李美波
- 作品数：12 被引量：46H指数：4
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- 虎杖中白藜芦醇诱导肝癌细胞HepG-2凋亡及其对Bcl-2和Bax蛋白表达的影响被引量：14
- 2014年
- 目的:探讨虎杖白藜芦醇对人肝癌HepG-2细胞增殖和凋亡。方法:采用微波辅助法提取虎杖中白藜芦醇,取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,药物组用12.5,25,50,100μmol·L-1不同质量浓度的白藜芦醇作用人肝癌HepG-2细胞24,48,72 h后,采用MTT法检测虎杖白藜芦醇对人肝癌HepG-2细胞生长抑制作用;Hoechst 33342染色法荧光显微镜观察细胞的形态学变化,Western blot法检测不同浓度白藜芦醇作用HepG-2细胞48 h后B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2相关蛋白(Bax)的表达。结果:MTT实验结果表明,不同浓度白藜芦醇对人肝癌HepG-2的生长具有显著的抑制作用,呈现时间依赖性和剂量依赖性,当白藜芦醇质量浓度达到50,100μmol·L-1时,其对HepG-2细胞增殖抑制作用明显增强,与对照组相比,差异具有显著(P<0.01);荧光染色观察随着药物浓度增加,细胞凋亡数量增多,当50,100μmol·L-1白藜芦醇作用于人肝癌HepG-2细胞48 h可出现典型凋亡小体。Western blot法检测结果显示:随着白藜芦醇浓度的增加Bcl-2蛋白的表达逐渐降低,Bax蛋白的表达逐渐增加。结论:虎杖中白藜芦醇可以有效地抑制人肝癌HepG-2细胞增殖,诱导细胞凋亡,其诱导该细胞凋亡的作用机制可能是通过下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白的表达。
- 顾生玖李美波朱开梅
- 关键词：肝癌HEPG-2细胞BCL-2BAX
- 紫杉醇长循环热敏脂质体对小鼠Lewis肺癌作用的实验研究
- 目的：探讨紫杉醇长循环热敏脂质体(PLTL)联合局部热疗在细胞水平对Lewis肺癌细胞的细胞毒性作用以及诱导细胞凋亡的能力，并研究PLTL联合局部热疗在Lewis肺癌荷瘤小鼠体内抑制肿瘤生长的效果。通过长循环热敏脂质体联...
- 李美波
- 关键词：肺腺肿瘤药物化疗紫杉醇制剂
- 文献传递
- 紫杉醇长循环热敏脂质体的制备方法
- 本发明公开了紫杉醇长循环热敏脂质体的制备方法，包括以下步骤：称取处方量的氢化大豆磷脂(HSPC)‑胆固醇(CH)，比例HSPC﹕CH=3﹕1(质量比，药脂比1:33，摩尔比）置于茄形瓶中；按三氯甲烷:甲醇=3:1加入适量...
- 顾生玖朱开梅赵文鹏李美波
- 文献传递
- 构树叶总黄酮诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡机制探讨被引量：4
- 2014年
- 目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)诱导肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。方法:采用MTT法检测浓度分别为3、6、9和12g/L TFBP作用于HepG-2细胞24、48和72h后对细胞生长的影响;Hoechst33342荧光染色法观察3、6、9和12g/L TFBP作用于HepG-2细胞48h后细胞形态学的变化;免疫细胞化学检测3、6、9和12g/L TFBP作用于HepG-2细胞48h后凋亡相关基因Bcl-2及Bax蛋白表达;比色法检测3、6、9和12g/L TFBP作用于HepG-2细胞48h后Caspase-3活性。结果:随着药物浓度的增大,TFBP抑制HepG-2细胞增殖的作用逐渐增强,呈剂量依赖性,在3、6、9和12g/L的TFBP作用于HepG-2细胞24h后,HepG-2细胞增殖抑制率分别为7.63%、11.86%、19.02%和21.81%,F=5.16,P=0.034;48h后分别为20.20%、29.44%、39.21%和43.96%,F=11.28,P=0.003;72h后分别为27.24%、34.70%、52.46%和64.72%,F=86.78,P<0.001。Hoechst33342荧光染色法可见,随着药物浓度的增大,细胞的生长变慢,胞质变疏松,细胞核皱缩,深染,出现典型的细胞凋亡形态。免疫细胞化学检测可见,经不同浓度TFBP处理HepG-2细胞48h后,HepG-2细胞Bcl-2蛋白表达随着浓度的增加而逐渐变浅,Bax蛋白表达随着浓度的增加而逐渐变深,Bcl和Bax蛋白的阳性表达率与对照组比较差异均有统计学意义,F值分别为6.563和30.883,P值分别为0.012和0.001。比色法检测Caspase-3活性显示,对照组与3、6、9和12g/L的TFBP对HepG-2细胞作用48h后,Caspase-3酶活性分别为(1.38±2.13)、(3.58±2.21)、(4.95±3.61)、(5.25±1.41)和(5.75±2.24)U/mg,随着TFBP浓度的增加,Caspase-3酶活性显著增高,当TFBP浓度为6、9和12g/L时,各实验组与对照组比较差异有统计学意义,F=5.42,P=0.003。结论:TFBP在体外对肝癌HepG-2细胞有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。其诱导凋亡的机制可能与其下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白表达以及增强Caspase-3的活性有关。
