王金文
- 作品数：6 被引量：36H指数：4
- 供职机构：温州医学院附属第二医院更多>>
- 发文基金：温州市科技局资助项目浙江省自然科学基金温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同来源标本中大肠埃希菌耐药率的比较分析被引量：6
- 2011年
- 目的研究不同标本来源中大肠埃希菌的耐药谱,为临床用药提供治疗参考。方法对温州医学院附属第二医院2010年1月到12月患者送检的体液标本进行培养,用microcsan walkaway 96S微生物自动鉴定仪对菌种鉴定及药敏分析,结果用2分割法进行统计分析。结果分离出大肠埃希菌597株,其中痰液、脓液、血液、分泌物、引流液中分别分离出295、148、102、37、15株。所有分离株均对亚胺培南敏感,对氨苄西林、哌拉西林的耐药率最高。痰液分离株对氨曲南、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林、妥布霉素及所有头孢类的耐药率显著高于血液分离株的耐药率(P<0.05);痰液分离株对氨曲南、氨苄西林/舒巴坦、除头孢他啶外的所有头孢类的耐药率显著高于脓液分离株的耐药率(P<0.05);脓液分离株对氨苄西林、哌拉西林、妥布霉素的耐药率明显高于血液分离株的耐药率(P<0.05)。痰液中ESBLs阳性率显著高于血液和脓液中ESBLs阳性率。产ESBLs的大肠埃希菌共316株,所占的比例为52.9%;痰液分离的ESBLs阳性株对四环素、环丙沙星、加替沙星、左氧氟沙星、甲氧苄啶/磺胺呷恶唑、阿米卡星的耐药率显著低于脓液分离株的耐药率(P<0.05)。结论痰液分离的大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素的耐药率普遍高于脓液和血液分离株的耐药率,同时认识到该院抗生素的耐药现象很严重,临床上更加合理的使用抗菌药物。
- 田鹏鹏刘丽张颖王金文李向阳
- 关键词：超广谱Β-内酰胺酶耐药率大肠埃希菌
- 外排泵MexAB-OprM在多重耐药铜绿假单胞菌中的作用被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)的耐药机制及其耐药性与外排泵表达水平关系。方法:PCR法对30株铜绿假单胞菌进行MexB基因检测;采用实时荧光定量PCR的方法检测MexAB-OprM的mRNA相对表达水平;对多重耐药铜绿假单胞菌采用琼脂对倍稀释法进行外排泵抑制剂的抑制试验,观察抗菌药物的MIC变化。结果:联合外排泵抑制剂后,庆大霉素(GEN)和环丙沙星(CIP)MIC值与之前相比大部分有2个折点的变化,有4株MPa的MIC值有4个折点以上的变化,但总体耐药率差异无统计学意义(P>0.05);30株多重耐药Pa株中,均存在外排泵Mex-AB-OprM的高表达,多重耐药菌组外排泵表达量达敏感组的36.5倍。当外排泵抑制剂CCCP浓度为7.5μg/ml时,庆大霉素(GEN)、环丙沙星(CIP)、四环素(TET)MIC值不变或增加的菌株(≥1MIC组)与MIC值减小的菌株(≤1/2MIC组)的外排泵相对表达量之间有着显著性的差异(P<0.05),而头孢噻肟(CTX)MIC值不变或增加的菌株(≥1MIC组)与MIC值减小的菌株(≤1/2MIC组)的外排泵相对表达量之间无显著性的差异(P>0.05)。结论:外排泵MexAB-OprM在多重耐药铜绿假单胞菌临床分离株中起着十分重要的作用,MexAB-OprM的高表达与多重耐药Pa菌庆大霉素、环丙沙星的耐药性有着密切关系,可能起着基础性耐药作用,但其对头孢噻肟的耐药性影响较小。其高表达还与庆大霉素、环丙沙星、四环素的耐药有着直接的量的关系,具体机制有待进一步的研究。
- 刘洋李方去蒋伟燕杨爱平杨锦红王金文张颖赵飞李向阳
- 关键词：多重耐药铜绿假单胞菌RT-PCR
- 血培养不同报警时间段与分离菌株种类的关系被引量：3
- 2011年
- 目的:了解血培养阳性分离菌的种类和分析仪器报警时间与菌血症之间的关系。方法:对本院收集到的2054份血培养标本进行回顾性分析。结果:2054份血培养标本中198份阳性,其中革兰阳性球菌占67.2%,革兰阴性杆菌占32.8%,分离株以凝固酶阴性葡萄球菌和大肠埃希菌为主,主要分布在新生儿科、重症监护室。导致菌血症的病原菌共96株,主要集中在12 h～24 h,为57例。在报警时间<12 h、12 h～24 h、24 h～48 h、48 h～72 h间病原菌比率依次为84.2%6、3.3%、34.8%、20.0%,不同阳性报警时间的病原菌比率有明显差异(χ2=32.138,P=0.000)。结论:血培养阳性报警的污染菌比率很高,血培养瓶中原始菌量越少,达到报警阈值的培养时间就越长,是污染菌的可能性就越大,应严格无菌操作,结合报警时间和临床资料,避免抗生素的滥用。
- 田鹏鹏刘丽王金文张颖李向阳
- 关键词：血培养菌血症病原菌污染菌
- 腹泻患儿A群轮状病毒G血清型和P基因型分析被引量：13
- 2011年
