李小波
- 作品数：35 被引量：47H指数：4
- 供职机构：广东药科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程文化科学更多>>
- 人源抗菌肽LL-37的原核表达及活性鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的:实现大肠杆菌高效可溶表达人源抗菌肽LL-37。方法:LL-37基因克隆至原核载体pET32a,于大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。运用相关生物信息学软件分析重组蛋白Trx-LL-37的理化性质、亲/疏水性、蛋白质二级结构及其可溶表达概率。实验还考察了不同诱导温度对重组蛋白可溶表达比例的影响。结果:生物信息学分析显示,Trx-LL-37分子量21.5kD,理论等电点6.3,物理性质稳定,二级结构简单,具有可溶表达倾向。重组蛋白最佳诱导温度为17℃,与37℃相比,可溶表达比例由37.2%提高至50.2%,并且总表达量也提高了5%左右。抑菌结果显示纯化产物对多种常见细菌的生长具有抑制作用。结论:可采用融合方式通过原核系统高效可溶表达LL-37,为LL-37的功能研究打下基础。
- 丁静沈娟朱家勇金小宝卢雪梅梅寒芳李小波
- 关键词：生物信息学分析原核表达抑菌活性
- 一种家蝇天蚕素-人溶菌酶融合蛋白及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种家蝇天蚕素-人溶菌酶融合蛋白及其制备方法和应用。本发明家蝇天蚕素-人溶菌酶融合蛋白的序列如SEQ ID No.1所示。该融合蛋白包含家蝇天蚕素的成熟肽序列，多肽接头序列和人溶菌酶的成熟肽序列。本发明根据家...
- 朱家勇卢雪梅金小宝马艳梅寒芳曾爱华褚夫江李小波王艳吴强肖明珠
- 家蝇抗菌肽Defensin在毕赤酵母中的表达及活性鉴定被引量：4
- 2010年
- 拟通过酵母系统表达家蝇抗菌肽Defensin基因,并初步鉴定其抗菌活性。采用限制性内切酶SacⅠ将分泌型重组表达质粒pPIC9K/Defensin线性化后,运用氯化锂转化法将其转入巴斯德毕赤酵母GS115中,行G418加压筛选和PCR鉴定;所得阳性转化子转至摇瓶,28℃条件下0.5%甲醇诱导表达,连续诱导培养4 d后,上清液进行Tricine-SDS-PAGE检测表达效果,并采用琼脂糖孔穴扩散法检测表达产物对大肠杆菌E.coliK12D31的抑制作用。结果显示,家蝇抗菌肽Defensin在毕赤酵母中得到了成功表达,表达产物对大肠杆菌E.coliK12D31的生长有抑制作用。说明酵母系统适合抗菌肽的表达。
- 金小宝王婷婷朱家勇李小波马艳褚夫江卢雪梅
- 关键词：家蝇抗菌肽DEFENSIN毕赤酵母
- 诺瓦克样病毒实时荧光定量PCR检测方法研究被引量：1
- 2010年
- 目的建立贝类中GⅡ型诺瓦克样病毒的实时荧光定量PCR检测方法。方法针对GⅡ型诺瓦克样病毒保守序列，设计出简并引物与探针，建立GⅡ型诺瓦克样病毒实时荧光定量PCR检测方法。并用该方法和常规PCR法对127份贝类标本进行检测。结果研究方法对GⅡ型诺瓦克样病毒检测准确和重复性好，灵敏度为10拷贝。标准曲线的线性范围为10^1～10^5拷贝，相关系数为0．9986，并且对贝类标本的检出率显著高于常规PCR。结论本研究建立了GⅡ型诺瓦克样病毒的实时荧光定量PCR检测方法，可用于贝类中GⅡ型诺瓦克样病毒污染状况及其突发事件的快速定量检测。
- 曾爱华李小波朱家勇高东微
- 关键词：贝类实时荧光定量PCR
- 一种具有抗菌和修复功能的融合蛋白及其生产方法和应用
- 本发明公开了一种具有抗菌和修复功能的融合蛋白及其生产方法和应用。所述融合基因是将人源抗菌肽基因和细胞生长因子基因通过一段疏水性多肽接头拼接得到；所述融合蛋白是将所述融合基因采用原核或酵母表达系统表达获得，其由人源抗菌肽、...