- 朱开梅李美波许有瑞刘建楠顾生玖
- 关键词：BCL-2BAXCASPASE-3
- 构树叶总黄酮提取物诱导人肝癌细胞HepG2细胞凋亡及机制被引量：3
- 2013年
- 目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)对人肝癌细胞HepG2的生长抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法:采用MTT法检测细胞生长抑制率;Hoechst 33342荧光染色法荧光显微镜观察细胞的形态变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;RT-PCR法检测基因Bcl-2、Bax mRNA的表达;免疫细胞化学SP法检测基因Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:MTT结果显示,TFBP对HepG2有增殖抑制作用,并存在浓度和时间依赖关系;Hoechst 33342荧光染色可观察到核浓缩及核碎裂等细胞凋亡特征;流式细胞仪结果显示,细胞出现凋亡形态改变,且细胞被阻滞于G2/M期,随浓度增加,凋亡率逐渐增加;RT-PCR和SP结果显示,随着TFBP浓度增加Bcl-2 mRNA和蛋白表达逐渐减弱,Bax mRNA和蛋白的表达逐渐增强。结论:TFBP在体外对肝癌细胞HepG2有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。其诱导凋亡的机制可能与其下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白的表达有关。
- 朱开梅李美波骆彩珍刘建楠顾生玖
- 关键词：HEPG2细胞株细胞凋亡BCL-2BAX
- 构树叶总黄酮对人肝癌HepG-2细胞增殖及其细胞周期的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法:取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,药物组用3,6,9,12 g·L-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细胞24,48,72 h后,采用MTT法检测细胞生长抑制率;Hoechst 33342荧光染色法荧光显微镜观察细胞的形态变化并用流式细胞仪检测细胞的周期及细胞凋亡率。结果:MTT结果显示,各质量浓度3,6,9,12 g·L-1的TFBP对HepG-2有增殖抑制作用,并存在浓度和时间依赖关系,3,6,9,12 g·L-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细48 h后,细胞增殖抑制率分别为20.2%,29.44%,39.21%,43.96%;9 g·L-1的TFBP作用HepG-2细胞72 h后,细胞增殖抑制率可达52.46%,与对照组具有显著性差异(P<0.05);Hoechst 33342荧光染色可观察到核浓缩及核碎裂等典型细胞凋亡特征及凋亡小体;流式细胞仪结果显示,随着TFBP作用浓度的增加,加药组细胞凋亡率加药组凋亡率与对照组相,有显著差异(P<0.01),G0/G1期细胞逐渐减少,G2/M期细胞数逐渐增多,与对照组比较差异有显著性(P<0.05),细胞周期被阻滞在G2/M期。结论:TFBP在体外对肝癌细胞HepG-2有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用,其抑制机制可能和诱导细胞凋亡与阻滞细胞周期有关。
- 朱开梅李美波骆彩珍刘建楠顾生玖
- 紫杉醇长循环热敏脂质体对Lewis肺癌荷瘤鼠的药效学被引量：1
- 2015年
- 目的:考察紫杉醇长循环热敏脂质体(PLTL)对Lewis肺癌荷瘤小鼠的药效学。方法:构建Lewis肺癌荷瘤肿瘤模型,随机分为5组:对照组、加热组、紫杉醇注射液(PTX)组、紫杉醇普通热敏脂质体(PTL)组和PLTL组。治疗期间观察小鼠生活状态,检测瘤重抑瘤率;将肿瘤组织切片进行HE染色,观察细胞形态学变化;采用流式细胞仪和TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡率;分析荷瘤小鼠生存状况,绘制荷瘤小鼠生存曲线。结果:PTX、PTL组和PLTL组的瘤重抑廇率分别为46.15%、51.48%和70.12%,流式细胞术和TUNEL法显示PTX、PTL和PLTL均可明显抑制荷瘤小鼠肿瘤生长,且凋亡率逐渐增强;肿瘤组织切片HE染色发现,PLTL可明显抑制肿瘤生长,并在肿瘤局部产生炎症反应;生存实验分析显示PLTL可减小紫杉醇的毒副作用,延长小鼠生存期。结论:PLTL与PTX和PTL相比,PLTL具有明显的热敏靶向性,PLTL与局部热疗相结合可显著增强紫杉醇的抗癌活性。
