梁赤周
- 作品数:10 被引量:40H指数:4
- 供职机构:中国科学院生态环境研究中心更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金浙江省自然科学基金质检公益性行业科研专项项目更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程农业科学历史地理更多>>
- 三唑磷残留检测直接竞争ELISA试剂盒的研制及应用被引量:14
- 2008年
- 采用包被多克隆抗体直接竞争ELISA法研制一种检测水样、蔬菜和粮食样品中三唑磷残留的酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒。将不同浓度的三唑磷添加到水样、蔬菜和粮食样品中,用制备的试剂盒检测三唑磷残留并用气相色谱分析法(GC)进行验证,结果样品的加标回收率在65%~125%之间,变异系数<15%。对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定,结果表明:研制的试剂盒最低检测限为4.13ng/mL,线性检测范围3.9~500ng/mL;在4℃或-20℃条件下试剂盒有效期可达6个月。用ELISA试剂盒检测三唑磷残留具有可批量分析样品,快速、简便、灵敏、经济的特点,可广泛应用于环境监测和安全食品的生产。
- 梁赤周桂文君朱国念
- 关键词:三唑磷酶联免疫吸附测定法试剂盒
- γTNFβ与相关细胞因子TNFβ、IFNγ对L929和Hela细胞的细胞毒作用及其信号转导的初步研究
- 该文检测了γTNFβ(IFNγ/TNFβ的杂合蛋白)、TNFβ和IFNγ对TNF的敏感靶细胞L929和抗性靶细胞Hela的细胞毒效应.在相同剂量(100u/ml)条件下,γTNFβ对L929的杀伤作用(64﹪)明显比TN...
- 梁赤周
- 关键词:TNFΒIFNΓCASPASE
- 文献传递
- 抗三唑磷基因工程抗体的研制及同源建模
- 为了研制基因工程抗体,本文首先通过杂交瘤技术筛选能够稳定分泌高亲和力、高特异性抗体的杂交瘤细胞,以从中克隆编码抗体可变区的基因。利用杂交瘤细胞制备的单克隆抗体建立了三唑磷残留ELISA检测方法,并对方法进行了系统优化。优...
- 梁赤周
- 关键词:三唑磷单克隆抗体单链抗体同源建模分子对接
- 文献传递
- 农产品中基质对酶联免疫分析法检测三唑磷残留的干扰及消除研究(英文)被引量:5
- 2012年
- 基质干扰是免疫法检测食品中农药残留时经常碰到的问题。以胡萝卜、菠菜、香蕉、梨、稻米和花生等为试材,研究了不同农产品基质对酶联免疫分析法(ELISA)检测三唑磷的影响。结果表明:不同农产品基质对ELISA检测的干扰机制不同,香蕉主要是抑制了辣根过氧化物酶的活性,菠菜、梨和稻米则主要是干扰了抗原和抗体的结合反应,胡萝卜和花生不仅抑制酶的活性,同时还干扰了抗原和抗体的结合反应。将这些农产品的磷酸盐缓冲液(PBS)(含2.5%甲醇)提取液用含有质量分数为0.3%的脱脂奶粉、0.1%的乙二胺四乙酸(EDTA)和含2.5%甲醇的PBS稀释10倍,在12 000 r/min下离心10 min,即可消除其对ELISA检测的干扰。研究结果表明,ELISA法是可用于农产品中三唑磷残留检测的一种简单、快速、有效的方法。
- 梁赤周邹明强桂文君朱国念郭良宏
- 关键词:农产品酶联免疫检测三唑磷
- IFNγ-LTα与LTα诱导L929细胞凋亡信号转导的初步研究被引量:1
- 2002年
- 目的 研究融合蛋白IFNγ LTα诱导L92 9细胞凋亡的信号转导机制 ,并与LTα相比较。方法 用结晶紫染色法观察细胞毒效应 ;用检测试剂盒检测caspase 8和 3活性的变化 ;观察 3种信号转导分子的抑制剂对IFNγ LTα和LTα诱导的细胞毒效应的影响。结果 IFNγ LTα能诱导L92 9细胞凋亡及胞内caspase 8和 3的活性变化 ,但两种caspase产生的时间和幅度有所不同。PKC的抑制剂可促进IFNγ LTα和LTα对L92 9细胞的杀伤 ;而PLA2及Ca2 +通道的抑制剂对杀伤则有明显的阻断作用 ,但对LTα的阻断强于对IFNγ LTα的阻断。结论 IFNγ LTα融合蛋白的抗肿瘤活性强于LTα ,其信号转导特征有别于LTα。信号分子caspase与PKC、PLA2、Ca2
