薄清如
- 作品数：68 被引量：218H指数：9
- 供职机构：珠海出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目广东省科技计划工业攻关项目珠海市软科学研究计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 鸡马立克氏病外周血液ANAE^＋T淋巴细胞动态被引量：3
- 1995年
- 鸡马立克氏病外周血液ＡＮＡＥ￣＋Ｔ淋巴细胞动态程相朝，宋文成（洛阳农业专科学校牧医系，１７１００３）薄清如，邱震东（解放军农牧大学）为进一步探讨鸡马立克氏病时外周血液淋巴细胞增殖的意义，我们对人工感染京毒１号ＭＤ强毒鸡外周血液酸性：小醋酸萘酯酶阳性（...
- 程相朝宋文成薄清如邱震东
- 关键词：鸡病马立克氏病外周血液淋巴细胞增殖
- 鸡马立克氏病淋巴瘤的病理学研究Ⅰ、细胞化学及图像分析
- 经ATPase、ACP和AMAE染色表明:马立克氏病(MD)淋巴瘤中具有T细胞标志的约占66％,8细胞标志的约占25％,巨噬细胞约占9％.图象分析表明:MD肿瘤按细胞形态可以分为两类,细胞大小均匀一致的小淋巴瘤,肿瘤细胞...
- 薄清如郑兆荣邱震东刘宝岩黄建珍高丰程相朝
- 关键词：病理学研究细胞化学
- 文献传递
- 实时荧光RT-PCR鉴别检测美洲型PRRSV及其变异株被引量：3
- 2011年
- 本研究建立了美洲型猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syn-drome virus,PRRSV）通用实时荧光RT-PCR和PRRSV变异株特异性实时荧光RT-PCR检测方法,对方法的灵敏度和特异性进行了验证,并对24个临床可疑样品进行检测。结果显示,实时荧光RT-PCR可以检测到0.47 TCID50的病毒培养液,灵敏度略高于病毒分离方法;两个实时荧光RT-PCR都具有良好的特异性,无交叉反应。在对24个临床可疑样品的检测中,阳性率与病毒分离方法一致（21/24）,检测时间也缩短为70 min。本研究建立的方法有潜力应用于传统美洲型PRRSV及其变异株（NSP2 1594~1680缺失）感染引起的PRRS和高致病性PRRS的监测和鉴别诊断。
- 罗宝正王连想薄清如王爱民徐海聂黄好兴
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株实时荧光RT-PCR
- 禽流感群特异性间接原位RT-PCR检测方法
- 2009年
- 从GenBank下载禽流感病毒(Auian in fluenza virus,AIV)NP基因序列,通过比对选取NP基因中较为保守的片段,设计1对引物,通过RT-PCR方法扩增270 bp的目的片段,经测序确认目的片段序列正确后,用地高辛标记扩增产物制备探针。在BSL-3实验室,用AIV人工感染鸡胚成纤维细胞和SPF鸡后,制作细胞涂片和组织石蜡切片,然后在经前处理后的细胞涂片和石蜡切片上进行原位RT-PCR,再与地高辛标记的探针进行原位杂交,对细胞和组织中的AIV进行检测和定位。研究结果表明,本方法能检测出约1μg/L质粒的DNA,并能特异性地在细胞涂片和石蜡组织切片中检测和定位AIV,且成纤维细胞感染病毒8 h后即可检测到阳性信号,具有良好的特异性和较高的敏感性,为动物组织中AIV的检测定位和致病机理研究提供了敏感、特异和更为直观的方法。
- 杨素陈博文秦爱建廖明薄清如廖秀云沙才华王娟任涛曹伟胜
- 关键词：禽流感细胞涂片石蜡切片
- TaqMan探针荧光PCR检测副猪嗜血杆菌方法的建立和应用被引量：5
- 2011年
