王君伟
- 作品数：375 被引量：968H指数：16
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 鹅干扰素-α的毕赤酵母表达及其生物学活性分析被引量：2
- 2013年
- 为在毕赤酵母表达系统中表达无冗余氨基酸且具有抗病毒活性的鹅干扰素-α(IFN-α)蛋白,采用融合PCR法扩增获得鹅干扰素-α基因片段,将此片段连入pPICZαA载体,构建重组表达质粒pPICZαA-GoIFN-α,电击转化毕赤酵母感受态细胞X33,挑取阳性重组菌用甲醇进行诱导表达,对表达产物进行West-ern-blot和ELISA分析,并测定重组IFN-α的生物活性。结果显示,融合基因获得高效表达,表达的蛋白以可溶形式存在,且相对分子质量较理论值稍大。经GEF-GPMV系统检测,证实表达的蛋白具有生物学活性,约为6.55×105 U/mL,比活力为1.80×105 U/mg。结果表明,利用毕赤酵母表达系统规模化生产具有生物学活性的鹅IFN-α有广阔的应用前景。
- 朱永梅曹永生李鑫马波张文龙高明春王君伟
- 关键词：干扰素-Α巴斯德毕赤酵母分泌表达抗病毒活性
- A型禽流感病毒NS1蛋白的表达及其诱导细胞凋亡功能的研究被引量：6
- 2009年
- 利用瞬时表达方法表达禽流感病毒(AIV)NS1蛋白,并初步研究了体外表达的NS1蛋白对宿主细胞凋亡的影响。应用脂质体介导法,将含有不同亚型AIV NS1基因的阳性质粒pcDNA3.1(+)-qNS1(H5N1)、pcDNA3.1(+)-rNS1(H9N2)转染Vero细胞系及MDCK细胞系。经SDS-PAGE及Western-blotting检测,qNS1和rNS1基因在Vero细胞及MDCK细胞中均获得了表达。应用AO/EB荧光染色法、Annexin V-PI法分别对转染后的Vero细胞及MDCK细胞进行细胞凋亡检测,结果显示,转染阳性质粒的MDCK细胞凋亡率增高,而转染空载体pcDNA3.1(+)的MDCK细胞及转染的Vero细胞均无明显变化。表明,qNS1、rNS1蛋白在体外培养的MDCK细胞中表达并能够诱导其发生凋亡,而在Vero细胞中却不能发挥此功能。
- 孙进华马波于志丹霍慧王君伟
- 关键词：禽流感病毒NS1蛋白MDCK细胞VERO细胞真核表达
- 昆明鼠对猪轮状病毒核酸免疫的抗体应答被引量：2
- 2004年
- 将昆明鼠随机分为A、B两组,分别肌肉注射含有猪轮状病毒(RV)JL94株VP7基因的重组真核表达质粒pcDNA-VP7和真核表达载体pcDNA3.1(+),每只鼠100μg·(100μL)-1,共免疫3次,每次间隔2周。首次免疫第0,14,21,28,35,39,47,54天采血分离血清用ELISA法检测抗体动态变化。A组小鼠血清在首免后第14天即可检出阳性抗体(P/N≥2.0)。
- 师东方贾永清李一经王君伟马波刘宝全
- 关键词：轮状病毒VP7基因核酸免疫抗体
- 兔抗鸭IgY+IgY(△Fc)(H+L)辣根过氧化物酶标记抗体及其制备方法
- 本发明提供的是兔抗鸭IgY+IgY(ΔFc)(H+L)辣根过氧化物酶标记抗体及其制备方法。本发明辣根过氧化物酶标记兔抗鸭IgY+IgY(ΔFc)(H+L)抗体是利用盐析、层析等蛋白纯化技术和酶标记技术，在提纯鸭卵黄免疫球...
