聂东宋
- 作品数：54 被引量：196H指数：6
- 供职机构：湖南理工学院化学化工学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省教育厅科研基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学化学工程更多>>
- DSCR1抗体制备与应用
- 2006年
- 本实验利用Fmoc固相多肽合成的方法合成DSCRI氨基端一个多肽片段(55-70AA),经HPLC纯化后偶联到匙孔槭血蓝蛋白,免疫新西兰雄兔后采血检测、纯化、经Westem blotting、免疫沉淀证实得到的抗体为抗DSCR1的特异抗体。谊抗体即能检测人源DSCR1蛋白,又能检测小鼠的DSCR1蛋白。运用获得的DSCR1多克隆抗体进行功能研究。发现DSCR1广泛存在泛素化,参与泛素化-蛋白酶体途径。
- 寻晓红刘宇聂东宋
- 关键词：阿尔茨海默病免疫沉淀泛素化
- HCV核心蛋白在大肠杆菌中的表达及免疫学特性分析
- 2008年
- 目的:表达HCV核心蛋白,为检测丙肝病毒提供合适抗原。方法:以含HCV核心全长cDNA克隆的pMD18T/core质粒为模板,PCR扩增全长的HCV核心抗原基因,插入表达载体pQEN1构建重组质粒pQEN1/Core,转化BL-21(DE3)大肠杆菌,IPTG诱导表达6×His融合蛋白,表达产物经SDS-PAGE及Western blot检测和鉴定。结果:经SDS-PAGE及Western blot显示HCV核心蛋白在大肠杆菌中正确表达,融合蛋白分子量约为22 kD,表达量约占菌体蛋白总量的30%。纯化后的C蛋白能与慢性丙型肝炎患者有血清反应。结论:HCV核心蛋白在大肠杆菌中成功表达并具有较强的抗原性。
- 张如新聂东宋
- 关键词：HCV核心抗原血清学反应
- 毕赤酵母表达HWTX-Ⅰ的不均一性分析被引量：5
- 2006年
- 为了寻找毕赤酵母表达虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ(HWTX-Ⅰ)时产生不均一性表达产物的原因,应用阳离子交换层析、反相HPLC、Tricine SDS-PAGE电泳、质谱等技术,对基因工程菌Pichia pastorisGS115/HWTX-Ⅰ表达的不均一产物进行了分离、纯化和鉴定,并对不均一产物的N端和C端进行测序,结果表明表达产物的不均一性主要体现在重组HWTX-Ⅰ的N端信号肽加工的不完全以及C末端的内部降解。生物学活性分析表明该不均一产物的活性仅为天然HWTX-Ⅰ活性的30%。同时,对如何避免不均一性表达产物的产生提出了相应的对策。
- 聂东宋周延凯曹佐英刘宇
- 关键词：毕赤酵母不均一性基因工程
- 血吸虫病肝纤维化实验动物模型的建立与评价被引量：3
- 2009年
- 目的建立及评估血吸虫病肝纤维化实验动物模型。方法以34只日本大耳白兔为实验动物,随机分为3组,即高剂量组(A组)、低剂量组(B组)及对照组(C组)建立肝纤维化模型,每只感染日本血吸虫尾蚴100条,感染后12～13周,高剂量组和低剂量组采用清肝口服液(DHT)进行干预治疗;感染后18周,按吡喹酮剂量300mg/kg体重对3组动物进行杀虫治疗,以病理学和血清HYP、HA水平作为模型评估指标。结果感染后第12～13周,肝纤维化模型形成,从病理学结果、生化指标均产生了不同程度的改变。A组、B组干预治疗后血清中的HYP/HA较干预前明显降低(P<0.01);肝组织病理学结果显示:肝纤维化程度依次为高剂量组<低剂量组<对照组(P<0.01),且血清HYP、HA含量随着病理肝纤维化程度增高而升高。结论检测血清HYP和HA水平是评价和考核肝纤维化治疗效果的简便、快速、可靠、又无损伤的指标,而且与病理学检查结果相符,具有实际应用价值。