- 为了建立基于TaqMan探针荧光PCR技术检测副猪嗜血杆菌的方法,本试验参考GenBank已发表的副猪嗜血杆菌(Hemophilus parasuis,HPS)转录起始因子infB基因序列,利用生物学软件Primer Express 2.0设计特异性引物和探针;并对副猪嗜血杆菌标准菌株提取DNA后进行PCR扩增,将产物测序鉴定后克隆到pMD18-T载体,再转化到大肠杆菌感受态细胞,细菌培养后对菌液进行PCR扩增,把产物测序鉴定后获得的重组质粒作为标准阳性对照;最后将建立的TaqMan探针荧光PCR方法进行灵敏度、特异性、稳定性试验。结果显示,该检测方法可以达到1μl 1.0×101拷贝数量级的灵敏度;另外,该方法可以将HPS和大肠杆菌O157、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、猪链球菌分开,特异性良好;稳定性试验显示,2次批内变异系数分别为0.65%和0.92%,批间变异系数为1.31%,稳定性良好。对口岸送检的56份猪肉和12份血浆蛋白粉样品进行检测,结果表明TaqMan探针荧光PCR方法和细菌分离方法的检测效果一致。
- 罗宝正王振全薄清如徐海聂沙才华廖秀云陈伟生
- 关键词：副猪嗜血杆菌荧光PCR
- TaqMan探针荧光RT-PCR检测狂犬病病毒被引量：5
- 2012年
- 根据GenBank已公布的狂犬病病毒(rabies virus,RV)核蛋白(N)基因序列设计并合成一对特异性的引物和探针,建立基于TaqMan探针的荧光RT-PCR检测狂犬病病毒方法。对狂犬病疫苗提取核酸后进行RT-PCR扩增,将目的条带切胶回收,克隆测序,重组质粒作为标准阳性对照。对建立的TaqMan探针荧光RT-PCR方法做灵敏度、特异性、重复性及稳定性试验。结果显示,该方法可以达到10拷贝/μL的灵敏度,可以将狂犬病病毒与犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒分开,方法重复性好,稳定可靠。
- 王振全罗宝正薄清如周昌芳白鸽许远靖王冲吴殿君
- 关键词：狂犬病病毒TAQMAN探针荧光RT-PCR
- 重大及新发动物流感防控技术及新型检测体系的建立
- 薄清如卢体康罗宝正孙洁邵建宏唐连飞秦智锋廖秀云徐海聂陈轩朱忠武莫秋华詹爱军林庆燕廖立珊
- 该项目针对动物流感开展防控技术和新型快速检测技术研究，内容包含了广东省和国家质检总局等单位立项的6个科技计划项目。其中获得国际先进水平的科研成果1个，国内领先水平的科研成果2个、国内先进水平的科研成果2个。项目成果获得国...
- 关键词：
- 关键词：禽流感病毒
- 口蹄疫研究概况被引量：18
- 2004年
- 口蹄疫是偶蹄兽以口、舌、唇、蹄、乳房等部位发生水疱和溃烂为特征的一种急性热性高度接触性传染病 ,作者综述了近年来口蹄疫的病原、流行特点、临床症状、病理变化、防制等研究进展。
- 汪洋亢文华白永平薄清如
- 关键词：口蹄疫防疫病原临床症状病理变化
- 化学合成siRNA抑制H5N1亚型禽流感病毒在鸡胚成纤维细胞中的增殖
- 2013年
- 为研究RNA干涉对H5N1亚型禽流感病毒的增殖抑制作用,针对H5N1亚型禽流感病毒的NP和PA基因,设计4对siRNA干涉序列,并将其转染到鸡胚成纤维细胞,6h后接种H5N1亚型禽流感病毒液,在病毒感染后的16～56h内测定细胞上清中的病毒血凝价及观察细胞病变,并在病毒感染36h后检测NP、PA、HA和β-actin基因的mRNA水平。结果显示4对siRNA均能不同程度地抑制H5N1亚型禽流感病毒在鸡胚成纤维细胞中的增殖,但以PA为靶基因设计的一对干涉序列效果最优;实验还证实随着时间的延长,干涉效应逐渐减弱。本实验为研究RNA干涉技术防控禽流感提供了依据。
- 李儒曙于丹罗宝正薄清如徐海聂沙才华廖秀云
- 关键词：SIRNAH5N1亚型禽流感病毒鸡胚成纤维细胞增殖
- 动物蛋白饲料中动物源性成分的鉴别 1.同一PCR鉴别动物蛋白饲料中牛羊成分被引量：21
- 2003年
- 为了防止牛海绵状脑病 (俗称疯牛病 )和羊痒病传入我国 ,对来自疫区国家的动物源性饲料进行动物种类鉴别非常必要。本研究根据牛羊特异性卫星 DNA建立了同一 PCR体系同时检测羊、牛源性物质的方法。应用 DNA提取液制备模板 ,不但有效地缩短了试验时间 ,还大大降低了成本 。
- 朱绍智黄新民薄清如周志江杨素高彦生赵君徐海聂潘文波陈德镁兰乃洪冯家望陈静静
- 关键词：动物蛋白饲料动物源性成分PCR
