杨毅
- 作品数：57 被引量：200H指数：8
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- 发文基金：国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 趋化因子受体4下调抑制乳腺癌转移的研究被引量：10
- 2007年
- 目的采用RNA干扰(RNAi)技术封闭乳腺癌细胞趋化因子受体4(CXCR4)基因,观察封闭效果及癌细胞的体外侵袭能力的变化及转移相关基因的变化。方法设计3段siRNA,分别构建pSilencer封闭载体,转染高表达CXCR4基因的乳腺癌细胞系T47D,通过流式细胞术及定量聚合酶链反应(PCR)的方法分别从蛋白水平和转录水平检测CXCR4表达率的改变;采用Matri- gel对转染后乳腺癌细胞体外侵袭能力的变化进行检测,应用定量PCR分析其他转移相关基因的变化。结果3组转染CXCR4-siRNA细胞定量PCR检测CXCR4抑制率分别为95.67%、85.94%、98.25%。流式细胞仪检测CXCR4表达率分别为4.95%、11.10%、5.53%,与转染Control-siRNA细胞比较差异有统计学意义(P<0.01)。3组封闭细胞的侵袭指数分别为0.037、0.290和0.188。封闭细胞E-钙黏蛋白(E-cad)表达有增加趋势,胰岛素样生长因子结合蛋白-5(IGFBP-5)表达有下降的趋势。结论CXCR4在乳腺癌转移中具有重要作用,mRNA具有强大的基因敲除能力,为肿瘤转移的基因治疗奠定实验基础。
- 张霖史玉荣魏熙胤杨毅牛瑞芳姚智
- 关键词：乳腺癌趋化因子受体小干扰RNA
- 无线粒体DNA乳腺癌细胞系建立及生物学特征研究
- 史玉荣牛瑞芳于满魏熙胤杨毅
- 本实验利用低剂量EtBr（50ng/ml）抑制mtDNA复制的方法，尝试筛选并建立一株不含mtDNA的乳腺癌MCF-7ρ0细胞系，并探讨它在生长特征、细胞周期、早期凋亡和超微结构等方面与对照MCF-7细胞的差别。最终建立...
- 关键词：
- 关键词：乳腺癌MTDNA溴化乙啶生物学特征
- SFRP1下调与大肠肿瘤发生的关系研究(英文)
- 2008年
- 目的:探讨SFRP1与大肠癌发生的关系。方法: 运用半定量RT-PCR方法及免疫组化方法检测SFRP1、β-catenin、E-cad在正常大肠粘膜、大肠腺瘤以及大肠腺癌中的表达。结果:大肠腺癌、腺瘤组织的β-catenin、E-cad胞膜表达不同程度缺失,β-catenin呈胞质和胞核异位表达,腺瘤β-catenin的异位表达率为87.5%,低于大肠腺癌(100%,P<0.05)。大肠腺瘤β-catenin、E-cad胞膜表达缺失率分别为37.5%、37.5%,低于大肠腺癌(58.8%、76.4%,P均<0.05)。半定量RT-PCR显示SFRP1基因在大肠腺瘤、大肠腺癌组织中的表达水平均明显低于大肠正常组织的对照组,且大肠腺癌组织中SFRP1基因的表达水平低于大肠腺瘤(P<0.05)。结论:SFRP1基因下调使其拮抗WNT途径的功能削弱,导致Wnt的持续存在、其下游基因β-catenin、E-cad异常表达,从而导致大肠粘膜细胞获得恶变潜能。故SFRPl可能为预防大肠肿瘤的发生、大肠肿瘤的早期诊断提供新思路,并为防治大肠肿瘤提供新靶标和实验依据。
- 辛芝孙蕾娜战忠利孙保存杨毅
- 关键词：结直肠癌肿瘤形成病理机制
- 津白Ⅱ小鼠体内筛选乳腺癌特异性结合噬菌体融合肽被引量：1
- 2008年
- 目的:利用噬菌体随机肽库,筛选特异性靶向乳腺癌的肽段,为乳腺癌的定位诊断和靶向治疗提供理论依据。方法:建立津白Ⅱ(TAⅡ)小鼠自发乳腺癌模型,并在小鼠体内对噬菌体十二随机肽库进行4轮筛选,回收肿瘤和对照组织(肝)的噬菌体并计数,同时用免疫组织化学染色法,鉴定噬菌体展示肽的特异性。结果:筛选出自发乳腺癌特异性结合的噬菌体,其结合乳腺癌细胞的能力为对照组织的14倍,随机挑选克隆测序鉴定,结果表明十二肽ASANPF-PTKALL出现次数最多,免疫组化染色进一步证明该噬菌体能特异结合于乳腺癌细胞。结论:4次小鼠体内筛选得到的短肽ASANPFPTKALL能够特异结合于乳腺癌组织,为下一步的定位诊断和靶向治疗研究奠定了基础。
- 王瑞张霖张宏恺魏熙胤杨毅李萌辉曹又佳牛瑞芳
- 关键词：噬菌体展示乳腺癌细胞小鼠
- Annexin a2表达对人乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响
- ＜正＞目的研究Annexin a2的表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法采用小干扰RNA技术下调人乳腺癌细胞中Annexin a2的表达,并筛选单克隆细胞株,采用划痕实验、侵袭实验和噻唑...