- 目的了解儿童腹泻标本中人轮状病毒（human rotavirus）分离株G血清型和P基因型的流行特点。方法选取2007年5月-2010年4月浙江省温州医学院附属第二医院因腹泻症状就诊儿童粪便标本9 980例,经胶体金法筛检A群轮状病毒抗原阳性标本,留取其中2009年11月-2010年4月≤5岁住院腹泻患儿且轮状病毒抗原阳性标本168份,采用逆转录-巢式PCR反应,对VP7、VP4基因均阳性的153份标本进行血清G和基因P分型。结果检测儿童腹泻粪便标本9 980例,轮状病毒抗原阳性3 544例,阳性率35.51%,以6~12月龄段检出率最高,男女性检出率差异无统计学意义（P=0.673）;153例VP7基因阳性中,G3型79份,占51.63%;G1型40份,占26.14%;G1G3型20份,占13.07%;G2G3型3份,占1.96%;未分型11份,占7.19%;P〔8〕型104份,占67.97%;P〔4〕型3份,占1.96%;P〔8〕P〔4〕型1份,占0.65%;未分型45份,占29.41%;G血清型和P基因型的组合以G3P〔8〕为主,占33.33%（51/153）。结论 A群轮状病毒以G3型为主,其次为G1型,P基因型以P〔8〕型为主。
- 王金文刘彩霞杨爱平张颖刘洋赵飞李向阳
- 关键词：轮状病毒腹泻分子流行病学
- LBP、sCD14与LPS相互作用对巨噬细胞释放TNF-α的影响被引量：7
- 2011年
- 目的研究脂多糖结合蛋白(LBP)、可溶性CD14(sCD14)与脂多糖(LPS)相互作用后对巨噬细胞产生TNF-α的影响。方法用PMA诱导THP-1细胞为巨噬细胞;设定LPS浓度为1ng/ml,以100、10、1、0.1、0.01的比例,将LBP-LPS混合37℃孵育15min后分别加入细胞培养板中;以及混合后不孵育直接加入;同时设立LBP对照组。在LPS浓度为10ng/ml和1ng/ml两组中,分别加入1、0.5、0.1、0.01μg/ml的sCD14,混合37℃孵育15min后分别加入两组细胞培养板中;以及混合后不孵育直接加入;同时设立sCD14对照组。用免疫化学发光法检测TNF-α的释放情况。最后对数据进行统计学分析。结果 LPS浓度为1ng/ml分泌TNF-α最低(143±9pg/ml),与10、100、1000ng/ml间比较有统计学差异,P均<0.05;10、100、1000ng/ml三组间无统计学差异(P>0.05);TNF-α的释放量随着LPS的浓度增高会出现饱和现象。浓度为0.01、0.1、1、10、100ng/ml的LBP刺激巨噬细胞TNF-α的释放量分别为39.4±1.2、107±5、109±3、102±1、119±9pg/ml。LBP/LPS浓度比值≤10时,TNF-α释放量随LBP/LPS浓度比值增大而增高,在LBP/LPS浓度比值为10时释放量最高;未孵育组结果为231±10pg/ml,预孵育组结果为164±7pg/ml;两组TNF-α释放量有显著性差异(P<0.01)。在LBP/LPS比值为100时,TNF-α释放量下降;未孵育组结果为149±7pg/ml,预孵育组结果为138±2pg/ml。LPS浓度为0时,随着sCD14浓度增加,THP-1细胞释放TNF-α未见增加。LPS浓度为1ng/ml,sCD14浓度为0.01μg/ml和0.1μg/ml时,TNF-α释放量无显著性差异(P=0.515和0.566);sCD14浓度为0.5和1μg/ml,结果有显著性差异(P=0.017和P<0.01)。在LPS浓度为10ng/ml,sCD14浓度为0.5μg/ml和1μg/ml时TNF-α释放量结果均有显著性差异(P<0.01)。未预孵育组与预孵育组TNF-α的释放量结果有显著性差异(P=0.014)。结论 LBP能活化巨噬细胞,低浓度LBP可促进LPS刺激巨噬细胞释放TNF-α,且释放量随LBP浓度的增加而增加;高浓度LBP对LPS刺激巨噬细胞�
- 张颖舒旷怡王金文赵飞刘洋李向阳
- 关键词：LBPSCD14TNF-Α
- 外排泵adeB基因高表达在鲍氏不动杆菌临床分离株产生泛耐药中的作用被引量：3
- 2010年
- 目的探讨外排泵adeB基因高表达在鲍氏不动杆菌临床分离株产生泛耐药中的作用。方法 M-H琼脂稀释法检测临床分离的泛耐药鲍氏不动杆菌(PRABA)对常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)及羰氰氯苯腙(CCCP)处理前后MIC值的变化情况,聚合酶链反应(PCR)和实时荧光RT-PCR检测泛耐药株adeB基因及adeBmRNA量。结果 PRABA对环丙沙星、四环素、头孢噻肟较CCCP处理前其MIC下降两个折点;头孢西丁下降4个折点,1号与5号菌株庆大霉素下降6个折点,为原MIC值的1/64;10株PRABAadeB基因阳性,2株全敏感鲍氏不动杆菌(PSABA)未检测到adeB基因,PRABAadeB基因mRNA的表达量平均为(0.84E+3)拷贝。结论主动外排泵adeB基因高表达与鲍氏不动杆菌产生泛耐药相关。
- 李方去杨爱平蒋伟燕刘洋王金文杨锦红李向阳
- 关键词：鲍氏不动杆菌泛耐药
