梁华
- 作品数：32 被引量：55H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 马传染性贫血病毒减毒疫苗体内毒力特性、免疫特性及序列进化特性研究
- 我国在上世纪七十年代，由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所沈荣显教授领导的科研小组，通过体外传代的方法，研制成功了世界上第一个也是唯一的慢病毒疫苗——马传染性贫血病毒（EIAV）驴白细胞弱毒疫苗（DLV）和驴胎皮肤细胞弱毒疫...
- 梁华
- 关键词：马传染性贫血病毒减毒疫苗病毒载量中和抗体免疫保护机制
- 文献传递
- 2007-2012年北京市男男性行为人群HIV新发感染及分子生物学研究
- 罗凤基邵一鸣李东亮师伟张政李书明阮玉华徐杰梁华张丽芬刘英杰姜树林肖冬胡尧王雷
- 男男性行为人群(MSM)是艾滋病病毒传播的高危人群。中国MSM人群和吸毒人群、商业性行为人群、异性传播人群都有密切接触，同时该人群流动性大，很难做到长期追访。在国家科技项目支持下，该课题组开展MSM人群HIV新发感染的动...
- 关键词：
- 关键词：男男性行为艾滋病病毒感染分子生物学
- 早期 HIV-1感染者单核细胞对 TLR 配体反应性研究被引量：3
- 2014年
- 目的：探讨HIV-1早期感染者体内单核细胞的成熟状态和对TLR配体的反应特点，了解HIV-1感染早期单核细胞功能状态和与疾病进展状态的相关性。方法选取35例HIV-1早期感染者和13例HIV阴性的健康人，采血分离外周血单个核细胞（ PBMC ）后纯化出单核细胞，流式细胞术检测单核细胞表面活化／抑制分子表达。用脂多糖（ LPS）和Pam3CSK4分别刺激单核细胞，培养20 h后，流式细胞术检测单核细胞表面活化／抑制分子表达，ELISA方法检测培养上清中促炎细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6的分泌水平。结果 HIV-1早期感染者，单核细胞表面活化分子CD80、CD86、CD40和抑制分子PD-L1表达均升高（除CD86 P＝0．01外，P均＜0．001），CD40表达水平与血浆病毒载量正相关（P＜0．001，r＝0．553）。单核细胞受LPS和Pam3CSK4刺激后，活化成熟能力降低，HLA-DR、CD80、CD86、PD-L1表达增加均较健康对照低（P＜0．001），而促炎细胞因子 TNF-α（LPS：P＝0．004，Pam3CSK4：P＝0．012）和IL-6分泌（LPS：P＝0．006）增加。结论在HIV-1感染早期，单核细胞即处于免疫活化状态，受TLR配体刺激后促炎细胞因子分泌增加可能与HIV-1感染后的微生物移位和免疫活化相关。
- 梁华赵阳阳李丹邵一鸣
- 关键词：人类免疫缺陷病毒单核细胞
- γδT细胞抗人类免疫缺陷病毒感染作用的研究进展被引量：3
- 2012年
- γδT细胞是表达γ和δ链的一群T细胞亚群,在抗人类免疫缺陷病毒(HIV)反应中发挥重要作用。本文主要从γδT细胞识别HIV、与HIV相互作用及其在临床方面的应用进行综述。
- 何璇梁华邵一鸣
- 关键词：ΓΔT细胞人类免疫缺陷病毒感染抗病毒反应
- MSM HIV感染者外周血中ADCC反应水平与HIV-1感染早期病毒载量的关系被引量：2
- 2013年
- 目的在艾滋病病毒(HIV)感染早期,观察HIV-1特异性抗体依赖的细胞毒性作用(ADCC)与病程进展的关系。方法利用HIV-1特异性多肽刺激和多色流式技术,对前期采集的、感染时间在1年以内的男男性行为人群(MSM)标本进行ADCC检测。结果共采集HIV-1感染者标本58份,CD4+T淋病细胞计数与外周血病毒载量呈明显负相关(r=-0.281 6,P=0.032 3)。ADCC检测结果显示,病毒载量与HIV-1Pol特异性CD2+IFN-γ+细胞占CD3-细胞的比例呈显著的正相关(r=0.260 7,P=0.046 2);而病毒载量与HIV-1Gp120特异性CD2+CD107a+细胞占CD3-[A1]细胞的比例呈显著负相关(r=-0.342 9,P=0.009 0)。结论在HIV-1感染早期,感染者体内即可产生针对Pol和Env蛋白的ADCC反应,其中针对Gp120蛋白的ADCC反应具有控制病程进展的作用。