- 杨毅魏熙胤张飞曹淑贞张霖牛瑞芳
- 文献传递
- siRNA沉默CXCR4基因的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的:设计和构建趋化因子受体4(CXCR4)基因的小干扰RNA质粒,并初步验证其对靶基因的抑制作用。方法:选择高表达CXCR4受体的人乳腺癌细胞系T47D作为研究对象。将预先设计的3段siRNA分别连入质粒载体,然后转化大肠杆菌,经过克隆、扩增、纯化后转染到T47D细胞中,G418筛选稳定表达细胞株,采用流式细胞术从蛋白水平检测CXCR4的表达率,实时定量PCR从基因转录水平检测CXCR4基因的表达率。结果:流式细胞术检测结果显示,T47D细胞经特异性siRNA作用后CXCR4的表达率由69.00%分别下降到4.95%、11.30%、5.53%。实时相对定量PCR检测结果显示,siRNA作用的细胞其CXCR4基因转录的抑制率分别为95.67%、85.94%、98.25%。结论:siRNA能够引发人乳腺癌细胞系T47D的CXCR4基因沉默,为进一步探讨CXCR4基因在乳腺癌转移中的作用奠定前期实验基础,也为siRNA作为一种可能的治疗手段提供了理论依据。
- 张霖史玉荣魏熙胤杨毅牛瑞芳姚智
- 关键词：乳腺癌CXCR4小干扰RNA基因表达
- 流式细胞仪检测甘草多糖对小鼠S-180肉瘤的凋亡诱导作用被引量：8
- 2005年
- 随着单克隆抗体及标记技术的发展,流式细胞术(FlowCytometry,FCM)检测细胞凋亡技术已广为使用,为探讨中药甘草多糖抑瘤作用及其机制,本文应用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,结果表明甘草多糖抑制肿瘤生长可能与诱导细胞凋亡有关。
- 史玉荣魏熙胤杨毅牛瑞芳宋飞
- 关键词：甘草多糖S-180肉瘤凋亡流式细胞仪肉瘤小鼠
- 中心体相关激酶Nek2与乳腺癌前病变及早期癌变的相关性研究被引量：5
- 2015年
- 目的:探讨中心体相关蛋白激酶Nek2蛋白及DNA水平在乳腺上皮恶变过程中各阶段的作用。方法:选取正常乳腺组织20例、重度不典型导管上皮增生/外周型乳头状瘤病伴导管上皮不典型增生20例、导管内癌20例,浸润性导管癌20例。采用免疫组织化学的方法分别检测4组样本组织冻切片Nek2蛋白的表达情况,采用荧光实时定量聚合酶链式反应检测4组样本组织Nek2拷贝数扩增情况。结果:Nek2蛋白表达在4组样本之间差异性显著(P=0.000)。荧光实时定量PCR结果显示Nek2的DNA拷贝数在各组之间的表达有统计学差异(P=0.000)。Nek2蛋白表达随着肿瘤恶性程度的提高而增加,同时DNA拷贝数随着肿瘤恶性程度的提高而扩增,二者存在正相关性(r=0.887,P<0.01)。结论:Nek2蛋白表达在导管内癌组显著高于癌前病变组,说明Nek2蛋白表达免疫组化检测结果可作为乳腺癌早期诊断和高危人群筛选的辅助指标。Nek2基因扩增同蛋白表达呈正相关性,变化趋势一致,提示蛋白过表达可能来自于基因扩增。Nek2异常同中心体异常变化趋势一致,作为中心体相关激酶,通过对中心体的调节作用,可造成中心体数量、结构和功能的异常,从而导致肿瘤的发生。
- 杨雪牛昀王慧牛瑞芳杨毅刘易欣
- 关键词：NEK2乳腺癌癌前病变早期癌变
- 热疗对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响被引量：7
- 2004年
- 目的:观察不同加温温度对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。方法:人宫颈癌Hela细胞株常规方法培养,采用水浴加热法(温度为41℃、42.5℃、43.5℃、)对细胞进行加温处理,处理后继续培养24h。用流式细胞仪检测细胞凋亡,单细胞凝胶电泳(singlecellgelelectrophoresis,SCGE)法检测DNA受损状态。结果:随着温度的增加细胞凋亡率增加,42.5℃、43.5℃加温1h后细胞凋亡率最高分别为30.7%和34.6,坏死细胞分别为13.2%和29.6%。单细胞凝胶电泳发现42.5℃加温1h后40.0%的细胞有DNA损伤,43.5℃加温1h后80.0%以上的细胞DNA损伤,而41℃加温处理1h后仅有20.0%细胞DNA受损。结论:单独加温处理1h可诱导细胞凋亡,并导致细胞DNA损伤。
- 史玉荣李丰彤于满魏熙胤牛瑞芳杨毅
- 关键词：宫颈癌HELA细胞热疗细胞凋亡细胞培养DNA损伤
- 肝细胞癌微小转移检测方法的建立及临床应用
- 牛瑞芳杨毅魏熙胤郝继辉史玉荣黄建英
- 该研究采用巢式RT-PCR检测肝细胞特异的白蛋白（ALB）mRNA和甲胎蛋白（AFP）mRNA在HCC患者外周血有核细胞成分及组织标本中的表达情况，建立早期检出原发性肝细胞癌（HCC）血中微小转移的方法。首先以肝癌细胞系...
- 关键词：
- 关键词：肝细胞癌
