李菁 作品数:6 被引量:44 H指数:4 供职机构: 中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 转基因生物新品种培育专项 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
基因工程抗体研究进展 被引量:20 2009年 随着对分子生物学研究和抗体分子结构功能的深入研究,利用细胞工程和遗传工程对抗体分子进行改建并赋予其新的功能,进而开发了新的抗体应用领域,使单克隆抗体技术又向前发展了一步。基因工程抗体是按人类设计所重新组装的新型抗体分子,可保留或增加天然抗体的特异性和主要生物学活性,去除或减少无关结构,从而可克服单克隆抗体在临床应用方面的缺陷。 李菁 林彤 宋帅 高闪电 邵军军 丛国政 独军政 常惠芸关键词:基因工程抗体 人源化抗体 小分子抗体 核糖体展示 Expression,Purification and Activity Detection of VP1 of A-type FMDV 被引量:4 2010年 [Objective] The research aimed to induce the expression of FMDV structural protein VP1 in E.coli and purify the protein,then detect the activity.[Method] The fragment coding VP1 was amplified by PCR and doubly digested with BamH Ⅰ and XhoⅠ,then cloned into expression vector pGEX-4T-1 and pPROExHTb respectively to get recombinant plasmid pGEX-4T-1-VP1 and pPROExHTb-VP1.The recombinant plasmid pGEX-4T-1-VP1 and pPROExHTb-VP1 was transformed into E.coli BL21(DE3)and induced by IPTG,fusion protein was identifie... 李菁 林彤 高闪电 丛国正 独军政 邵军军 常惠芸Asia I型口蹄疫病毒中和表位与羊IgG重链恒定区的融合表达及免疫原性测定 被引量:1 2010年 VP1蛋白是口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)诱导机体产生抗病毒感染免疫的主要蛋白,含有病毒的若干中和表位。本研究设计和合成了由AsiaI型FMDVVP1蛋白136~160aa和198~211aa两个表位组成的重复串联表位的编码基因,并克隆了羊IgG重链恒定区编码基因。利用BamHI、EcoRI和XhoI位点将2个基因片段依次克隆到pPROExHTb载体,构建成重组质粒pPRO-FshIgG,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG诱导表达得到融合蛋白FshIgG。100μgFshIgG蛋白免疫豚鼠后刺激豚鼠产生了高效价的FMDV中和抗体,而且使这些免疫豚鼠在用200ID50剂量FMDV攻击时得到了完全保护。由此证明,羊IgG重链恒定区蛋白能够作为FMDV表位肽的载体,而融合蛋白FshIgG可成为一种口蹄疫表位疫苗候选物用于口蹄疫的预防。 王景锋 邵军军 李菁 高闪电 独军政 丛国正 林彤 常惠芸关键词:口蹄疫病毒 抗原表位 A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达·纯化及活性检测 被引量:4 2010年 [目的]表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1,并对其进行纯化和相关活性的检测。[方法]以A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组质粒pGEM-VP1为模板,用特异性表达引物扩增其编码区,经酶切后与pGEX-4T-1、pPROExHTb等原核表达载体相连,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达菌株,经IPTG诱导表达,以实现VP1蛋白的表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达并对2种载体重组菌进行超声裂解,取上清和沉淀电泳,用金属螯合亲合层析法对His-VP1进行纯化。[结果]SDS-PAGE电泳分析显示pPRO-VP1诱导后目的条带为33ku,与预期结果相符;目的蛋白纯化后,在电泳图片上显示较为清晰的单一条带;His-VP1可与A型口蹄疫病毒豚鼠灭活阳性血清发生特异性的反应。[结论]表达及纯化了具有高特异性的A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1,为深入研究结构蛋白VP1在口蹄疫病毒致病机制中的作用奠定了基础。 李菁 林彤 高闪电 丛国正 独军政 邵军军 常惠芸关键词:A型口蹄疫病毒 口蹄疫病毒L^(pro)蛋白的致病机理 2010年 李菁 林彤 宋帅 高闪电 邵军军 丛国政 独军政 常惠芸关键词:口蹄疫病毒 致病机理 动物疫病 传染性 发病率 病毒固有免疫识别受体研究进展 被引量:15 2009年 固有免疫应答是机体抵御病毒入侵的第一道防线,其前提则是病毒固有免疫识别受体对病毒感染相关模式分子的识别。目前病毒固有免疫识别受体主要是Toll样受体家族和RIG样受体家族的成员。现就这些受体的特征及其在识别病毒感染相关模式分子过程中的作用作一综述。 王景锋 邵军军 常惠芸 高闪电 李菁关键词:固有免疫 TLR