沈一凡
- 作品数：6 被引量：18H指数：3
- 供职机构：甘肃农业大学草业学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项甘肃省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 二斑叶螨对阿维菌素的抗性及酶活性变化研究
- 二斑叶螨（Tetranychus urticae Koch）是一种重要的世界性害螨，在许多国家造成严重危害。由于阿维菌素高效低毒，触杀作用强，对环境安全等特点，在果树生产中得到广泛的使用，但任何新型农药的使用都不可避免的...
- 沈一凡
- 关键词：二斑叶螨阿维菌素抗性选育交互抗性抗性机理酶活性
- 文献传递
- 两种方法在二斑叶螨电压门控钠离子通道基因突变检测中的应用被引量：1
- 2014年
- 靶标突变是二斑叶螨对拟除虫菊酯类药剂产生高抗性的重要原因,而用于靶标突变检测的方法较多,有必要寻找一种经济、灵敏且有效的方法进行突变检测。本研究根据二斑叶螨电压门控钠离子通道(voltage-gated sodium channels,VGSCs)基因上已报道的3个点突变(L1022V、A1215D和F1538I),采用PCR产物直接测序和限制性片段长度多态性聚合酶链反应(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)两种不同的方法对二斑叶螨田间种群(WW-R和LZ-R)进行靶标VGSCs基因突变检测。PCR产物直接测序结果显示,与SS种群相比,WW-R和LZ-R种群VGSCs基因均存在两种氨基酸突变A1215D和F1538I,但没有发现存在F1022V突变,其中A1215D突变发生在结构域ⅡS6-ⅢS1连接处,F1538I突变发生在结构域ⅢS6螺旋处,而采用PCR-RFLP方法只检测出A1215D突变。两种不同的方法对田间采集的二斑叶螨种群VGSCs基因突变位点检测的比较,为抗菊酯类药剂二斑叶螨种群抗性分子监测技术的建立和抗性治理奠定了基础。
- 杨顺义岳秀利王进军沈慧敏郭金梅沈一凡周兴隆
- 关键词：二斑叶螨甲氰菊酯直接测序法PCR-RFLP法
- 吡螨胺和哒螨灵亚致死剂量对截形叶螨的亚致死效应被引量：5
- 2014年
- 通过吡螨胺(tebufenpyrad)和哒螨灵(pyridaben)的亚致死剂量处理截形叶螨(Tetranychus truncatus Ehara)成螨和螨卵,研究了两药剂对实验种群的亚致死效应。结果表明:吡螨胺和哒螨灵处理后当代成螨的每雌日均产卵量均有不同程度的降低,日平均产卵量、卵孵化率均低于对照;F1的卵期、幼螨期、若螨期延长显著,净增殖率低于对照、内禀增长率和周限增长率与对照差异不大。两药剂处理卵后,卵期、幼螨期、若螨期延长,净增殖率低于对照。吡螨胺和哒螨灵的亚致死剂量处理截形叶螨成螨和螨卵都无刺激增殖的作用,能延缓种群的发育速度。
- 郭金梅沈慧敏岳秀利沈一凡
- 关键词：截形叶螨吡螨胺哒螨灵亚致死剂量亚致死效应
- 二斑叶螨抗甲氰菊酯种群解毒酶基因表达分析
- 2015年
- 基因 mRNA 水平相对表达量的显著变化是二斑叶螨对拟除虫菊酯类药剂产生抗性的重要机制。为了揭示二斑叶螨对甲氰菊酯抗性产生的解毒酶分子机理，本研究采用实时荧光定量 PCR（quantitative real time PCR，qRT－PCR）方法分析二斑叶螨实验室敏感（SS）和田间种群（LZ-R、GN-R、WW-R、TS-R 和 LX-R）主要解毒酶谷胱甘肽转移酶（glutathione s-transferases，GSTs）、细胞色素 P450单加氧酶（cytocheome P450 monooxygenases，P450s）及羧酸酯酶（carboxyl／cholinesterases，CCEs）基因 mRNA 水平相对表达量的差异。结果表明，二斑叶螨不同种群不同解毒酶基因的相对表达量不同。WW-R 和 TS-R 种群中 TuGSTd05以及 LX-R 种群中 TuGSTd01和 TuG-STd06基因表达量均显著上调，为 SS 种群的1．