琚春梅
- 作品数：80 被引量：265H指数：10
- 供职机构：华南农业大学兽医学院广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术轻工技术与工程更多>>
- CSFV对猪树突状细胞表面分子表达的影响
- 本研究通过分离猪外周静脉血，用贴壁法获得单核细胞，体外联合应用重组猪源GM-CSF和IL-4诱导培养DC。用CSFV感染和灭活CSFV作用于DC，用流式细胞术检测猪DC表面MHC-Ⅱ-DR、CD1和CD172a的表达，分...
- 王伟芳沈海燕赵明秋琚春梅高健潜陈立军陈金顶
- 关键词：猪瘟病毒病毒感染免疫学检验树突状细胞
- 文献传递
- 猪2型圆环病毒ORF1与ORF2基因和伪狂犬病毒基因的重组与表达的研究被引量：15
- 2005年
- 根据GenBank发布的猪2型圆环病毒(PCV2 )序列(AY0 35 82 0 ) ,设计两对特异性引物,采用PCR方法,分别扩增了猪2型圆环病毒ORF1和ORF2基因。将ORF1和ORF2基因的PCR产物回收并酶切后,依次插入到伪狂犬病毒gE gI双缺失通用转移载体pIECMV中,构建了猪2型圆环病毒_伪狂犬病毒重组中间转移质粒pIEORF1_ORF2。采用脂质体介导法,将重组中间转移质粒pIEORF1_ORF2与伪狂犬病毒TK- gE- LacZ+ 基因组共转染IBRS_2细胞,待发生细胞病变后收集病毒液进行空斑纯化,利用检测PCV2ORF1基因和ORF2基因的PCR方法筛选重组病毒TK- gE- gI- ORF1-ORF2 + ,用Southernblotting鉴定重组病毒,并用Westernblotting检测ORF1_ORF2融合蛋白的表达情况,在此基础上也测定了重组病毒在不同细胞上的增殖滴度。结果表明,外源基因ORF1和ORF2已成功插入到TK- gE- LacZ+ 亲本株的基因组中,并获得了表达,表达的蛋白可与PCV2阳性血清发生反应。同时发现ORF1和ORF2基因的插入不影响重组病毒的增殖特性,其毒力与亲本株相当。
- 琚春梅陈焕春樊惠英刘正飞曹胜波
- 猪圆环病毒2型ORF2基因在昆虫细胞中的表达及其特性被引量：16
- 2005年
- 利用BactoBac杆状病毒表达系统将圆环病毒2型的ORF2全基因克隆到杆状病毒转移载体pFastBacTM1中,获得重组转移载体pFastOFR2,再将其转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,发生转座作用,经蓝白菌落筛选得到含ORF2基因的重组穿梭载体Bac.ORF2,以脂质体介导的方法将重组穿梭载体转染sf9细胞,获得重组病毒,命名为Ac.ORF2。间接免疫荧光分析表明,PCV2阳性血清能使Ac.ORF2感染的sf9昆虫细胞呈强的荧光着色;SDSPAGE与Westernblotting分析可见大小约为28kD的特异性带,表明Ac.ORF2在sf9细胞中成功表达了PCV2ORF2蛋白。将该表达蛋白纯化并经磷钨酸负染后,通过电镜观察可见形态与PCV2病毒粒子相似的病毒样颗粒(VLPs),其中某些颗粒由于中心浓染而似空衣壳,其直径也为17nm左右。
- 樊惠英陈焕春佟铁铸琚春梅吕建强黄红亮
- 关键词：猪圆环病毒2型病毒样颗粒
- 猪圆环病毒研究进展被引量：34
- 2002年
- 猪圆环病毒 ( Porcine circovirus,PCV)是断奶猪多系统衰竭综合征 ( Postweaningmultisystemic wasting syndrome,PMWS)的病原。本文对其流行病学、理化特性、致病机理。
- 刘正飞陈焕春琚春梅曹胜波
- 关键词：猪圆环病毒多系统衰竭综合征
- 猪瘟病毒感染对猪树突状细胞免疫学功能影响的研究
- 为了研究猪瘟病毒(CSFV)感染对树突状细胞(DC)功能的影响。将CSFV GXW-07株以MOI=1的量感染未成熟DC,流式细胞术检测显示,GXW-07株的感染不影响DC表面分子MHC-Ⅱ的表达,但可上调其表面分子CD...
