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要晖宇: 作品数：17 被引量：20H指数：3; 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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造血相关干细胞发育与TGF-β/Smad信号调控: 哺乳动物胚胎的早期造血发育分为:原始造血,以卵黄囊产生胚胎红细胞为特征;定向造血,以产生造血干细胞(HSC)为特征,在卵黄囊、主动脉-生殖嵴-中肾(aorta-gonad-mesonephros,AGM)、胎盘独立发生。...; 刘兵要晖宇王晓燕兰雨毛宁杨晓; 文献传递

胚胎干细胞来源的BL-CFC可产生高增殖潜能造血祖细胞被引量：4: 2003年; 小鼠胚胎干细胞 (embryonicstemcell,EScell)体外分化 2 .5 - 3.5天形成的拟胚体 (embryoidbody ,EB)中可产生原始细胞集落形成细胞 (blastcolony formingcell,BL CFC) ,后者具有造血和内皮细胞双向分化潜能 ,是目前体外实验可检测到的最早期的定向造血分化的细胞。本研究建立BL CFC培养体系 ,并通过造血祖细胞集落培养、免疫荧光标记以及巢式RT PCR鉴定单个原始细胞集落来源的贴壁细胞和非贴壁细胞的分化特点。结果表明 :部分贴壁细胞吞噬DiI Ac LDL ,并表达CD31,UEA I ,VE cadherin等内皮细胞特异性的表面分子 ;非贴壁细胞具有原始造血 (primitivehematopoiesis)和 (或 )永久造血 (definitivehematopoiesis)活性 ,其中 2 0 %的原始细胞集落含有高增殖潜能集落形成细胞 (highproliferativepotentialcolony formingcell,HPP CFC) ,后者能形成次级造血集落。结论 :胚胎干细胞来源的BL CFC可产生高增殖潜能造血祖细胞 ,但原始细胞集落来源的HPP; 要晖宇刘兵原野毛宁; 关键词：胚胎干细胞造血分化

内皮细胞特异性缺失PTEN基因对小鼠胚胎AGM区血液血管干细胞发育的影响: 2011年; 本研究探讨内皮细胞特异性缺失PTEN基因能否影响小鼠胚胎AGM区血液血管干细胞(hemangioblast)的发育。基于Cre/loxP系统,获得Tie2CrePtenloxp/loxp和Tie2CrePtenloxp/wt基因型小鼠胚胎。采用PCR方法进行基因型鉴定;分离E10-E10.5胚胎AGM区,用胶原酶消化成单细胞,在甲基纤维素半固体体系里进行BL-CFC(blastcolony-forming cell)培养,4-5天后计数BL-CFC数目。将单个BL-CFC挑出进行扩增培养,悬浮细胞进行造血集落培养,贴壁细胞在Matrigel上进行体外成血管实验,鉴定其双向分化功能。结果表明:内皮细胞特异性缺失PTEN基因,小鼠胚胎AGM区BL-CFC数量下降;同时,BL-CFC的造血分化能力增强,但BL-CFC来源的内皮细胞体外成血管能力下降。结论:内皮细胞特异性缺失PTEN基因,可以在血液血管干细胞水平影响造血和内皮细胞的分化。; 高娇要晖宇梁晓雷王晓燕吴英刘元林毛宁; 关键词：血液血管干细胞 AGM区

拮抗TGF-β_1可抑制胚胎干细胞来源BL-CFC的产生和分化: 2007年; 胚胎干细胞来源的BL-CFC体外可分化产生造血和内皮细胞。为了研究TGF-β1对BL-CFC产生和分化的调控作用,在拟胚体培养阶段施加TGF-β1和TGF-β1中和抗体,观察不同阶段TGF-β1对BL-CFC的数目及其定向内皮和造血细胞分化能力的影响。结果表明:在拟胚体培养阶段拮抗TGF-β1的作用可显著降低BL-CFC的数量(P<0.01);与之吻合的,中和TGF-β1后拟胚体中Flk-1+细胞比例降低。此外,在拟胚体培养阶段加入TGF-β1可显著增强BL-CFC的造血和内皮细胞分化能力,而中和TGF-β1后分化能力降低。结论:TGF-β1对BL-CFC的产生和分化发挥正向调节作用。; 要晖宇刘兵王晓燕毛宁; 关键词：TGF-Β1 胚胎干细胞

小鼠成血-血管细胞发育初探: 该实验以建立的blast集落培养体系为基础,研究BL-CFC的造血和内皮分化潜能以及TGF-β<,1>对BL-CFC的产生和blast集落形成的影响.并对高增殖潜能集落形成细胞(high proliferative po...; 要晖宇; 文献传递

