郭军庆
- 作品数：74 被引量：90H指数：5
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- K_(88).K_(99)工程菌不同佐剂苗对鸡免疫效果的比较被引量：3
- 1997年
- 采用白油佐剂、弗氏不完全佐剂、氢氧化铝佐剂，分别同抗原（Ｋ８８Ｋ９９工程菌）混合、乳化，制成不同的佐剂苗。以ＰＢＳ（ｐＨ７．２、０．０１ｍｏｌ／ｌ）悬浮的细菌培养物为对照，分别对产蛋鸡进行免疫，用琼扩及ＥＬＩＳＡ检测卵黄抗体。结果表明，白油苗能够诱导产生高效价（１∶１２８）卵黄抗体，而且稳定时间在３０天内。
- 李学伍杨艳艳郭成留闫玉河邓瑞广张改平郭军庆李青梅陈直袁慧君
- 关键词：佐剂抗体工程菌免疫效果
- 一种猪瘟抗体阻断检测试纸
- 本发明公开了一种猪瘟抗体阻断检测试纸，由支撑板、抗原垫、金标垫、检测膜和吸水垫构成，抗原垫吸附猪瘟病毒检测抗原，金标垫吸附胶体金标记的抗猪瘟病毒单克隆抗体mAb1，检测膜上含有检测线T“|”和质控线C“|”印迹，检测线T...
- 王丽张改平郭军庆杨继飞张雨杭周人杰孙亚宁王瑞宁许倩茹杨艳艳李青梅柴书军
- 文献传递
- 牛CD14结构基因的PCR扩增及序列分析被引量：2
- 1998年
- 在用牛肺巨噬细胞构建了ｃＤＮＡ基因文库的基础上，参照人和小白鼠ＣＤ１４的基因序列设计一对引物，用ＰＣＲ方法成功地扩增出编码牛ＣＤ１４的特异性ＤＮＡ片段，并进行了序列分析。结果表明，牛ＣＤ１４基因的核苷酸在相同区域内与人ＣＤ１４的同源性为７９％，推导氨基酸序列的同源性为７３％；而与小白鼠的核苷酸和氨基酸的同源性分别为７５％和７１％。无论在核苷酸还是氨基酸水平上，牛ＣＤ１４基因与人ＣＤ１４的同源性都要高于与小白鼠的同源性。
- 阎玉河张改平李青梅李学伍杨艳艳郭军庆邓瑞广王爱萍
- 关键词：CD14结构基因聚合酶链反应
- 一种猪伪狂犬病毒强毒株和疫苗毒株鉴别检测试纸
- 本发明涉及一种家畜疫病感染与免疫的鉴别检测器具，特别是涉及一种猪伪狂犬病毒强毒和疫苗毒鉴别检测试纸，由支撑板，样品垫，金标垫，检测膜和吸水垫构成，检测膜上含有强毒检测线T1“│”，疫苗毒检测线T2“│”和质控线C“│”印...
- 乔松林杨继飞李青梅郭军庆邢广旭柴书军万博解伟涛王寅彪刘肖邓瑞广张改平
- K88和K99双价基因工程菌C株与E株表达效果的比较被引量：3
- 1998年
- 应用ＬＢ培养基３７℃、１５０ｒ／ｍｉｎ振荡培养１７小时，室温４０００ｒ／ｍｉｎ，离心３０分钟，收集沉淀菌体，用ＰＢＳ离心洗涤一次，沉淀物重悬于适量的ＰＢＳ中。三等分菌体悬浮液分别用超声波、冻融、热休克等方法处理后，室温８０００ｒ／ｍｉｎ离心３０分钟，取上清液加入饱和硫酸铵４℃过夜，沉淀蛋白经透析，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０过柱纯化。应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、凝胶扫描测定Ｋ８８、Ｋ９９蛋白的分子量及浓度，双向免疫扩散、ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ试验测定其抗原性。结果表明，热休克法分离纤毛抗原是最好的方法，从Ｃ株Ｅ株分离得到的纤毛抗原，在分子量大小及对单抗亲和反应能力方面没有明显的差异。
- 李学伍陈辉杨艳艳闫玉河郭成留邓瑞广郭军庆李青梅张改平
- 关键词：K88K99基因工程
- 猪伪狂犬病病毒gE蛋白的真核表达及其活性鉴定
- 2023年