- 陈立军赵明秋琚春梅沈海燕康艳梅胡永明陈金顶
- 关键词：猪瘟病毒树突状细胞IL-10
- 文献传递
- 油茶废弃物中纳米脂肪酸钙的制备与应用研究被引量：2
- 2017年
- 本文以油茶加工废弃物油脚、皂脚为原料,经酶法提取和分子蒸馏分离脂肪酸,进而制成脂肪酸钙,再结合沉淀法、高速制乳(6,000-10,000r/min乳化法)和微孔(0.20~0.25μm)滤膜法,制备稳定性更好的脂肪酸钙纳米粒,并对其进行了表征,也简述了其用途与作饲料添加剂的应用前景。
- 戴述诚叶勇琚春梅
- 关键词：油茶油脚皂脚纳米粒脂肪酶
- 1猪2型圆环病毒ORF2基因的克隆及其重组伪狂犬病毒中间转移质粒的构建
- 猪圆环病毒(Porcine Circovirus,PCV)是近年来兽医界广泛关注的新发现的病毒之一。该病毒基因组为环状单链DNA,大小约为1.7kb,病毒粒子无囊膜,呈二十面体对称,直径约为17nm。1995年,国际病毒...
- 琚春梅陈焕春郗鑫刘正飞曹胜波
- 文献传递
- 伪狂犬病病毒Ea株糖蛋白基因gL的克隆和序列分析
- 2002年
- 根据已发表的基因序列设计了 1对PCR引物 ,以伪狂犬病病毒Ea株 (pseudorabiesvirusEa ,PRVEa)基因组DNA为模板 ,扩增出一大小为 5 11bp的片段。通过酶切和测序证实 ,该基因为伪狂犬病病毒Ea株的又一糖蛋白基因 ,即gL基因。Blast软件分析表明 ,该基因与Kaplan株核苷酸序列的同源性为 94% ,氨基酸序列的同源性为 95 %。将测序结果输入GenBank ,获得登录号AF44 845 6。
- 刘正飞陈焕春琚春梅吴斌何启盖
- 关键词：伪狂犬病病毒EA株克隆糖蛋白基因
- 伪狂犬病病毒gB基因的原核表达及间接ELISA方法的建立被引量：7
- 2015年
- 为了建立评价伪狂犬病疫苗免疫效果的方法,应用PCR方法扩增gB基因的主要抗原表位区序列,大小为768bp,用BamHⅠ和HindⅢ双酶切后克隆至pET-32a(+)载体,构建重组表达质粒pETgB768,转化大肠埃希菌BL21(DE3)后,通过IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot检测融合蛋白的表达情况及其反应原性。用纯化的gB768蛋白作为包被抗原建立间接gB768-ELISA检测方法,试验结果表明,该方法具有良好的敏感性、特异性、重复性。用该方法检测128份临床送检猪血清样本,并与商品化ELISA试剂盒检测结果进行比较,符合率为93.8%。该方法的建立为猪伪狂犬病疫苗免疫效果的评估奠定了基础。
- 王雨吉艺宽程艺张宝石向柯宇琚春梅
- 关键词：伪狂犬病病毒GB基因
- 兽医微生物学与免疫学实验综合教学体系的构建被引量：5
- 2013年
- 设计性和开放式的实验教学模式是各农业高校在建立独立的实验教学体系改革中的一种探索。为了满足高素质兽医人才的培养需求,本文在整合和优化兽医微生物学与免疫学实验内容的基础上,对如何改变验证性的传统教学模式,构建研究设计性综合实验教学体系进行了探讨。
- 罗永文郭慧霞琚春梅陈金顶郭霄峰
- 关键词：兽医微生物学实验教学改革
