毒协生作用中的主导地位被引量：9
- 2001年
- 利用PCR方法获得了马铃薯病毒中国株系 (PVY C)HC Pro基因的 5个缺失突变体 ,构建了相应的植物表达载体。通过土壤农杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)介导法转化了烟草品种K32 6 (Nicotinatabacumcv.K32 6 )。PCR和Southernblot分析证明了HC Pro基因及其缺失突变体已整合到烟草基因组中 ,Westernblot表明它们在转基因烟草中得到了表达。侵染性试验发现HC Pro中心区域介导转基因烟草中PVY C和黄瓜花叶病毒 (CMV)、PVY C和马铃薯X病毒 (PVX)之间的协生作用 ,从而明确了PVY CHC
- 鲁瑞芳李为民王海云郭明彭学贤
- 关键词：马铃薯Y病毒HC-PRO基因突变协生作用