- 朱家勇卢雪梅沈娟马艳金小宝褚夫江李小波梅寒芳吴强肖明珠石大禹刘漫宇丁静
- 感染期血清外泌体在伯氏疟原虫红内期肝损伤中的作用
- 2022年
- 目的 探讨感染伯氏疟原虫(P. berghei)小鼠血清的外泌体对红内期肝组织病理损伤的影响。方法 采用血清型总外泌体分离试剂法富集感染伯氏疟原虫小鼠血清的外泌体,透射电镜和Western blot鉴定外泌体。选取雌性昆明小鼠48只,随机分为4组:正常对照组(8只)、外泌体组(8只,每天每只鼠经尾静脉注射50μg外泌体)、感染组[16只,每只鼠经腹腔注射10^(6)个感染疟原虫红细胞(iRBC)]及感染+外泌体组(16只,每只鼠感染10^(6)个iRBC,且每天每只鼠经尾静脉注射50μg外泌体)。检测各组小鼠的生存时间、红细胞原虫感染率和脑型疟发生率,H&E染色观察肝组织病理变化,免疫组化检测肝组织M1型巨噬细胞标记物(iNOS)表达,以及qPCR检测肝组织促炎症/抑炎症细胞因子的mRNA表达水平。结果 在感染后第7~9天,感染组和感染+外泌体组均产生脑型疟模型小鼠和肝组织出现明显病理损伤。与感染组相比,感染+外泌体组小鼠的半数生存期显著缩短(P<0.05),脑型疟发生率显著升高(P<0.05),肝组织病理损伤显著加重(P<0.05),M1型巨噬细胞标记物(iNOS)表达显著上调(P<0.05)。同时,尾静脉注射外泌体后,感染小鼠肝组织的促炎症细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)的mRNA水平显著上调(P<0.05),而抑炎症细胞因子(IL-4和IL-10)的mRNA水平显著下调(P<0.05)。结论 感染期血清外泌体可能通过促进肝组织巨噬细胞M1极化和诱导过度的促炎症反应,从而加重伯氏疟原虫红内期肝组织的病理损伤。
- 黄丽张鑫黎广智王永飞李小波金小宝黄博
- 关键词：伯氏疟原虫红内期外泌体
- 一种改善肠道功能有机蔬菜膳食纤维片的制备方法
- 本发明以富含膳食纤维的有机竹笋、有机芹菜或有机菠菜等为原料制备膳食纤维片，不添加任何有害有毒物质，保持了有机蔬菜原有的口味，属于天然绿色食品。制得的膳食纤维片可以有效改善肠道功能，对便秘引起的排便功能障碍、肠道菌群失衡及...
- 朱家勇褚夫江金小宝周录泳李小波梅寒芳
- 文献传递
- 一种富含抗菌肽蝇蛆蛋白粉及其制备方法和饲料添加剂
- 本发明公开了<B>一</B>种富含抗菌肽蝇蛆蛋白粉及其制备方法和饲料添加剂。所述的富含抗菌肽蝇蛆蛋白粉，由包括如下步骤的方法制备得到：（1）饲养成蝇，诱集产卵，孵化后，以饲料喂养幼虫；（2）对幼虫进行超声诱导；（3）继续...
- 朱家勇褚夫江金小宝李小波许银叶梅寒芳
- 海南省恶性疟原虫cg2基因ω重复区多态性与氯喹抗性关系分析
- 2004年
- 目的了解海南省恶性疟原虫cg2基因ω重复区多态性与氯喹抗性的关系。方法采用套式PCR技术特异扩增恶性疟原虫海南分离株cg2基因ω重复区 ,并对部分目的基因片段进行直接测序和序列分析。结果氯喹抗性株和敏感株均可扩增得到cg2基因ω重复区 ,大小约在 180bp至 5 5 0bp之间。
- 李小波江钢锋陈沛泉
- 关键词：恶性疟原虫氯喹抗性套式PCR
- 中药罗仙子指纹图谱的构建方法
- 本发明属于中药材分析技术领域，具体公开一种中药罗仙子指纹图谱的构建方法，包括罗仙子药材的水解、衍生化、高效液相色谱条件的选择及测定，成功构建了中药罗仙子指纹图谱，确定了保留时间0~35min共有24个共有特征峰，适用于日...
- 朱家勇褚夫江金小宝李小波梅寒芳吴玉萍
- 文献传递
