胡凤仙
- 作品数:13 被引量:0H指数:0
- 供职机构:华东理工大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:化学工程农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 适应性进化与甜菜碱的添加促进安丝菌素的生产
- 2019年
- 【背景】安丝菌素是一类由珍贵束丝放线菌橙色亚种(Actinosynnema pretiosum ssp.auranticu)生产的美登素类衍生抗生素,属于大环内酰胺类物质,根据不同的C-3位基团可以分为一系列衍生物。目前已上市的高效抗癌药物曲妥珠单抗(T-DM1)以AP-3 (Ansamitocin P-3)为生产底物,并表现出很好的乳腺癌治疗效果。然而当前AP-3的产量较低,其过高的成本限制了进一步发展。【目的】应用适应性进化及添加适量甜菜碱策略提高安丝菌素AP-3的产量。【方法】以珍贵束丝放线菌橙色亚种为出发菌株,链霉素和巴龙霉素为胁迫压力进行适应性进化,筛选出安丝菌素积累较高的菌株,随后向进化菌株的发酵培养基中添加0.1%的甜菜碱,AP-3的产量进一步提高,同时分析了进化菌株AP-3相关基因的转录水平,初步探索进化菌株安丝菌素积累提高的原因。【结果】得到2株进化菌株Str16-4-4和Par16-2-1,发酵7d后AP-3产量分别提高了33.4%和31.7%,添加甜菜碱后其AP-3产量相比出发菌株提高了54.6%和47.4%。【结论】通过适应性进化的策略获得了AP-3生产能力提高的珍贵束丝放线菌橙色亚种进化菌株,对促进AP-3的生产提供了新思路,而且为适应性进化策略提高目标产物的产量提供了新的例证。
- 许文龙胡凤仙刘婷韦柳静花强
- 关键词:适应性进化甜菜碱
- CRISPR/Cas9编辑大肠杆菌工程菌生产氨基葡萄糖
- 2023年
- 【背景】氨基葡萄糖(glucosamine,GlcN)及其衍生物N-乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine,GlcNAc)是合成糖胺聚糖的重要前体物质,在医药、化妆品和保健品领域具有广泛的应用价值。传统的生产方式存在诸多弊端,如环境污染、原料限制、不适于海鲜易过敏人群等问题,因此利用微生物发酵法生产GlcN和GlcNAc越来越受到青睐。【目的】利用微生物发酵生产并提高N-乙酰氨基葡萄糖的产量,探索分子改造及发酵条件优化策略。【方法】以大肠杆菌MG1655为出发菌株,首先利用表达载体共表达大肠杆菌来源的glmS和酿酒酵母来源的gna1,构建GlcNAc的生物合成路径,然后利用CRISPR/Cas9技术敲除GlcNAc的分解代谢与转运途径,以提高GlcNAc的产量,最后结合发酵条件优化使GlcNAc的产量得到进一步提升。【结果】通过分子改造得到一株产GlcNAc菌株RY-5,发酵20 h后GlcNAc的产量达到了2.36 g/L,相较于初始构建的菌株RY-1提高了29倍,进一步对装液量和诱导剂IPTG的添加时间等条件进行发酵优化,GlcNAc产量达到了7.74 g/L,与优化前相比提高了2.3倍。【结论】成功构建一株生产GlcN和GlcNAc的重组大肠杆菌工程菌株,并为微生物合成GlcN和GlcNAc的工业化生产奠定了基础。
- 吉瑞阳刘枫花强胡凤仙
- 关键词:大肠杆菌氨基葡萄糖N-乙酰氨基葡萄糖发酵优化
- 一种生产山梨醇和葡萄糖酸盐的方法
- 本发明涉及一种生产山梨醇和葡萄糖酸盐的方法,以菊芋块茎为原料,将其制备成菊芋汁或菊芋浆,向菊芋汁、浆中添加菊糖酶或稀酸,可得到富含果糖、葡萄糖单糖的菊芋水解液;以菊芋水解液为碳源,补入适量的葡萄糖使葡萄糖和果糖的质量或摩...