- 梁赤周丁鸣余建法杨帆马志章
- 关键词:L929细胞信号转导结晶紫染色法
- 庆大霉素快速Dot-ELISA检测方法的建立及初步应用被引量:6
- 2010年
- 本研究旨在建立一种适用于快速、现场检测要求的庆大霉素残留Dot-ELISA检测方法。将硝酸纤维素膜用激光切割成小圆片,粘贴到激光打孔的塑料胶条上,制成8个圆片组成的NC膜检测条。通过条件优化,建立了基于NC膜条的庆大霉素残留直接竞争Dot-ELISA检测方法。结果表明,该方法可以快速检测牛奶等食品中的庆大霉素残留,检测灵敏度达到60 ng/mL,可用于庆大霉素残留的筛查。与微孔板ELISA相比,Dot-ELISA可以大大节省检测时间。直接竞争Dot-ELISA具有简便、快速、灵敏、直观的特点,具有推广和应用价值。
- 陈艳梁赤周吴斌邹明强薛强郭良宏
- 关键词:庆大霉素DOT-ELISA
- γTNF-β与TNF-β对L929细胞的细胞毒作用及其信号转导的初步研究
- <正> 本文检测了由本实验室自行重组并纯化的2种细胞因子-γTNF-β(IFN-γ和TNF-β的融合蛋白)及TNF-β对L929靶细胞的细胞毒效应,用结晶紫染色法试验的结果表明,在相同剂量(100U/ml)的条件下,TN...
- 梁赤周马志章丁鸣杨帆丁仁瑞
- 文献传递
- 胱天蛋白酶(caspase)的前结构域被引量:3
- 2001年
- 梁赤周马志章
- 关键词:CASPASE细胞凋亡胱天蛋白酶
- 三唑磷酶联免疫吸附测定法中包被抗体稳定剂的研究被引量:1
- 2007年
- 选择了甘油、山梨醇、聚乙二醇(PEG)、卵清蛋白(OVA)、多肽、糖、氨基酸等试剂,通过经验法和正交法相结合的手段配制了一系列稳定剂,对吸附在酶标板上的三唑磷多克隆抗体进行处理(37℃,1h)后,再在37℃下连续贮存7d,利用直接竞争ELISA法对不同稳定剂处理的包被抗体免疫活性、亲合性及检测灵敏度进行检测,并与未经稳定剂处理的对照进行比较,筛选得到效果较好的稳定剂1(质量分数:甘油2.5%,氨基酸1.5%,蛋白胨3.0%,离子螯合剂0.1%,防腐剂0.01%)。用稳定剂1处理包被抗体后,4-6℃下保存半年及37℃下保存14d的试验结果表明,抗体的活性相对保持率分别为97.8%和94.2%;其免疫活性、亲合性(I50分别为68.43和54.38ng/mL)及灵敏度(I10分别为3.72和3.22ng/mL)与常规方法包被的抗体(包被好后不贮存,直接检测,I50为60.73ng/mL,I10为3.11ng/mL)无明显差异;冻融试验表明,经稳定剂1处理的三唑磷抗体在反复冻-融次数不超过8次时其活性也是稳定的。说明筛选出的稳定剂可以显著提高三唑磷多克隆包被抗体的稳定性,可用于三唑磷ELISA试剂盒的生产。
- 桂文君梁赤周王姝婷王春梅朱国念
- 关键词:酶联免疫吸附测定法稳定剂三唑磷多克隆抗体
- 胶体金免疫层析试纸条快速检测玉米细菌性枯萎病菌被引量:9
- 2010年
- 本文采用胶体金免疫层析技术成功建立了玉米细菌性枯萎病菌试纸条快速检测法。条件优化后的试纸条用于玉米细菌性枯萎病菌的检测,方法的检测限为106cfu/mL,其灵敏度与双抗夹心ELISA检测方法相当;交叉试验结果表明,该试纸条对玉米细菌性枯萎病菌有良好的特异性。本方法可作为玉米细菌性枯萎病菌日常监测的现场筛查手段,具有简便、快速、成本低廉、便于普及等优点,对保障我国农产品安全具有重要的现实意义。
- 齐玲玲金涌邹明强梁赤周田世民陈艳李卫华
- 关键词:玉米细菌性枯萎病菌免疫层析技术胶体金ELISA特异性