- 为制备猪伪狂犬病病毒(PRV)gE重组蛋白并评估其抗原活性,将优化的PRV gE基因胞外区插入真核表达载体pCMV并在其C端加入Hexa-His标签,构建真核表达质粒pCMV-gE;将重组质粒转染HEK293F细胞,Dot blot鉴定转染细胞中gE重组蛋白的分泌表达;利用镍亲和层析和凝胶过滤层析从转染细胞培养上清中纯化gE表达蛋白;以SDS-PAGE和Western blot鉴定gE重组蛋白,利用PRV阳性血清以ELISA分析gE重组蛋白的抗原活性,通过去糖基化酶PNGase F鉴定其糖基化修饰及其对抗原活性的影响。Dot blot结果显示,gE重组蛋白通过自身信号肽实现在细胞培养上清的分泌表达,其表达量在转染96 h达到峰值。SDS-PAGE和Western blot结果显示,从细胞培养上清中纯化获得gE重组蛋白纯度约为90%,经去糖基化酶PNGase F处理的gE重组蛋白分子质量显著降低。间接ELISA结果显示,gE重组蛋白检测PRV阳性血清的抗体效价为1∶12800;PRV阳性血清对gE蛋白的检出限为31.25 ng/mL,其抗原活性是原核表达的4倍。对临床血清的检测结果显示,基于gE重组蛋白的ELISA与IDEXX抗体检测试剂盒的符合率为96.5%。综上,在真核细胞中分泌表达了具有高表达量、高纯度、高活性和糖基化修饰的gE重组蛋白,在PRV感染鉴别检测中具有良好的应用潜力。
- 王清龙王瑞宁王瑞宁李青梅李青梅张真真杨苏珍杨苏珍郭军庆
- 关键词：猪伪狂犬病病毒分泌表达抗原活性
- 旋毛虫病快速诊断试纸条
- 本实用新型涉及一种旋毛虫病诊断试剂显示器具,特别是涉及一种旋毛虫病快速诊断试纸条(I)和(II),含有支撑层、反应试剂载体吸附层,支撑层为不吸水薄片条,反应试剂载体吸附层粘贴于支撑层上,从样品端依次为纤维层,旋毛虫金标抗...
- 张改平李学伍杨艳艳邓瑞广肖治军康晓笛郭军庆李青梅李灵霞王爱萍杨继飞
- 文献传递
- 猪瘟病毒荧光定量PCR的建立及对病毒体外复制动态的研究被引量：1
- 2019年
- 为了了解猪瘟病毒(CSFV)在PK-15细胞上的增殖规律。根据GenBank中CSFV Shimen毒株的NS5A基因保守区域序列,设计1对特异性引物,以CSFV总RNA为反转录模板,经优化反应条件,建立了基于实时荧光定量PCR技术的CSFV检测方法,并对其进行了敏感性、特异性、重复性试验,结果显示,该方法重复性好、特异性强,最低检测模板浓度为10拷贝/μL,并且CSFV的最低检测限为1 TCID_(50)/mL。利用所建立的方法研究CSFV在PK-15细胞上清中的增殖动态,并与TCID_(50)方法绘制的复制动态曲线进行比较。结果显示,两种方法测定的CSFV在PK-15细胞上的复制动态具有一定的平行关系,该方法为研究猪瘟病毒的致病机理及利用体外细胞培养毒生产疫苗提供了试验依据。
- 王瑞宁王瑞宁李存法李存法李青梅张雨杭王丽郭军庆郭军庆
- 关键词：猪瘟病毒荧光定量PCR增殖规律
- 一种非洲猪瘟病毒核酸免提取三重荧光定量PCR检测组合物、方法及试剂盒
- 本发明涉及一种核酸免提取的非洲猪瘟病毒B646L、MGF505‑2R和CD2v三基因荧光定量PCR检测组合物、方法及试剂盒，属于分子检测技术领域。本发明针对非洲猪瘟病毒的B646L、MGF505‑2R和CD2v基因分别设...
- 郭振华邢广旭陈鑫鑫王方雨李睿乔松林郭军庆张改平
- 文献传递
- 一种猪瘟病毒强毒株和弱毒株鉴别检测试纸
- 本发明涉及一种家畜疫病感染与免疫的鉴别检测器具，特别是涉及一种猪瘟病毒强毒和弱毒鉴别检测试纸，由支撑板，样品垫，金标垫，检测膜和吸水垫构成，检测膜上含有强毒检测线T1“│”，弱毒检测线T2“│”和质控线C“│”印迹。鉴别...
- 郭军庆邢广旭王丽孙亚宁杨继飞杨艳艳郅玉宝柴书军李青梅王瑞宁邓瑞广张改平