- 何永康周杰喻鑫玲刘宇聂东宋候循亚孙渊朱剑君赵雅琴李岳生
- 关键词：实验动物日本血吸虫肝纤维化
- 用PCR直接筛选和鉴定虎纹捕鸟蛛毒素I的重组阳性克隆
- 2001年
- 以合成的两段插入序列为上、下游引物用PCR法直接筛选插入有虎纹捕鸟蛛毒素I(HWTX I)cDNA的重组阳性克隆。并用PCR法快速鉴定重组体中插入片段的正、反连接方向 ,扩增用引物是以位于克隆位点上游的一段载体序列为上游引物 ,以插入序列为下游引物。对 10 0个单克隆进行了上述两次PCR筛选鉴定 ,选取 2个有靶片段插入并且为正向连接的重组子进行测序 。
- 何宁佳聂东宋梁宋平
- 关键词：PCR重组体
- 人类睾丸凋亡相关基因蛋白(TSARG2)在大肠杆菌中的表达和纯化
- 2006年
- 目的获得重组TsARG2基因蛋白,为进一步研究其功能和制备特异抗体奠定基础.方法根据已报道的TsARG2基因序列,采用RT-PCR的方法获得TsARG2基因.将所得的PCR产物插入原核表达载体pQE30中,得重组质粒(pQE/TSARG2)并转化大肠杆菌(E.coli)M15,通过IPTG诱导表达出带有六个组氨酸的融合蛋白,采用镍固定金属亲和层析法纯化.结果序列分析表明TSARG2基因成熟肽编码区含有918bp,编码305个氨基酸;与GenBank(AY040204)中已报道的TSARG2分离物的核苷酸序列有100%同源性.经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析显示,表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的66%,分子质量约为35kDa.经Ni2+-NTAagarose纯化获得SDS-PAGE电泳下单一条带.结论在大肠杆菌中获得了TsARG2基因蛋白的高效表达,为研究其生物学功能和制备单克隆抗体奠定了基础.
- 邓云聂东宋卢光琇
- 关键词：大肠杆菌
- 丙型肝炎病毒系列检测试剂盒的研制与应用
- 聂东宋胡道奇周咏武周松
- 丙型肝炎是可致死的全球十大传染病之一，感染者中绝大部分可发展成慢性肝炎、肝硬化和肝癌，危害极大，目前尚无有效的疫苗预防，因此早期诊断是防止丙型肝炎病毒（HCV)传播的有效手段。
该项目在国家“863”计划、湖南省科技“...
- 关键词：
- 关键词：丙型肝炎病毒传染病检测试剂盒
- 莽山烙铁头蛇粗毒双向凝胶电泳分析被引量：2
- 2011年
- 采用固相pH梯度等电点聚焦-SDS双向聚丙烯酰胺凝胶电泳对莽山烙铁头粗毒进行了分析,通过银染法显色,电脑软件识别出约40个蛋白质点.其中分子量超过130 kD的蛋白质点很少,分子量90 kD^10 kD的区域均有蛋白质点分布,分子量34 kD区域的蛋白质点较为密集,且它们的含量明显较高.从蛋白质点的等电点分布范围分析,偏于碱性端的蛋白质明显多于酸性端的蛋白质,且分布在中性偏碱(pH 7~8)的区域.质谱数据的数据库搜寻结果表明:莽山烙铁头蛇毒中含有类凝血酶组分、纤溶酶组分、血小板聚集蛋白、抗血小板聚集蛋白和平滑肌钙离子通道阻断剂等组分.
- 聂东宋刘宇吴喆刘立超朱政斌
- 关键词：二维电泳蛋白质组
- 动物肽类神经毒素基因工程研究进展被引量：5
- 2001年
- 介绍了克隆动物肽类神经毒素cDNA和基因组基因克隆的方法 ,以及毒素cDNA结构和毒素蛋白前体的翻译后加工过程 .概述了毒素蛋白基因组基因的结构及其mRNA前体的加工过程 .综述了在毒素蛋白的基因工程方面已取得的进展 。
- 聂东宋梁宋平李敏
- 关键词：CDNA基因克隆基因工程
- 神经干细胞分化机制研究进展被引量：5
- 2005年
- 周延凯聂东宋葛大兵
- 关键词：神经干细胞细胞分化细胞因子