42～2．34倍，而 GN-R 种群中 TuGSTd04，LZ-R 种群中 TuGSTd05和 GSTd09表达量显著下调，为 SS 种群的0．41～0．70倍；P450s 基因 CYP406A1和 CYP4CL1表达量在 LZ-R、GN-R 以及 WW-R 种群中均显著上调，分别为 SS 种群的1．80～4．88倍，此外，CYP 387A1在 LZ-R 种群中显著上调2．19倍，而在 LX-R 种群中显著下调0．42倍；CCEs 基因 TuCCE-35表达量在 WW-R 和 TS-R 种群中显著上调，分别为 SS 种群的2．82和3．09倍，而 TuCCE-36基因在所有种群中的表达量均不显著。二斑叶螨不同种群中解毒酶基因 GSTs、P450s 和 CCEs 的显著上调或下调可能与甲氰菊酯的抗性形成有关。
- 杨顺义岳秀利王进军刘长仲沈慧敏沈一凡郭金梅
- 关键词：二斑叶螨甲氰菊酯解毒酶
- 二斑叶螨抗阿维菌素品系选育及其解毒酶系活力变化被引量：6
- 2014年
- 采用室内生物测定和生化分析方法,以采自甘肃兰州国家级森林公园兴隆山的二斑叶螨为敏感品系(SS),研究二斑叶螨对阿维菌素的抗药性及抗性生化机理。结果表明:在室内用阿维菌素强化筛选24代,获得了二斑叶螨抗阿维菌素品系(Ab-R24),抗性指数(resistance index,RI)为321.5。对SS和Ab-R24解毒酶活性的分析表明,Ab-R24品系体内羧酸酯酶(CarE)、乙酰胆碱酯酶(AchE)、酸性磷酸酯酶(ACP)、碱性磷酸酯酶(ALP)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和多功能氧化酶(MFO)活性分别是SS品系的1.43、1.18、1.56、1.48、1.55倍和4.02倍,差异达到显著水平(P<0.05),其中MFO的活性上升最为显著。对SS和Ab-R24解毒酶动力学常数的分析表明,Ab-R24品系体内AchE、GSTs和MFO的Km分别是SS品系的1.14、2.31倍和2.58倍;Vmax分别是SS品系的1.19、2.34倍和1.76倍,差异均达到显著水平(P<0.05)。说明二斑叶螨对阿维菌素抗性增高与MFO活性快速升高有关,AchE和GSTs也参与阿维菌素抗性的形成。
- 沈一凡沈慧敏岳秀利郭金梅宋丽雯
- 关键词：二斑叶螨阿维菌素抗性选育解毒酶抗性机理
- 截形叶螨抗哒螨灵品系和敏感品系体内解毒酶活性的变化被引量：6
- 2014年
- 【目的】通过对截形叶螨Tetranychus truncatus Ehara抗哒螨灵品系体内解毒酶活性分析和增效剂与哒螨灵混用的增效作用测定,明确截形叶螨对哒螨灵的抗性动态及抗性机理,获得抗性治理的途径。【方法】采用室内生测法培育截形叶螨抗哒螨灵品系,微量滴度酶标板测定抗性和敏感品系体内解毒酶比活性、米氏常数(Km)及最大反应速度(Vmax),再用增效醚(PBO)、顺丁烯二酸二乙酯(DEM)和磷酸三甲苯酯(TPP)进行增效作用测定。【结果】室内筛选的截形叶螨对哒螨灵产生了抗性,筛选至49代,抗性倍数达到955.25;PBO,TPP和DEM对哒螨灵药剂有不同程度的增效作用,相对增效系数分别为95.97%,85.14%和97.37%;抗哒螨灵品系体内的羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽转移酶(GSTs)、多功能氧化酶(MFO)活性较敏感品系显著性提高(P<0.05),酸性磷酸酯酶(ACP)和碱性磷酸酯酶(ALP)的活性与敏感品系差异不大(P>0.05);抗性品系中的CarE,GSTs和MFO 3种解毒酶的米氏常数(Km)下降,最大反应速度(Vmax)高于敏感品系。【结论】截形叶螨对哒螨灵产生抗性可能与其体内CarE,GSTs和MFO 3种解毒酶与底物的亲和力提高和代谢能力增强有关;3种增效剂(PBO,TPP和DEM)与哒螨灵混用能提高对截形叶螨的毒杀效果。
- 宋丽雯沈一凡岳秀利郭金梅沈慧敏
- 关键词：截形叶螨哒螨灵抗性品系敏感品系解毒酶抗性米氏常数