- 顾生玖李美波赵文鹏朱开梅
- 关键词：紫杉醇长循环热敏脂质体热敏脂质体热疗
- 紫杉醇长循环热敏脂质体对Lewis肺癌荷瘤鼠的药效学研究被引量：2
- 2014年
- 目的:考察紫杉醇长循环热敏脂质体(PLTL)对Lewis肺癌荷瘤小鼠的药效学。方法:建立Lewis肺癌肿瘤模型,随机分为5组,对照组、加热组、紫杉醇注射液(PTX)组、紫杉醇热敏脂质体(PTL)组和PLTL组,局部联合热疗,观察小鼠生活状态,监测肿瘤的体积及瘤重,对肿瘤组织切片进行HE染色,观察肿瘤细胞的形态学变化,采用流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡率。结果:PTX、PTL组和PLTL组的抑廇率分别为48.87%、57.22%和78.87%,肿瘤细胞凋亡率分别为(42.7±3.8)%,(54.6±2.9)%和(69.7±5.0)%。结论 :PLTL与PTX和PTL相比,PLTL具有明显的热敏靶向性,与局部热疗相结合显著提高了紫杉醇的治疗效果。
- 李美波顾生玖赵文鹏朱开梅
- 关键词：紫杉醇长循环热敏脂质体热敏脂质体热疗
- 构树叶总黄酮调控Bcl-2与Bax蛋白表达及caspase-3活性诱导HepG-2细胞凋亡的研究被引量：14
- 2014年
- 目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)诱导HepG-2细胞凋亡的机制。方法:采用体外细胞培养方法,取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,药物组用3,6,9,12 g·L-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细胞24,48,72 h后,应用MTT法检测TFBP对人肝癌细胞HepG-2生长抑制作用;Hoechst 33342荧光染色法荧光显微镜观察各浓度TFBP作用细胞48 h后的细胞的形态变化;通过免疫细胞化学SP法检测凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;比色法检测半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性。结果:TFBP在体外对人肝癌细胞HepG-2有较强的浓度依赖性和时间依赖性抑制作用,9,12 g·L-1的TFBP作用HepG-2细胞72 h后,细胞增殖抑制率可分别达52.46%,64.72%,与对照组具有显著性差异(P<0.01),可诱导细胞凋亡,质量浓度9,12 g·L-1的TFBP作用HepG-2细胞48 h后就可出现典型的凋亡小体,TFBP可升高caspase-3活性,并具有浓度效应,同时还可下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2/Bax。结论:TFBP在体外对肝癌细胞HepG-2有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。其诱导凋亡的机制可能与其下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白的表达,下调Bcl-2/Bax以及增强caspase-3的活性有关。
- 朱开梅陈丹李美波许有瑞刘建楠顾生玖
- 关键词：细胞凋亡半胱氨酸蛋白酶-3
- 虎杖白藜芦醇对人肝癌HepG-2细胞株增殖和生长周期的影响
- 2015年
- 目的探讨虎杖中白藜芦醇对人肝癌Hep G-2细胞株增殖和生长周期的影响。方法采用微波辅助法提取虎杖中白藜芦醇,将12.5,25.0,50.0,100.0μmol·L-1白藜芦醇作用人肝癌Hep G-2细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测虎杖中白藜芦醇对肝癌细胞Hep G-2细胞抑制增殖作用,在倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术(FCM)检测细胞周期的分布。结果虎杖中白藜芦醇能显著抑制Hep G-2细胞的生长,并呈现时间-浓度依赖性。流式细胞仪结果显示,白藜芦醇作用于细胞Hep G-2且细胞被阻滞于S期,呈现出剂量依赖性。不同药物浓度白藜芦醇(12.5,25.0,50.0,100.0μmol·L-1)作用人肝癌Hep G-2细胞株48 h后,随着药物浓度的增大,G0/G1期的比例逐渐减小,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。而实验组细胞S期的比例随着浓度增大而增加,分别达到(44.82±1.21)%,(54.00±1.71)%,(65.21±3.66)%,(77.50±4.21)%,与对照组(34.75±3.92)%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论虎杖中白藜芦醇能明显抑制肝癌Hep G-2细胞的增殖,并诱导其细胞凋亡,可引起肝癌Hep G-2细胞的S期阻滞。
- 顾生玖李美波许有瑞朱开梅
- 关键词：虎杖白藜芦醇HEP细胞周期
