王美玉
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：西安交通大学医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CXCR4-siRNA逆转录病毒载体体外靶向抑制hTERT^+肿瘤细胞CXCR4基因的表达被引量：2
- 2006年
- 目的:构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的趋化因子受体4(CXCR4)的RNA干扰逆转录病毒载体,并研究其在hTERT+前列腺癌细胞、乳腺癌细胞中的表达。方法:用PCR扩增CXCR4特异性小干扰RNA(smallinterferingRNA,siR-NA),转入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的Pgensil-1质粒,以hTERT启动子代替U6启动子,再将重组基因片段导入到逆转录病毒真核表达载体PLXSN中,行限制性酶切鉴定。转染PA317病毒包装细胞,收获病毒上清分别转染前列腺癌细胞PC-3m、LNCaP及人胚肺成纤维细胞MRC5和人乳腺癌细胞MCF7,RT-PCR检测CXCR4mRNA表达。结果:限制性酶切鉴定该重组质粒,成功构建了PLXSN/EGFP-hTERT-siCXCR4。与空载体组比较,PC-3m、LNCaP、MCF7细胞中CXCR4-siRNA对CXCR4mRNA的48h抑制率分别为(87.02±10.34)%、(61.70±9.77)%、(88.31±9.20)%。MRC5细胞中PLXSN-hTERT-siCXCR4对CXCR4mRNA不抑制。结论:该逆转录病毒系统中hTERT启动子调控的下游RNA干扰序列可选择性地在hTERT+前列腺癌细胞、乳腺癌细胞中表达,在hTERT-MRC5细胞不表达,具有显著的靶向性。
- 杜岳峰邢毅飞曾甫清王美玉陆鹏刘先艮
- 关键词：趋化因子受体4人端粒酶逆转录酶
- Syndecan-1、MMP-1在肾癌中的表达及临床意义被引量：1
- 2006年
- 应用免疫组化SP法检测细胞黏附分子Syndecan-1和基质金属蛋白酶-1(MM P-1)在正常肾组织和肾癌组织中的表达。结果为Syndecan-1在肾癌中低表达者预后差,MM P-1在肾癌中高表达者预后差,二者表达呈负相关(rs=-0.651,P<0.001)。认为二者联检可预测肾癌的转移潜能及评估预后。
- 杜岳峰邢毅飞曾甫清陆鹏王美玉刘先艮
- 关键词：肾细胞癌细胞黏附分子基质金属蛋白酶-1
- 携带报告基因EGFP的CXCR4 RNA干扰质粒的构建及生物活性的鉴定
- 2006年
- 目的构建携带报告基因EGFP的CXCR4RNA干扰质粒,证实其高效抑制靶基因表达的生物活性。方法设计有发夹状结构的两条DNA序列,用PCR扩增CXCR4特异性小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA),转入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的pGensil-1质粒,转化DH5a菌株,提取质粒行酶切及测序鉴定。重组质粒转染PC-3m细胞株,检测绿色荧光蛋白表达及对细胞CXCR4表达的抑制情况。结果成功构建了CXCR4靶向的RNA干扰质粒pGensil-1/siCXCR4,在靶细胞可同时表达siRNA及绿色荧光蛋白。结论pGensil-1/siCXCR4质粒的成功构建对利用基因干扰技术治疗前列腺癌转移方面的研究奠定了一定的实验基础。
- 杜岳峰邢毅飞肖亚军曾甫清王美玉陆鹏刘先艮
- 关键词：RNA干扰趋化因子受体4绿色荧光蛋白
- 白介素-12基因转染致敏树突状细胞体外诱导特异抗前列腺癌效应的实验研究被引量：1
- 2006年
- 背景与目的前列腺癌是泌尿系统疾病中发病率和死亡率较高的恶性肿瘤,临床积极寻求最佳治疗方案。白细胞介素-12(IL-12)具有促T细胞增殖分化和抗肿瘤免疫作用,负载肿瘤抗原的树突状细胞(DC)疫苗可诱导机体产生特异性的抗肿瘤免疫效应,联合两者抗肿瘤效应,探讨逆转录病毒介导白细胞介素-12(IL-12)基因转染DC体外诱导特异免疫杀伤前列腺癌细胞的效能及其机制。方法构建IL-12基因逆转录病毒重组质粒,转染PA317细胞后获得相应病毒,转染前列腺癌(PCa)患者外周血DC成DC-IL-12细胞。以HSP70-PC-3m肿瘤混合肽负载DC-IL-12细胞得致敏的DC。MTT法检测T淋巴细胞(1×105个/ml)增殖分化能力,细胞毒实验检测DC-IL-12诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)及其上清液对PC-3m细胞株杀伤作用。结果DC经IL-12修饰后48h分泌高水平IL-12(26.35±3.12)ng/L及IFN-r(778±28)ng/L,均显著高于未转染组(P<0.05)。DC-IL-12细胞诱导的CTL及其上清液对前列腺癌PC-3m细胞均有显著杀伤作用,杀伤率显著高于未转染组,分别为(76.43±6.20)%vs(42.12±2.80)%和(66.38±7.56)%vs(14.23±5.42)%(P<0.05),对膀胱癌细胞EJ无明显杀伤作用。结论IL-12基因修饰增强PC-3m细胞抗原致敏DC体外诱导同源T淋巴细胞产生特异性的抗前列腺癌免疫效能,其机制与IL-12基因转染DC后促进分泌IL-12、IFN-r及增强T淋巴细胞活化状态密切相关。
- 杜岳峰邢毅飞曾甫清王美玉陆鹏刘先艮
- 关键词：逆转录病毒前列腺癌IL-12树突状细胞
- 经皮肾镜碎石取石术围手术期的护理经验
- 目的:探讨肾结石患者行经皮肾镜碎石取石术围手术期的护理,以减少术中和术后并发症。方法:63例患者(男38例,女25例)因肾结石进行经皮肾镜碎石取石术,其中单侧肾结石54例,双侧肾结石9例。术前通过图表和文字介绍和讲解手术...
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- 文献传递
