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李小波

作品数：1 被引量：0H指数：0
供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
相关领域：生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇氧化氮
  • 1篇氧化氮合成酶
  • 1篇一氧化氮
  • 1篇一氧化氮合成
  • 1篇一氧化氮合成...
  • 1篇诱导型
  • 1篇诱导型一氧化...
  • 1篇诱导型一氧化...
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
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  • 1篇基因
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  • 1篇基因真核表达
  • 1篇基因真核表达...
  • 1篇核表达
  • 1篇VP1
  • 1篇INOS

机构

  • 1篇哈尔滨医科大...

作者

  • 1篇史巧云
  • 1篇李小波
  • 1篇赵文然
  • 1篇张中海
  • 1篇张凤民
  • 1篇钟照华

传媒

  • 1篇国际免疫学杂...

年份

  • 1篇2007
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
iNOS基因和iNOS—VP1融合基因真核表达载体的构建及初步表达
2007年
目的 构建pcDNA3．1介导的诱导性一氧化氮合成酶（iNOS）的基因表达载体和pcDNA3．1介导的iNOS与柯萨奇病毒B组3型（CVB3）结构蛋白VP1融和基因的表达载体。方法 应用PCR扩增和DNA重组技术构建pcDNA3．1-iNOS和pcDNA3．1-iNOS—VP1表达载体；应用真核细胞转染技术及间接免疫荧光技术进行所构建的真核表达载体的初步表达和鉴定。结果 经PCR扩增技术用特异引物从质粒pKSiNOS分离编码iNOS开放阅读框架的cDNA，TA克隆于pMD19-T载体，根据设计引物时加入的酶切位点将插入片断亚克隆于表达载体pcDNA3．1；经PCR扩增技术用特异引物从质粒pCR2．1-VP1分离编码CVB3VP1结构蛋白的cDNA，TA克隆于pMD19-T载体，根据设计引物时加入的酶切位点将VP1亚克隆于iNOS的表达载体pcDNA3．1-iNOS，从而构建含有iNOS和VP1融合基因的真核表达载体。限制性内切酶分析、PCR鉴定和测序证实重组体peDNA3．1-iNOS和peDNA3．1-iN—OS—VP1插入片断的大小和方向正确且开放阅读框架的读码框不变；重组质粒peDNA3．1-iNOS和peDNA3．1-iNOS．VP1在HeLa细胞中均有表达，但表达效率较低。结论 获得含iNOS基因和iNOS—VP1融合基因的真核表达载体，并将重组质粒进行了初步表达，为体外iNOS抗CVB3作用的研究奠定了物质基础。
史巧云钟照华张中海赵文然李小波张凤民
关键词：诱导型一氧化氮合成酶真核表达载体
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