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嗅觉的分子生物学基础被引量：2: 2007年; 嗅觉是动物对挥发性物质的感觉过程。嗅质分子、嗅质结合蛋白以及嗅质受体是完成嗅觉感受最初阶段的3个要素。嗅质分子一般为小分子挥发性物质,需要先与嗅质结合蛋白结合以助溶,再与受体结合,通过与视觉类似的过程在嗅觉神经元中引起电信号。该电信号传至中枢神经系统,产生嗅觉。嗅质受体编码基因数目庞大,其假基因化程度与物种生存对嗅觉的依赖程度存在一定关系。; 李继刚郑伟吴岷; 关键词：嗅觉

马铃薯晚疫病抗性相关基因StDIR1的克隆与表达被引量：4: 2012年; 马铃薯是世界性粮蔬作物。致病疫霉引起的晚疫病则是马铃薯育种所面临的最严峻问题之一,因此,分离和利用马铃薯晚疫病抗性基因获得抗病新品种是马铃薯育种的重要目标。首先在连翘中发现的一类与木质素合成相关的Dirigent基因可能在植物抗病虫害过程中起重要作用。试验根据马铃薯的EST序列信息设计特异性引物,并通过RT-PCR和RACE技术获得了一条全长为729 bp的Dirigent基因cDNA序列,命名为StDIR1;该cDNA编码一个包含191个氨基酸的蛋白质多肽;系统进化分析表明,该多肽是一种Dirigent-like蛋白,属于DIR-b亚群,与陆地棉Di-rigent-like protein 1相似性高达76%,同一性为62%。利用半定量RT-PCR技术分析发现,致病疫霉、H2O2以及NO可以诱导该基因不同程度的上调表达。组织特异性分析表明,该基因在马铃薯根组织中表达量最高,而在茎、叶、花以及块茎组织中的表达量偏低。首次表明StDIR1基因与马铃薯对致病疫霉的侵染应答具有相关性。; 张洪伟李继刚郑建坡曲占良; 关键词：马铃薯晚疫病植物抗病

几丁质合酶基因用于棉铃虫防治初步研究: 几丁质是昆虫表皮和围食膜的主要成分之一，植物和高等动物中不存在;其代谢是昆虫的重要生化代谢过程之一.通过RT-PCR技术在棉铃虫克隆出两个几丁质合酶基因：HaCHS1和HaCHS2;并得到了HaCHS1的两个剪接变体，分...; 韩国英张亭朱笑婷刘路萌李继刚; 关键词：杀虫基因棉铃虫 RNAI 植物基因工程

GC克隆载体的制备及其克隆效率研究: 2013年; 为了研究GC克隆技术的克隆效率,从商品化T载体出发,构建了一个含有2个XcmI位点的质粒;通过PCR技术引入突变后,经XcmI酶切得到3′端各突出一个C碱基的线性化载体。随后将该线性化载体与Taq酶催化得到的PCR产物进行了连接测试。结果表明:GC克隆效率低于同等条件下的TA克隆,对不同5′端碱基引物没有表现出明显偏好性。该研究为GC克隆技术在分子生物学实验上的应用提供了一定的理论依据。; 李继刚杨忠祥张虎孙希哲; 关键词：PCR产物酶切克隆效率

一种5,6-二羟基吲哚羧酸的提取和检测方法: 本发明提供了一种5,6‑二羟基吲哚羧酸的提取和检测方法，包括如下步骤：利用C18色谱柱实施分离，并利用紫外可见吸收检测器进行定量分析；色谱条件为：流动相由甲醇、乙腈和0.3%~0.5%的甲酸水组成，三者的体积比为50∶1...; 管越强张娜张耀红李继刚; 文献传递

马铃薯StHb1蛋白的亚细胞定位: 2012年; 为了研究马铃薯StHb1蛋白的亚细胞定位情况,采用RT-PCR技术克隆到马铃薯StHb1基因cDNA序列,并成功构建了StHb1基因与绿色荧光蛋白基因的融合表达载体pBI121-StHb1-GFP.利用农杆菌介导法将重组载体转化洋葱内表皮细胞,通过荧光显微镜观察融合蛋白的瞬时表达以确定StHb1蛋白在细胞内的分布.结果表明StHb1蛋白主要分布于细胞核中.; 李继刚郑建坡曲占良; 关键词：亚细胞定位融合表达载体农杆菌介导转化

一种双基因共表达重组载体及其构建方法和在三孢布拉霉中的应用: 本发明公开了一种双基因共表达重组载体，在初始载体中携带有基因表达框序列<i>syn</i>，所述基因表达框序列<i>syn</i>含有：终止子—多克隆位点—双向启动子序列P...; 张利平高新芝汤晖李继刚杨普城

蚯蚓EFE基因的番茄基因工程研究: 李继刚柳峰松米国桥李秀敏郑伟; 蚯蚓纤溶酶(EarthwormFibrinolyticEnzymes，简称EFE)是一组存在于蚯蚓体内的丝氨酸蛋白水解酶，具有纤维蛋白溶解活性或纤溶酶原激活活性，既能溶解陈旧血栓又能抑制新血栓形成，可以口服，已广泛用于临...; 关键词：; 关键词：蚯蚓纤溶酶番茄基因工程

干扰型mRNA的大规模筛选与开发研究: 李继刚邢朝晖董丽君陈永利夏洁函郑建坡张洪伟; 该研究选用Solexa技术首次完成了棉铃虫幼虫的转录组测序。共计得到原始测序数据7.2G，设定读长101bp；按测序质量、序列模糊度和实际读长进行整理后，共得7千万条原始序列，平均长度93.4bp；共组装成11.6万个c...; 关键词：; 关键词：棉铃虫防治害虫防治生物信息学方法

一种基因定向克隆用TC载体及其制备和使用方法: 本发明公开了一种基因定向克隆用TC载体及其制备和使用方法，该载体两个末端的3’端各突出一个碱基，其中一个3’端突出碱基为C碱基，另一个3’端突出碱基为T碱基。其制备方法包括：a.填充序列的引物设计，由此得到引物1和引物2...; 李继刚李秀敏杨忠祥夏洁函; 文献传递

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