- 冯晏萌张晨苪宝玲梁华邵一鸣
- 关键词：男男性行为人群
- 男男性行为人群HIV-1感染者自然杀伤细胞亚群分布和受体表达特征的研究
- 2012年
- 目的评估男男性行为人群(MSM)HIV-1感染者外周血中自然杀伤(NK)细胞亚群和受体的变化,并初步探讨NK细胞与HIV-1疾病进展的关系。方法选取45例未经抗病毒治疗的MSM HIV-1早期感染者和35名健康对照人群。分离外周血单个核细胞(PBMC),并用多色流式细胞检测技术分析NK细胞亚群和受体表达的变化。结果与正常对照相比,HIV-1感染者NK细胞杀伤亚群显著减少(P=0.002),抑制性受体CD161表达明显降低(P<0.001),但功能不明亚群和活化性受体NKG2C和NKP46明显增加(P<0.001)。与CD4计数和病毒载量的相关性分析显示,仅NKG2A的表达与CD4计数呈正相关,其余无明显相关性。以上NK细胞的亚群和受体表达的变化特征可发生在HIV急性感染期(<3个月)。结论 HIV急性感染可影响NK细胞亚群重分布及表型特征,提示NK在HIV急性感染阶段即可发挥重要作用。
- 贾曼雪李丹何璇彭虹赵阳阳梁华邵一鸣
- 关键词：男男性行为人群自然杀伤细胞
- 利用单个B细胞分选方法获得HIV-1单克隆抗体基因及功能鉴定被引量：2
- 2018年
- 目的从人类免疫缺陷病毒1型（human immunodeficiency virus-1，HIV-1）感染者中获得单克隆抗体基因及功能鉴定。方法单细胞流式分选得到抗原特异性单个B细胞，基因扩增和测序得到抗体可变区序列，BioEdit软件包中Sequence Identity Matrix程序分析基因序列一致性，免疫遗传学数据库分析抗体基因家系和突变率，酶联免疫吸附试验测定抗体结合能力，TZM-bl/假病毒试验检测抗体中和能力。结果从3个HIV-1感染者中分别获得了4个、7个和11个不同抗体的重链和轻链基因序列，其基因家系、CDR3长度和突变率广泛多样；验证了一个感染者的4个抗体基因序列，抗体A1和B3是HIV-1单克隆结合抗体，能同时与B亚型、CRF01_AE和CRF07_BC抗原蛋白结合；A1和B3也是HIV-1单克隆中和抗体，能够中和C亚型的MW965病毒，50%抑制浓度分别为0.04 μg/ml和37.34 μg/ml。结论本研究成功获得了大量的单克隆抗体基因，并对其中的部分序列进行了功能验证，为单克隆抗体的分离和鉴定等研究工作提供了基础。
- 鞠斌鞠斌郝彦玲李丹任莉梁华王硕侯佳利魏民
- 关键词：抗体基因中和活性
- CFSE和AnnexinV双标记技术检测细胞毒性T淋巴细胞的杀伤效应
- 2010年
- 目的利用CFSE和AnnexinV对靶细胞进行染色，建立一种通过流式细胞仪技术检测细胞毒性T淋巴细胞（CTL）杀伤效应的新方法。方法应用磁珠分选OT—IT细胞受体（TCR）转基因小鼠CD8＋CTL细胞和脾脏树突状细胞（sDC），将2种细胞和鸡卯蛋白（OVA）抗原肽共培养65h后分析其细胞分裂增殖、IFN-γ和IL-4细胞内因子及穿孔素、颗粒酶等效应分子的表达特性，收获具备杀伤效应的CD8＋CTL细胞。利用预先激活的小鼠CD8^＋CTL细胞作为效应细胞，CFSE标记的同系小鼠脾细胞作为靶细胞，体内体外2种条件下利用AnnexinV染色靶细胞检测特异性CTL杀伤效应，并与CFSE^high曲和CFSE^low标记靶细胞检测体内CTL杀伤效应的经典方法进行比较。结果OT—I初始CD8^＋CTL细胞体外活化培养后有4个分裂峰，54．1％的CTL细胞表达IFN-γ，0．78％的细胞表达IL-4，穿孔素、颗粒酶2种CTL效应分子均为阳性表达，CD8＋CTL细胞已经具备CTL杀伤活性。体外实验结果显示OVA^＋靶细胞在共培养条件下，AnnexinV阳性细胞比例明显高于分离培养条件下[（62．4±3．5）％比（28．3±2．2）％，P〈0．01]，OVA的AnnexinV阳性靶细胞比例在不同培养条件下差异无统计学意义[（20．3±4．8）％比（17．3±2．9）％，P〉0．05]。共培养条件下OVA^＋靶细胞其AnnexinV阳性细胞比例也明显高于OVA^-靶细胞（P〈0．01），在分离培养条件下差异则无统计学意义（P〉0．05）。活化的CD8^＋CTL细胞所介导的杀伤效应具有抗原依赖性和部分的细胞接触依赖性。体内CTL实验中，利用CFSE和AnnexinV双标记的方法检测出靶细胞的杀伤率高于未孵育OVA抗原肽的对照组靶细胞[（52．63±8．12）％比（13．84±4．37）％，P〈0．01]。而同等条件下利用CFSE^high和CFSE^low双标记的方法检出靶细胞杀伤率为41%。结论CFSE和AnnexinV双标记靶细胞的方法检测CTL杀伤效应与�
- 梁华刘霜沈弢
- 关键词：细胞毒性CFSEANNEXINV细胞毒性试验
- 滤泡辅助性T细胞及其相关因子在HIV疾病进展中的变化研究被引量：5
- 2018年
- 目的通过对不同疾病进展阶段的HIV感染者外周血滤泡辅助性T细胞（follicular helper T cell, Tfh）进行分析，探讨Tfh及其相关因子对HIV感染疾病进程的影响，为进一步研究Tfh在HIV抗病毒治疗和疫苗研究提供科学依据。方法本研究招募HIV-1感染者33例，根据疾病进展情况分为HIV-1长期不进展者（long-term nonprogressors, LTNP）11例、快速进展者（rapid progressors, RP）10例、HIV典型进展者（typical progressors, TP）12例，同时招募11名健康人（normal control, NC）作为对照。分离受试者外周血单个核细胞，用多色流式的方法检测CD4＋CD45RA－CXCR5＋Tfh和CD4＋CD45RA－CXCR3－CXCR5＋PD-1＋Tfh及其表达ICOS、IFN-γ、IL-21因子的水平。此外，对血浆IL-10和CD19＋B细胞频数也进行分析，探讨Tfh与CD4、B细胞的关系。结果两个Tfh亚群比例在HIV-1感染人群均比正常对照高，CD4＋CD45RA－CXCR5＋Tfh在LTNP人群最高，与正常对照比较差异有统计学意义（P〈0.05）。Tfh相关因子ICOS、IFN-γ、IL-21在T细胞刺激剂作用下均有明显升高，ICOS＋Tfh与HIV-1疾病进展呈负相关，与CD19＋B细胞呈正相关（r＝－0.49，P〈0.01；r＝0.60，P〈0.05）。血浆IL-10的浓度在HIV-1感染者中有明显升高，TP组最高，其次为RP组（TP组vs NC组，P〈0.01；RP组vs NC组，P〈0.05）。结论外周血Tfh及其相关因子的表达在HIV-1感染者与健康对照者间差异有统计学意义，特定亚群Tfh与HIV-1疾病进展和B细胞功能密切相关。
- 李丹李剑军李亚锋王硕梁华唐振柱沈智勇邓月琴邵一鸣
- 关键词：HIV-1滤泡辅助性T细胞B细胞
- 静脉吸毒HIV-1感染者Th17/Treg失衡与疾病进展及单核细胞活化水平的相关性研究被引量：5
- 2013年
- 目的了解静脉吸毒HIV-1感染者Th17和Treg细胞百分比及Th17/Treg比例平衡状态,分析其与疾病进展和单核细胞免疫活化的相关性,探讨Th17/Treg比例失衡在HIV致病机制中的作用。方法选取经静脉吸毒感染HIV-1的患者58例,采集静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测Th17和Treg百分比及Th17/Treg比例。ELISA方法检测血浆中sCD14水平。结果 HIV-1感染者Th17细胞百分比和Th17/Treg比值明显低于健康对照组,差异均有统计学意义(P均<0.01),Th17百分比和Th17/Treg比值与CD4数量呈正相关(P<0.01,r=0.46;P<0.01,r=0.47),与病毒载量呈负相关(P<0.01,r=-0.65;P<0.01,r=-0.69)。HIV-1感染者血浆sCD14水平显著高于健康对照组组(P<0.01),且Th17百分比和Th17/Treg比值与血浆sCD14水平呈负相关(P<0.01,r=-0.54;P<0.01,r=-0.49)。结论 HIV-1感染吸毒人群中Th17和Treg百分比和Th17/Treg比值均明显失衡,且与病毒载量和单核细胞活化标志sCD14均呈负相关,提示Th17/Treg失衡与HIV感染所致病毒复制和免疫活化密切相关。
- 张曼芮宝玲沈弢梁华
- 关键词：TREG细胞吸毒人群