- 王君伟孙凌霜
- 文献传递
- α疱疹病毒gH与gL蛋白的研究进展被引量：1
- 2007年
- 疱疹病毒种类繁多，可感染哺乳类、鸟类、两栖类和无脊椎动物，引起多种疾病。也有一些病毒可以在宿主体内终生潜伏。迄今至少已鉴定100种疱疹病毒，其中19种已完成全基因组测序，包括马疱疹病毒1、2及4型，牛鼻气管炎病毒等。疱疹病毒分为4个亚科，即α疱疹病毒亚科、β疱疹病毒亚科、γ疱疹病毒亚科及未定名亚科。其中α疱疹病毒亚科分为单纯疱疹病毒属、水痘病毒属、类鸡马立克病病毒属及类传染性喉气管炎病毒属，
- 汤海宽王君伟马波邢明伟赵妍张扬
- 关键词：传染性喉气管炎病毒GH全基因组测序鼻气管炎病毒单纯疱疹病毒
- 鹅免疫球蛋白编码区及其恒定区特异性单克隆抗体与应用
- 本发明公开了鹅免疫球蛋白编码区及其恒定区特异性单克隆抗体与应用。本发明提供的鹅免疫球蛋白编码区包含λ链的全部编码区序列，重链的可变区、D片段和J片段编码序列、α链的恒定区编码序列以及μ链、υ链恒定区的部分编码序列。本发明...
- 王君伟郭永丽高明春马波
- 文献传递
- 用对流免疫电泳法、琼脂双扩散法和环状沉淀法鉴别牛肉和马肉
- 对流免疫电泳法、琼脂双扩散法和环状沉淀法鉴别牛肉和马肉是食品检验领域的技术，它可解决目前市场上急需解决的牛肉和马肉鉴别检验的问题。从牛肉和马肉中分别提取出各自特异性抗原，免疫家兔制备出抗血清。用此抗血清应用上述三种方法分...
- 李景鹏王君伟宣世纬
- 文献传递
- 猪传染性胃肠炎病毒TH-98株S基因5′端部分片段克隆及序列分析被引量：3
- 2004年
- 本研究扩增出猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV) TH- 98株 S基因 5′端 6 72 bp片段 (TS1) ,包括 B、C两个主要抗原位点。将该片段克隆到 p MD 18- T载体上 ,经鉴定 TS1片段正确插入 p MD 18- T载体上。序列测定和分析表明 ,该片段的核酸序列与国外 TGEV毒株 Miller,Purdue15 ,FS772 /70等有很高的同源性 ,达 96 .88%以上 ,氨基酸同源性为 95 .0 9%以上 ,抗原位点 C(S蛋白第 4 8位氨基酸 )的丝氨酸变为脯氨酸。本研究首次克隆国内分离株 TH- 98株 S基因含有抗原位点 B、C且在 PRCV中缺失的片段。为进一步揭示 TGEV强弱毒株差别的分子机制和分子诊断的研究奠定了重要基础。
- 胡森王君伟姜骞李一经
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒S基因克隆
- 鸭免疫球蛋白及其在抗感染免疫中的作用
- 2004年
- 鸭作为一种经济型水禽其集约化饲养规模不断扩大,鸭疫病的防治已经成为新的研究热点.与鸡相比,鸭的基础性免疫机制研究较少,这给兽医科技工作者在鸭疫病防治的工作中带来许多困难.现就现有的资料简要的介绍鸭免疫球蛋白及其在鸭主要几种疫病中抗感染作用,为鸭疫病防治的实践工作提供一点可供借鉴的资料.
- 李洪涛马波王君伟
- 关键词：免疫球蛋白抗感染作用免疫功能
- Asia 1型口蹄疫病毒3A非结构蛋白抗原表位缺失感染性cDNA及其构建方法
- Asia 1型口蹄疫病毒3A非结构蛋白抗原表位缺失感染性cDNA及其构建方法，它涉及口蹄疫病毒3A非结构蛋白抗原表位缺失感染性cDNA及其构建方法。它解决了现有灭活疫苗纯化过程中很难监测，所以残留的非结构蛋白会干扰对自然...
- 王君伟李爽高明春马波
- 文献传递