单克隆来源的小鼠胎肝HPP-CFC肝上皮分化潜能的研究: 2009年; 为研究胎肝中造血和肝上皮发育的关系,建立了小鼠胎肝高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)培养体系,并进行了单克隆培养以及诱导分化实验.在造血和肝诱导因子的共同作用下,对单克隆来源的HPP集落细胞向造血和肝上皮细胞进行诱导分化,采用透射电镜(TEM)、巢式RT-PCR、细胞免疫荧光检测,从细胞形态、超微结构、上皮细胞分化标志等方面对分化后的细胞进行检测.检测结果显示,诱导后的部分细胞具有肝细胞特异性的超微结构,并不同程度地表达白蛋白(ALB)、甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白(CK8,CK18)等肝上皮分化标志,同时还表达间质标志α-SMA和血管内皮细胞标志Flk-1.免疫磁珠分选表明:胎肝来源的HPP-CFC主要来自于CD45+细胞,CD45-细胞不具有形成造血细胞克隆的能力.在肝上皮细胞分化潜能上,流式分选获得的CD49f+/Sca-1+细胞与未分选细胞无明显差异.该模型的克隆源性通过细胞混合实验进行证明.研究结果表明,改进的胎肝来源的HPP-CFC可能代表了一个新的造血细胞向肝上皮细胞分化的单克隆模型,为研究胎肝中造血和非造血细胞的发育关系提供了一个新的切入点.; 周军年王韫芳要晖宇贺文艳陈海旭李思霆史岩施双双南雪白慈贤刘兵岳文毛宁裴雪涛; 关键词：胎肝造血

脐静脉内皮细胞的分离、培养和鉴定: ＜正＞目的：从人脐静脉中分离、培养脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HU- VEC）。; 刘元林江小霞要晖宇朱恒张毅毛宁; 文献传递

小鼠胚胎AGM区永生化MSC样基质细胞的分离及其生物学特征被引量：3: 2008年; 为了探讨小鼠胚胎主动脉-性腺-中肾(aorta-gonad-mesonephros,AGM)区基质微环境对胚胎造血的作用,分离鉴定小鼠背主动脉(dorsalaorta,DA)来源间充质干细胞样基质细胞(mesenchymal stem cell like stromal cells,MSC like stromal cells)并研究其生长特性、表面标志和间质分化能力。取E11.5小鼠胚胎,分离获得DA区细胞,转染质粒pSV3neo-SV40,筛选具有G418抗性的阳性细胞,挑取成纤维样细胞,传代培养并检测其增殖能力,应用流式细胞术检测相关表面标志,诱导其向脂肪、成骨和成软骨细胞分化。结果表明:筛选获得的20个细胞克隆多为成纤维样细胞。mDAF3和mDAF18可在体外传代50代以上,稳定表达G418抗性,细胞倍增时间约为24小时,具有向成骨细胞、脂肪细胞和成软骨细胞分化的能力,流式细胞术检测结果显示其表达CD29、CD44、CD105、Sca-1,弱表达CD34,CD45和CD31。结论:永生化的mDAF3和mDAF18具有MSC的表型特征和分化功能,提示小鼠胚胎DA区可能存在MSC,小鼠胚胎DA区MSC样基质细胞可为研究基质微环境对胚胎造血发育的调控作用提供支持细胞。; 方妮侯春梅要晖宇廖丽贺文艳张毅毛宁; 关键词：AGM区基质细胞

造血发育和内皮细胞的关系被引量：5: 2007年; 研究造血和血管内皮在胚胎发育中的关系,包含对造血细胞和内皮细胞的发育起源以及相关分子调控的探讨。以已有的研究结果为基础,对造血细胞和血管内皮细胞发育关系提出了成血血管细胞(hemangioblast)和生血内皮(hemogenic endothelium)的两种模式。在卵黄囊和P-Sp/AGM区,造血和内皮细胞的发育关系分别表现出不同的特点:二者在卵黄囊共同来源于成血血管细胞;在AGM区则更多表现为生血内皮的模式。造血和血管内皮相关分子的表达和调控作用的研究,不仅体现了造血和内皮在发育中的密切关系,同时也加深了对造血发育调控的认识。本文就原始造血和永久造血的发育、造血和血管内皮发育相关的两种模式及造血和内皮发育相关分子问题进行了综述。; 要晖宇刘兵毛宁; 关键词：造血细胞内皮细胞造血发育

内皮细胞特异性Smad4基因敲除导致小鼠胚胎血管的重塑和完整性缺陷(英文): 内皮细胞通过组装和分支形成新生血管,进一步通过合成沉积胞外基质和招募支持细胞维持血管的稳定。为阐明内皮细胞中的 Smad4在血管发育中的作用,我们利用 Cre-LoxP 系统在内皮细胞中特异性敲除了 Smad4基因,在生...; 兰雨刘兵要晖宇李芳菲翁土军杨冠李文龙程萱毛宁杨晓; 关键词：内皮细胞血管生成 SMAD4; 文献传递

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