甘春晖
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:华中科技大学环境科学与工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学环境科学与工程更多>>
- 鱼腥藻PCC7120细菌光敏色素缺失突变体的自催化重组研究被引量:1
- 2005年
- 采用聚合酶链式反应(PCR)从鱼腥藻PCC 7120 DNA中扩增出细菌光敏色素缺失突变体基因aphA(26-320)、aphA(27-320)、aphA(28-320)、aphA(29-320)和aphA(32-320),利用表达载体pET 30a进行高效表达,获得的A phA缺失突变体脱辅基蛋白在一定的反应体系下与藻蓝胆素进行了体外重组的研究。研究表明:A phA(26-320)体外重组获得的色素蛋白具有与植物光敏色素相似的可逆光致变色效应,同时酸性尿素变性实验和Zn2+荧光电泳实验显示藻蓝胆素和以上蛋白质发生共价连接。A phA(26-320)与藻蓝胆素重组产物的P r/P fr吸收峰处于660/610nm。其他4个缺失突变体,A phA(27-320)、A phA(28-320)、A phA(29-320)、A phA(32-320)和藻蓝胆素的重组产物中则没有发现可逆光致变色信号,表明这些缺失突变体不能和藻蓝胆素发生自催化重组。维系细菌光敏色素A phA与色素自催化连接的裂合酶结构域位于A phA(26-320)包含的肽链之中。
- 甘春晖冉勇赵开弘
- 关键词:细菌光敏色素缺失突变体体外重组
- 藻胆蛋白ApcE缺失突变体的自催化重组研究被引量:1
- 2006年
- 采用聚合酶链式反应(PCR)扩增出Anabaena.spPCC7120别藻蓝蛋白ApcE(1-240)的一系列缺失突变体基因:apcE(14-240)、apcE(25-240)、apcE(63-240)、apcE(85-240)、apcE(121-240)、apcE(133-240)、apcE(187-240),在大肠杆菌中高效表达分别获得相对应的缺失突变体蛋白。对上述脱辅基蛋白与藻蓝胆素(PCB)的体外自催化重组进行了研究。结果表明:在含有4 mol/L尿素的磷酸钾缓冲体系中,ApcE(25-240)脱辅基蛋白可与藻蓝胆素体外重组实现共价连接,获得的色素蛋白质具有最大吸收峰(λmax=656 nm)和荧光发射峰(λmax=670 nm),其余6个缺失突变体蛋白仅能与藻蓝胆素非共价连接,不能发生自催化重组。该结果为进一步研究连接多肽ApcE的结构和功能提供了信息,具有重要意义。
- 刁红丽甘春晖周明赵开弘
- 关键词:藻胆体藻蓝胆素缺失突变体体外重组
- 自催化重组藻胆蛋白结构与功能的关系
- 藻胆蛋白是一类结构相似的色素蛋白。根据它们的吸收光谱,藻胆蛋白可分为藻蓝蛋白(phycocyanin,简称PC)、藻红蛋白(phycoerythrin,简称PE)和别藻蓝蛋白(allophycocyanin,简称APC)...
- 甘春晖
- 关键词:细菌光敏色素缺失突变定点突变藻胆蛋白