- 鲍杰胡凤仙刘长俊
- 文献传递
- 利用固定化运动发酵单胞菌催化菊粉果糖和木薯葡萄糖生产高浓度山梨醇和葡萄糖酸的方法
- 本发明涉及利用固定化运动发酵单胞菌催化菊粉果糖和木薯葡萄糖生产高浓度山梨醇和葡萄糖酸的方法,具体步骤为:(1)高浓度等摩尔的菊粉果糖和木薯葡萄糖混合水解液的酶法制备;(2)重组运动发酵单胞菌的细胞固定化;(3)利用固定化...
- 鲍杰安克红胡凤仙
- 文献传递
- 菊粉生物转化制备葡萄糖酸钠与山梨醇过程的结晶分离
- 2013年
- 以菊芋和木薯淀粉生物转化获得的葡萄糖酸钠和山梨醇混合溶液为研究对象,进行的结晶分离。在葡萄糖酸钠和山梨醇溶液中加入氯化钙,将高溶解度的葡萄糖酸钠转化为低溶解度的葡萄糖酸钙,利用葡萄糖酸钙和山梨醇溶解度不同进行结晶分离。对影响葡萄糖酸钙结晶的氯化钙加入量、乙醇加入量、结晶温度和时间等重要因素进行研究,结果表明在最佳的结晶条件下,葡萄糖酸钙与山梨醇可以实现较好的分离,葡萄糖酸钙的结晶得率为84.2%。
- 李昆张建胡凤仙鲍杰
- 关键词:葡萄糖酸钠葡萄糖酸钙山梨醇
- 以菊粉类生物质为原料的无酶添加生产高浓度乙醇的方法
- 本发明涉及以菊粉类生物质为原料的无酶添加生产高浓度乙醇的方法,使用酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae DQ1作为发酵菌种,在同一生物反应器内同时进行菊粉酶生产、菊粉酶催化菊粉生成单糖和单糖发酵生产乙...
- 鲍杰国立浩楚德强张建胡凤仙
- 文献传递
- 利用固定化运动发酵单胞菌催化菊粉果糖和木薯葡萄糖生产高浓度山梨醇和葡萄糖酸的方法
- 本发明涉及一种利用固定化重组运动发酵单胞菌同时催化菊粉果糖和木薯葡萄糖生产山梨醇和葡萄糖酸的方法,具体步骤为(1)高浓度等摩尔的菊粉果糖和木薯葡萄糖混合水解液的酶法制备;(2)重组运动发酵单胞菌的细胞固定化;(3)利用固...
- 鲍杰安克红胡凤仙
- 文献传递
- 一种珍贵束丝放线菌的基因编辑质粒及其应用
- 本发明公开了一种适用于珍贵束丝放线菌的基因编辑质粒,所述基因编辑质粒以CRISPR‑Cas9质粒工具的骨架为基础,通过根据珍贵束丝放线菌(A.pretiosum)的偏好,将Cas9蛋白编码序列cas9核酸序列的密码子优化...
- 花强郭思妤李娟孙雪媛刘枫冯世昌胡凤仙陈骏
- 一种以硅藻土为载体的共固定化双酶的制备方法、应用
- 本申请设计了一种以硅藻土为载体的共固定化双酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤S1、将酮酯还原酶和葡萄糖脱氢酶冻干粗酶粉用缓冲液溶解,得到混合酶液;步骤S2、在所述混合酶液中加入载体材料硅藻土混合均匀,吸附一定时...
- 胡凤仙郑高伟薄静怡陈琦
- 以菊粉类生物质为原料的无酶添加生产高浓度乙醇的方法
- 本发明涉及以菊粉类生物质为原料的无酶添加生产高浓度乙醇的方法,使用酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae DQ1作为发酵菌种,在同一生物反应器内同时进行菊粉酶生产、菊粉酶催化菊粉生成单糖和单糖发酵生产乙...
- 鲍杰国立浩楚德强张建胡凤仙
- 文献传递